浆水无细胞培养液SCS-2的制备及其抗结直肠癌机制研究
发布时间：2021-11-19 11:57
结直肠癌（Colorectal Cancer,CRC）是一种恶性消化道肿瘤。随着病情的进展癌肿会逐渐增大并引起患者的排便习惯改变,导致其腹泻或便秘,并伴有局部腹痛或贫血等症状,由此而引发患者体重减轻、免疫功能下降。随着结直肠癌在我国发病率以及死亡率的逐年攀升,且其对人民的健康的威胁亦逐步加重。目前在临床上所采用的主要的治疗结直肠癌的方案对患者均有不同程度的副作用,而通过调节肠道微生物来改善治疗结果或确保患者在抗癌治疗中获得了更好的生活质量,越来越被认为是一种有效可行地方法。本研究从西北地区传统发酵食品浆水中分离益生菌及有效活性成分,研究其抗结直肠癌的机制。研究以浆水中分离的微生物分别对HCT116、SW480、HT29等结肠癌细胞其进行体外实验,通过MTT法对其抗结直肠癌的作用进行初步判定。测定浆水活性成分对癌细胞的周期和凋亡的影响,并通过Transwell迁移实验对其抗结直肠癌的作用进行初探,通过qRT-PCR法和Western Blot测定PI3K信号通路中重要信号分子在mRNA水平及蛋白水平的表达情况,初步探究浆水无细胞培养液SCS-2抗结直肠癌的作用机制。分析MTT实验中浆水活...
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
浆水中分离的4种微生物的显微图片
兰州大学硕士学位论文浆水无细胞培养液SCS-2的制备及其抗结直肠癌研究192.3.2冻干保护剂对浆水微生物存活率的影响图2-2三种冻干保护剂对浆水微生物存活率的影响Fig.2-2EffectofthreecryoprotectantsonthesurvivalrateofmicroorganismsinSerofluiddish为了确保后续实验中样品的稳定性并使其中微生物保持较高活性，需要在对其冻干前加入适当保护剂。根据实验结果，在无保护剂的条件下，菌种存活率为7.32%，而在加入不同浓度保护剂后，其存活率在一定范围内随着所添加保护剂浓度的提高而上升，但在超出一定限度后会出现小幅下降，此结果表明保护剂存在最佳浓度。谷氨酸钠和麦芽糊精的浓度为15g/100mL、海藻糖在其浓度达到13g/100mL，其微生物存活率达到最大。此时谷氨酸钠组的微生物存活率为63.76%，麦芽糊精组和海藻糖组的存活率分别为59.58%、52.26%。当超过上述范围时，其存活率则出现一定程度降低。但在单一保护剂作用时，其最高存活率仅为63.76%，难以确保后续实验高效实施。因而选择多种保护剂进行组合实验，筛选最优保护剂配比。浆水微生物冷冻干燥保护剂复配比例优化改进中运用响应面中心组合设计方案。利用Design-Expert10.0.4对响应面二次模型实施方差分析，其实际值二
兰州大学硕士学位论文浆水无细胞培养液SCS-2的制备及其抗结直肠癌研究22著交互关系。在单因素实验中，在一定范围内单一保护剂浓度与微生物冷冻干燥后得存活率存在正相关，但超出范围后，微生物存活率出现下降，即表明在该研究中应当存在最佳保护剂浓度。图2-3不同因素作用下的三维响应面曲线Fig.2-3Three-dimensionalresponsesurfacecurveunderdifferentfactors通过对研究结果的分析可知，在谷氨酸钠16.291g/100mL，海藻糖14.476g/100mL，麦芽糊精15.129g/100mL时，其冻干存活率最高。预测值为82.0356%。该实验中每组均独立重复三次，浆水微生物冻干存活率达81.06%±2.27%，其实验结果与方程预测值相近，即模型建立合理。2.3.3冻干粉在4个贮藏温度下的微生物存活率图2-4冻干粉在4个贮藏温度下的微生物存活率Fig.2-4Microbialsurvivalrateoffreeze-driedpowderat4storagetemperatures
【参考文献】：
期刊论文
[1]Colorectal cancer, radiotherapy and gut microbiota[J]. Shu Zhang,Qiaoxuan Wang,Chengjing Zhou,Kai Chen,Hui Chang,Weiwei Xiao,Yuanhong Gao. Chinese Journal of Cancer Research. 2019(01)
[2]浆水中细菌多样性分析及乳酸菌的分离鉴定[J]. 张晓辉,杨靖鹏,王少军,王静,樊明涛,魏新元. 食品科学. 2017(04)
[3]浆水中乳酸菌分离鉴定及其代谢特性的初步研究[J]. 孟宪刚,李雪萍,李建宏,谢佳佳,郑楠. 食品工业科技. 2015(01)
[4]甘肃省市售浆水中亚硝酸盐含量测定[J]. 郑洁,胡向轩,张莉,张培,刘晔玮. 中国食品卫生杂志. 2014(05)
[5]Intestinal microbiota, probiotics and prebiotics in inflammatory bowel disease[J]. Rok Orel,Tina Kamhi Trop. World Journal of Gastroenterology. 2014(33)
[6]Emerging roles of lactic acid bacteria in protection against colorectal cancer[J]. Li Zhong,Xufei Zhang,Mihai Covasa. World Journal of Gastroenterology. 2014(24)
[7]《金匮要略》“浆水”功用谈[J]. 黄蕊. 云南中医中药杂志. 2011(11)
[8]A randomized double-blind trial on perioperative administration of probiotics in colorectal cancer patients[J]. Luca Gianotti,Lorenzo Morelli,Francesca Galbiati,Simona Rocchetti,Sara Coppola,Aldo Beneduce,Cristina Gilardini,Daniela Zonenschain,Angelo Nespoli,Marco Braga. World Journal of Gastroenterology. 2010(02)
[9]酸浆水提物抗炎作用与一氧化氮关系的实验研究[J]. 王建礼,王友,林娜,朱凡河,田丹丹,孙海棚,张萌,张波,殷万斐,王立赞. 济宁医学院学报. 2008(04)
本文编号：3504988
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
浆水中分离的4种微生物的显微图片
兰州大学硕士学位论文浆水无细胞培养液SCS-2的制备及其抗结直肠癌研究192.3.2冻干保护剂对浆水微生物存活率的影响图2-2三种冻干保护剂对浆水微生物存活率的影响Fig.2-2EffectofthreecryoprotectantsonthesurvivalrateofmicroorganismsinSerofluiddish为了确保后续实验中样品的稳定性并使其中微生物保持较高活性，需要在对其冻干前加入适当保护剂。根据实验结果，在无保护剂的条件下，菌种存活率为7.32%，而在加入不同浓度保护剂后，其存活率在一定范围内随着所添加保护剂浓度的提高而上升，但在超出一定限度后会出现小幅下降，此结果表明保护剂存在最佳浓度。谷氨酸钠和麦芽糊精的浓度为15g/100mL、海藻糖在其浓度达到13g/100mL，其微生物存活率达到最大。此时谷氨酸钠组的微生物存活率为63.76%，麦芽糊精组和海藻糖组的存活率分别为59.58%、52.26%。当超过上述范围时，其存活率则出现一定程度降低。但在单一保护剂作用时，其最高存活率仅为63.76%，难以确保后续实验高效实施。因而选择多种保护剂进行组合实验，筛选最优保护剂配比。浆水微生物冷冻干燥保护剂复配比例优化改进中运用响应面中心组合设计方案。利用Design-Expert10.0.4对响应面二次模型实施方差分析，其实际值二
兰州大学硕士学位论文浆水无细胞培养液SCS-2的制备及其抗结直肠癌研究22著交互关系。在单因素实验中，在一定范围内单一保护剂浓度与微生物冷冻干燥后得存活率存在正相关，但超出范围后，微生物存活率出现下降，即表明在该研究中应当存在最佳保护剂浓度。图2-3不同因素作用下的三维响应面曲线Fig.2-3Three-dimensionalresponsesurfacecurveunderdifferentfactors通过对研究结果的分析可知，在谷氨酸钠16.291g/100mL，海藻糖14.476g/100mL，麦芽糊精15.129g/100mL时，其冻干存活率最高。预测值为82.0356%。该实验中每组均独立重复三次，浆水微生物冻干存活率达81.06%±2.27%，其实验结果与方程预测值相近，即模型建立合理。2.3.3冻干粉在4个贮藏温度下的微生物存活率图2-4冻干粉在4个贮藏温度下的微生物存活率Fig.2-4Microbialsurvivalrateoffreeze-driedpowderat4storagetemperatures
【参考文献】：
期刊论文
[1]Colorectal cancer, radiotherapy and gut microbiota[J]. Shu Zhang,Qiaoxuan Wang,Chengjing Zhou,Kai Chen,Hui Chang,Weiwei Xiao,Yuanhong Gao. Chinese Journal of Cancer Research. 2019(01)
[2]浆水中细菌多样性分析及乳酸菌的分离鉴定[J]. 张晓辉,杨靖鹏,王少军,王静,樊明涛,魏新元. 食品科学. 2017(04)
[3]浆水中乳酸菌分离鉴定及其代谢特性的初步研究[J]. 孟宪刚,李雪萍,李建宏,谢佳佳,郑楠. 食品工业科技. 2015(01)
[4]甘肃省市售浆水中亚硝酸盐含量测定[J]. 郑洁,胡向轩,张莉,张培,刘晔玮. 中国食品卫生杂志. 2014(05)
[5]Intestinal microbiota, probiotics and prebiotics in inflammatory bowel disease[J]. Rok Orel,Tina Kamhi Trop. World Journal of Gastroenterology. 2014(33)
[6]Emerging roles of lactic acid bacteria in protection against colorectal cancer[J]. Li Zhong,Xufei Zhang,Mihai Covasa. World Journal of Gastroenterology. 2014(24)
[7]《金匮要略》“浆水”功用谈[J]. 黄蕊. 云南中医中药杂志. 2011(11)
[8]A randomized double-blind trial on perioperative administration of probiotics in colorectal cancer patients[J]. Luca Gianotti,Lorenzo Morelli,Francesca Galbiati,Simona Rocchetti,Sara Coppola,Aldo Beneduce,Cristina Gilardini,Daniela Zonenschain,Angelo Nespoli,Marco Braga. World Journal of Gastroenterology. 2010(02)
[9]酸浆水提物抗炎作用与一氧化氮关系的实验研究[J]. 王建礼,王友,林娜,朱凡河,田丹丹,孙海棚,张萌,张波,殷万斐,王立赞. 济宁医学院学报. 2008(04)
本文编号：3504988
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