SOD2对人肺腺癌干细胞顺铂耐药及侵袭的影响
发布时间：2021-11-19 13:14
研究目的:1.检测超氧化物歧化酶2（Superoxide dismutase 2,SOD2）在肺腺癌A549细胞和A549干细胞中蛋白及mRNA表达水平。2.初步探讨SOD2对肺腺癌A549干细胞的调控和顺铂耐药及侵袭的影响。方法:1.用10%FBS培养基培养A549细胞,无限稀释法挑选紧密型单克隆A549细胞,用SFM培养基培养出二代A549干细胞球。2.CCK8试剂盒检测A549细胞和A549干细胞球的增殖差异,不同浓度顺铂下两种细胞存活率变化,及A549干细胞球经siRNA-SOD2转染后增殖情况。3.试剂盒分别检测不同浓度顺铂作用A549细胞及A549干细胞活性氧ROS含量和SOD2浓度,以及经siRNA-SOD2转染A549干细胞后ROS含量变化。4.Western Blot和RT-PCR分别检测A549细胞及A549干细胞球SOD2蛋白及mRNA表达水平,并检测这两种细胞多种转录因子（Bmi-1、Nanog、Sox2、Oct4）和凋亡蛋白（Bax、Bcl-2、Caspase3）表达水平差异,以及A549干细胞经不同浓度顺铂作用下SOD2、Bax、Bcl-2、Caspase3...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
线粒体SOD2的功能
第1章前言3于SOD2基因转录起始位点上游50个位置，提示这些多能转录因子可能在干细胞样状态下调控SOD2的转录[23]。Oluwaseun等[24]研究发现，SOD2的异常表达不但增强了大肠癌细胞的致瘤性和肿瘤干细胞样表型，而且还能协同增强氟尿嘧啶和奥沙利铂等化疗药物的敏感性。此外，SOD2还被认为是肿瘤的迁移和侵袭的重要因素。研究发现，超氧化物歧化酶2/谷胱甘肽过氧化物酶1（SOD2/GPx1）比值可以作为前列腺癌、结肠癌和肺癌进展和转移的生物标志物[25]。SOD2在肿瘤中的过表达可以通过多种机制增强侵袭性和迁移能力。比如，SOD2的激活增强了O2的清除，以适应与肿瘤进展相关的压力，并可以驱动H2O2介导的信号转导，而较高浓度的H2O2有利于肿瘤细胞的迁移和侵袭，H2O2依赖于SOD2的产生，通过Snai1和Slug信号通路参与了肿瘤细胞的迁移和侵袭（如图2b）。进一步研究发现，MYC原癌基因(c-myc)依赖SOD2表达的增加导致了舌鳞癌干细胞更多的迁移和侵袭性表型，同时增强了肿瘤干细胞的干性特性[26]。图2：SOD2在肿瘤中的调控综上所述，本课题拟探究超氧化物歧化酶2（SOD2）在A549肺腺癌干细胞中的表达水平及调控作用，并通过转染siRNA基因沉默技术，研究SOD2在A549肺腺癌干细胞的侵袭迁移的变化以及经顺铂干预后对细胞增殖、凋亡的影响，进而阐明SOD2在A549肺腺癌干细胞顺铂耐药及侵袭中的作用，以期为消除肺癌干细胞改善肺癌患者预后奠定理论基础，并拓展新的干预策略。
综述46图1线粒体SOD2的功能图2SOD2启动子2.调控SOD2的分子机制SOD2的表达受到转录、转录后及翻译等多水平的调控。在转录水平，SOD2作为肿瘤抑制因子的作用通常与SOD2表达减少有关，这是通过SOD2表观遗传调节或抑制肿瘤相关信号来影响基础和增强子转录机制。相反，SOD2的高表达通常与细胞内和细胞外刺激(包括与氧化还原应激相关的刺激)的转录上调有关。SOD2基因包含三个主要的调控区(上游增强子区域、近端启动子区域和第二内含子增强子区域)，它们负责结合参与SOD2转录激活或抑制的转录因子。SOD2的两个主要的转录因子Sp1和AP-2分别是激活和抑制因子，Sp1结合于启动子激活SOD2的转录，而AP-2通过与Sp1竞争结合位点或Sp1形成复合体以抑制SOD2的转录。此外，上游启动子区也有AP-1、HIF-1a、p53、C/EBP、Nrf2、FOXO3a等转录因子结合位点，共同对SOD2的表达进行调控[3]。研究显
【参考文献】：
期刊论文
[1]低氧对人肺腺癌A549多细胞球体上皮-间质转化促转移的影响[J]. 黄学德,熊吕平,叶小群. 肿瘤. 2012(03)
本文编号：3505116
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
线粒体SOD2的功能
第1章前言3于SOD2基因转录起始位点上游50个位置，提示这些多能转录因子可能在干细胞样状态下调控SOD2的转录[23]。Oluwaseun等[24]研究发现，SOD2的异常表达不但增强了大肠癌细胞的致瘤性和肿瘤干细胞样表型，而且还能协同增强氟尿嘧啶和奥沙利铂等化疗药物的敏感性。此外，SOD2还被认为是肿瘤的迁移和侵袭的重要因素。研究发现，超氧化物歧化酶2/谷胱甘肽过氧化物酶1（SOD2/GPx1）比值可以作为前列腺癌、结肠癌和肺癌进展和转移的生物标志物[25]。SOD2在肿瘤中的过表达可以通过多种机制增强侵袭性和迁移能力。比如，SOD2的激活增强了O2的清除，以适应与肿瘤进展相关的压力，并可以驱动H2O2介导的信号转导，而较高浓度的H2O2有利于肿瘤细胞的迁移和侵袭，H2O2依赖于SOD2的产生，通过Snai1和Slug信号通路参与了肿瘤细胞的迁移和侵袭（如图2b）。进一步研究发现，MYC原癌基因(c-myc)依赖SOD2表达的增加导致了舌鳞癌干细胞更多的迁移和侵袭性表型，同时增强了肿瘤干细胞的干性特性[26]。图2：SOD2在肿瘤中的调控综上所述，本课题拟探究超氧化物歧化酶2（SOD2）在A549肺腺癌干细胞中的表达水平及调控作用，并通过转染siRNA基因沉默技术，研究SOD2在A549肺腺癌干细胞的侵袭迁移的变化以及经顺铂干预后对细胞增殖、凋亡的影响，进而阐明SOD2在A549肺腺癌干细胞顺铂耐药及侵袭中的作用，以期为消除肺癌干细胞改善肺癌患者预后奠定理论基础，并拓展新的干预策略。
综述46图1线粒体SOD2的功能图2SOD2启动子2.调控SOD2的分子机制SOD2的表达受到转录、转录后及翻译等多水平的调控。在转录水平，SOD2作为肿瘤抑制因子的作用通常与SOD2表达减少有关，这是通过SOD2表观遗传调节或抑制肿瘤相关信号来影响基础和增强子转录机制。相反，SOD2的高表达通常与细胞内和细胞外刺激(包括与氧化还原应激相关的刺激)的转录上调有关。SOD2基因包含三个主要的调控区(上游增强子区域、近端启动子区域和第二内含子增强子区域)，它们负责结合参与SOD2转录激活或抑制的转录因子。SOD2的两个主要的转录因子Sp1和AP-2分别是激活和抑制因子，Sp1结合于启动子激活SOD2的转录，而AP-2通过与Sp1竞争结合位点或Sp1形成复合体以抑制SOD2的转录。此外，上游启动子区也有AP-1、HIF-1a、p53、C/EBP、Nrf2、FOXO3a等转录因子结合位点，共同对SOD2的表达进行调控[3]。研究显
【参考文献】：
期刊论文
[1]低氧对人肺腺癌A549多细胞球体上皮-间质转化促转移的影响[J]. 黄学德,熊吕平,叶小群. 肿瘤. 2012(03)
本文编号：3505116
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3505116.html
