S100A6通过招募和活化巨噬细胞促进血管形成

发布时间：2022-04-28 21:33

　　目的:探讨S100A6经由巨噬细胞介导的促血管生成作用及机制。方法:（1）用重组蛋白GST-hS100A6处理巨噬细胞后:①收集上清制备条件培养基（简称A6-Mφ-CM）,并用之重悬人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,用体外血管形成试验检测各处理因素对血管形成的影响;②分别用实时荧光定量PCR和Western blot检测巨噬细胞的M2型标志物CD163及促血管形成因子CCL2、IL-6、VEGFA的mRNA和蛋白质水平,以及JAK2和STAT3的蛋白质及其磷酸化水平;③用Transwell迁移试验检测巨噬细胞迁移能力的变化。（2）使用JAK2抑制剂（XL019）预处理巨噬细胞后再加GST-hS100A6处理,检测S100A6促巨噬细胞迁移作用的变化。以重组蛋白GST为实验对照。结果:（1） A6-Mφ-CM组的血管分支数和血管分支长度既明显高于GST-Mφ-CM组（P值均小于0.05）,也明显高于GST-hS100A6直接处理的HUVEC组（P <0.001,P <0.01）,提示S100A6处理后的巨噬细胞具有促进血管形成的作用;（2） GST-hS100A6处理后的巨噬细... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞
        1.1.2 质粒及细菌
        1.1.3 Transwell小室
        1.1.4 血管形成基质胶
        1.1.5 主要试剂
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 GST-hS100A6和GST的制备及鉴定
        1.2.3 细胞免疫荧光染色
        1.2.4 血管形成试验
        1.2.5 RNA提取和实时荧光定量
        1.2.6 Western blot
        1.2.7 巨噬细胞迁移实验
        1.2.8 统计学方法
2 结果
    2.1 PMA成功诱导人单核巨噬细胞系THP-1为巨噬细胞
    2.2 S100A6诱导巨噬细胞向促血管表型(pro-angiogenic phenotype)转化，促进新生血管形成
    2.3 S100A6有招募巨噬细胞的作用，其机制涉及JAK2/STAT3信号通路的活化
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]S100A6通过巨噬细胞促结直肠癌细胞增殖的作用及机制[J]. 陈露,黄茂,彭棋,赵佳丽,谢佳卿,林璐,户丽君,黄逸云,胡琴,周兰.  中国生物工程杂志. 2019(04)
[2]微环境中S100A6直接和间接促进结直肠癌LoVo细胞迁移[J]. 赵佳丽,谢佳卿,谷月,李爱芳,陈露,黄茂,彭琪,曾宗跃,周兰.  肿瘤. 2018(06)
[3]S100A6促宫颈癌细胞增殖、迁移及其可能机制研究[J]. 李爱芳,谷月,李雪茹,孙晖,查何,谢佳卿,赵佳丽,周兰.  中国生物工程杂志. 2017(02)



本文编号：3649575