GDF15对Erastin诱导的胃癌细胞铁死亡的影响及其机制研究
发布时间：2022-05-02 22:33
目的:铁死亡（Ferroptosis）是一种新的调节性细胞死亡形式,是铁离子依赖的脂质过氧化物（Lipid reactive oxygen species,lipid ROS）累积到致死水平所导致的细胞死亡。铁死亡不能被凋亡抑制剂如坏死稳定素（Necrostatin-1）或自噬抑制剂如氯喹（Chloroquine）抑制,但是可被铁离子螯合剂如去铁胺（Deferoxamine）或者合成的抗氧化剂如ferrostatin-1抑制。铁死亡主要涉及铁离子代谢、脂质过氧化以及system Xc--GSH-GPX4轴。细胞内铁离子稳态与细胞对铁离子的吸收、排出和存储有关。细胞内铁离子调节蛋白的失调会导致细胞内Fe2+过量的积累并通过Fenton反应促进lipid ROS产生。System Xc-是一种广泛存在于磷脂双层膜中的氨基酸转运蛋白,溶质载体家族7成员11（Solute carrier family 7 member 11,SLC7A11）编码的轻链是system Xc-特有的亚基,且SLC7A11的表达水平通常与system Xc-的活性呈正相关。细胞通过system Xc-摄取细胞外胱氨...
【文章页数】：78 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分:GDF15对Erastin诱导的胃癌细胞铁死亡的影响
1 前言
2 材料和方法
2.1 细胞系
2.2 实验动物
2.3 主要实验材料和仪器
2.3.1 相关分子生物学实验材料
2.3.2 主要仪器
2.4 生物信息学网址和计算机分析软件
2.5 实验方法
2.5.1 细胞培养
2.5.2 细胞转染
2.5.3 细胞总RNA的提取
2.5.4 c DNA合成和实时定量PCR
2.5.5 Western blotting
2.5.6 Erastin、sorafenib和ferrostatin-1 储存液及工作液配制
2.5.7 CCK-8 检测细胞活性
2.5.8 细胞状态观察
2.5.9 动物实验
2.5.10 统计学数据分析
3 结果
3.1 Erastin诱导胃癌细胞铁死亡
3.2 敲低GDF15促进erastin诱导的胃癌细胞铁死亡
3.3 敲低GDF15促进erastin在裸鼠体内的抗肿瘤活性
4 讨论
5 结论
第二部分:GDF15对Erastin诱导的胃癌细胞中SLC7A11表达和功能的影响及其机制初步研究
6 前言
7 材料和方法
7.1 细胞系
7.2 主要实验材料和仪器
7.2.1 相关分子生物学实验材料
7.2.2 主要仪器
7.3 生物信息学网址和计算机分析软件
7.4 实验方法
7.4.1 细胞培养
7.4.2 细胞转染
7.4.3 细胞总RNA的提取
7.4.4 c DNA合成和实时定量PCR
7.4.5 Western blotting
7.4.6 免疫共沉淀
7.4.7 谷氨酸释放检测实验
7.4.8 谷胱甘肽检测实验
7.4.9 脂类过氧化物检测实验
7.4.10 统计学数据分析
8 结果
8.1 敲低GDF15对胃癌细胞中铁死亡相关基因表达的影响
8.2 GDF15介导erastin对胃癌细胞MGC803中SLC7A11表达的影响
8.3 GDF15对胃癌细胞中system Xc-功能的影响
8.4 GDF15介导erastin对胃癌细胞MGC803中system Xc-功能的影响
8.5 GDF15对胃癌细胞MGC803中SLC7A11表达调节的初步机制
9 讨论
10 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简介
本文编号：3650087
【文章页数】：78 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分:GDF15对Erastin诱导的胃癌细胞铁死亡的影响
1 前言
2 材料和方法
2.1 细胞系
2.2 实验动物
2.3 主要实验材料和仪器
2.3.1 相关分子生物学实验材料
2.3.2 主要仪器
2.4 生物信息学网址和计算机分析软件
2.5 实验方法
2.5.1 细胞培养
2.5.2 细胞转染
2.5.3 细胞总RNA的提取
2.5.4 c DNA合成和实时定量PCR
2.5.5 Western blotting
2.5.6 Erastin、sorafenib和ferrostatin-1 储存液及工作液配制
2.5.7 CCK-8 检测细胞活性
2.5.8 细胞状态观察
2.5.9 动物实验
2.5.10 统计学数据分析
3 结果
3.1 Erastin诱导胃癌细胞铁死亡
3.2 敲低GDF15促进erastin诱导的胃癌细胞铁死亡
3.3 敲低GDF15促进erastin在裸鼠体内的抗肿瘤活性
4 讨论
5 结论
第二部分:GDF15对Erastin诱导的胃癌细胞中SLC7A11表达和功能的影响及其机制初步研究
6 前言
7 材料和方法
7.1 细胞系
7.2 主要实验材料和仪器
7.2.1 相关分子生物学实验材料
7.2.2 主要仪器
7.3 生物信息学网址和计算机分析软件
7.4 实验方法
7.4.1 细胞培养
7.4.2 细胞转染
7.4.3 细胞总RNA的提取
7.4.4 c DNA合成和实时定量PCR
7.4.5 Western blotting
7.4.6 免疫共沉淀
7.4.7 谷氨酸释放检测实验
7.4.8 谷胱甘肽检测实验
7.4.9 脂类过氧化物检测实验
7.4.10 统计学数据分析
8 结果
8.1 敲低GDF15对胃癌细胞中铁死亡相关基因表达的影响
8.2 GDF15介导erastin对胃癌细胞MGC803中SLC7A11表达的影响
8.3 GDF15对胃癌细胞中system Xc-功能的影响
8.4 GDF15介导erastin对胃癌细胞MGC803中system Xc-功能的影响
8.5 GDF15对胃癌细胞MGC803中SLC7A11表达调节的初步机制
9 讨论
10 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简介
本文编号：3650087
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