白血病细胞诱导分化过程中nm23-H1表达变化及分子调控机制的研究

发布时间：2022-02-26 12:40

　　白血病是世界范围内常见血液系统的恶性克隆性疾病（HM）,尤其是在青少年中的发病率和致死率较高,目前大部分仍无法治愈,临床化疗放疗或者药物诱导并不能完全使患者康复痊愈率低。白血病是由于造血细胞的某一系列或者是某一白细胞前体细胞失去分化成熟能力,分化成熟受到阻碍,正常凋亡途径发生障碍,以至于出现了大量的异常分化的细胞,正常成熟的血液细胞减少,一系列临床症状出现,诱发白血病。因此,抑制白血病细胞增殖、促进细胞的分化与凋亡是治疗白血病的有效途径。目前,用于血液恶性肿瘤的治疗有着非常多的治疗方案,如前沿技术干细胞治疗、诱导分化药物的应用、免疫生物学疗法等等。但是这些治疗方法在发挥抗白血病的同时也存在诸多的不足之处:临床上的放疗和化疗虽然能使白血病缓解和暂时控制,但它缺乏特异性,在杀伤白血病细胞的同时,正常细胞也受到损伤。骨髓移植得到一定范围的肯定和推广,在白血病的治疗中起到很大的作用,但容易出现异体排斥和残留白血病细胞复发。对与血液恶性肿瘤的发生有关的某些关键基因的研究,已经成为根治血液肿瘤的着力点。肿瘤转移抑制基因nm23-H1是Steeg等用消减杂交法分离鉴定出来的,该基因是nm23基因家族... 

【文章来源】：济南大学山东省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
主要符号表
前言
材料与方法
    1.1 实验材料和器材设备
        1.1.1 实验材料
        1.1.2 主要仪器设备
    1.2 白血病细胞的培养
    1.3 实验模型的建立
        1.3.1 细胞增殖抑制实验CCK8
        1.3.2 瑞吉染色观察细胞形态
        1.3.3 表面分化抗原用流式细胞术检测
        1.3.4 建立模型
    1.4 ATRA诱导HL60与PMA诱导THP-1 后基因的检测
        1.4.1 RT-PCR检测诱导后HL-60细胞和THP-1 细胞中基因表达的变化
        1.4.2 逆转录反应
        1.4.3 聚合酶链式反应
        1.4.4 1%琼脂糖凝胶电泳
    1.5 蛋白质免疫印迹分析
        1.5.1 制备蛋白样品
        1.5.2 SDS-PAGE电泳
        1.5.3 灌胶与上样
        1.5.4 转膜
        1.5.5 免疫反应
        1.5.6 化学发光显色
    1.6 用ELISA检测G-CSF的表达水平
结果
    2.1 CCK8实验检测药物对细胞增殖的影响
    2.2 细胞形态学的变化
    2.3 细胞表面分化抗原变化
    2.4 nm23-H1、c-Myc、G-CSF mRNA水平的表达变化
    2.5 nm23-H1、c-Myc基因在蛋白水平上的表达变化
    2.6 用ELISA检测G-CSF的表达水平
讨论
结论
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]nm23-H1过表达对人白血病细胞系HL60细胞周期和分化的影响[J]. 袁茵,鲁欣,张美英,黄树林,王一飞.  肿瘤防治研究. 2007(03)
[2]RNAi技术沉默K562细胞中c-myc基因的初步研究[J]. 岳枫,马文丽,宋艳斌,石嵘,张宝,郑文岭.  第一军医大学学报. 2005(06)



本文编号：3644538