靶向肿瘤抗原BCMA和CD138的CAR-T细胞治疗多发性骨髓瘤的实验研究

发布时间：2021-11-08 08:31

　　研究背景多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）是恶性浆细胞疾病,需要不断探索新的治疗方法。免疫治疗是其中一种治疗方法,其作用机制与化疗药物不同。嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor,CAR）是将抗原识别结构域和T细胞信号传导结构域等蛋白融合起来。CAR-T细胞在白血病和淋巴瘤的成功应用,促使人们将CAR-T应用于治疗MM。CAR-T的设计需要合适的靶抗原,理想的靶抗原是骨髓瘤细胞表达较多,而正常细胞不表达,这样的CAR-T细胞能更好的杀伤肿瘤细胞,而副作用较少。根据以上情况,我们选择了人BCMA抗原和人CD138抗原作为靶抗原。选择两个靶抗原的目的是为后续设计能同时识别两个靶抗原的CAR奠定基础。随着CAR-T临床研究的开展,研究发现在治疗过程中肿瘤靶抗原表达下调甚至不表达,进而导致肿瘤复发,但具体机制尚不完全清楚。目前已有成熟的自发性小鼠骨髓瘤模型,非常贴近人MM的发生机制,是研究CAR-T治疗过程中肿瘤逃逸机制和制定治疗新策略的良好模型,但目前尚未有针对骨髓瘤（鼠源）的CAR-T细胞,因此我们设计了一个可以针对鼠CD138的CAR-T,为... 

【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市

【文章页数】：91 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图５．?ＣＡＲ结构和原理（引自：Ｋｉｔｅ?Ｐｈａｒｍａ，?Ｉｎｃ．Ｓａｎｔａ?Ｍｏｎｉｃａ参考文献）??

?解放军医学院博士学位论文???持续时间较短４７。第三代ＣＡＲ包含２个或２个以上的共刺激分子，不仅增强了??ＣＡＲ－Ｔ细胞的增殖能力、细胞因子分泌能力，而且存活时间延长，在临床应用中??也得到验证，但不良反应更加明显，故目前临床试验中，多以二代ＣＡＲ－Ｔ为主。??抗ＣＤ１９?ＣＡＲ－Ｔ细胞在治疗ＣＤ１９阳性的白血病和淋巴瘤取得了非常好的结??果，部分接受治疗的患者处于持续缓解状态４８。因为ＭＭ和急性淋巴细胞白血病??都广泛累及骨髓，所以我们希望将ＣＡＲ－Ｔ细胞扩展应用到ＭＭ的治疗中４９。??Ｆｉｒｓｔ?Ｓｅｃｏｎｄ?Ｔｈｉｒｄ??Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ?Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ?Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ??ＣＡＲ?ＣＡＲ?ＣＡＲ??

图７?ＭＭ细胞系均表达ＢＣＭＡ抗原??通过ＢＣＭＡ流式抗体和同型对照对ＲＰＭＩ－８２２６，?Ｕ２６６，?ＮＣＩ－Ｈ９２９ＭＭ细胞??系（阳性实验组）和Ｋ５６２白血病细胞系（阴性实验组）进行了染色。ＢＣＭＡ抗??原表达以平均荧光强度（ＭＦＩ）显示于结果图中。抗体检测结果如图中的蓝色曲??线，以同型非细胞蛋白同型对照作为对照（红色曲线）。结果显示，ＲＰＭＩ－８２２６，??Ｕ２６６，?ＮＣＩ－Ｈ９２９?均高表达人?ＢＣＭＡ?抗原，ＭＦＩ?分别?１１５０，?１２００，?５４０。而?Ｋ５６２??细胞不表达ＢＣＭＡ抗原，平均荧光强度仅为１７９。??第二部分鼠抗ＢＣＭＡ－ＣＡＲ－Ｔ细胞制备和功能检测??３．１抗ＢＣＭＡ－?ＣＡＲ的构建??＿?ａｎｔｉ遞，＿ａｉｎ?＇：＞丨ａｄｔｉ－ＢＣ＿ｅａｖｙ．ｃｔｏ?）?Ｃ０３ｚＫａ?＞??■＇?丨―????ｒ?ｒ????


本文编号：3483373