抑制谷氨酰胺酶1对胃癌细胞生物学行为的影响及机制研究

发布时间：2023-10-17 18:13

　　研究背景与目的在我国胃癌是一个不容忽视的健康问题,发病率和死亡率极高且预后相对较差。代谢重编程是癌症特征之一,谷氨酰胺分解代谢是代谢重编程的重要途径,谷氨酰胺作为一种条件性非必需氨基酸,它的分解代谢在提供生物能、生物大分子和维持氧化还原平衡方面扮演了重要角色。谷氨酰胺酶是谷氨酰胺分解代谢的关键酶,本课题组前期研究发现胃癌组织中谷氨酰胺酶1(GLS1)是高表达的,胃癌细胞MGC803和SGC7901的生长依赖谷氨酰胺,细胞中GLS1酶活性较高,提示抑制谷氨酰胺酶的活性有望成为有效的肿瘤治疗手段。本实验利用谷氨酰胺酶1特异性抑制剂CB-839研究谷氨酰胺酶1的抑制对胃癌细胞生物学行为的影响及其可能的分子机制,为靶向谷氨酰胺酶临床治疗胃癌和药物研发提供实验依据和理论基础。方法1.采用CCK-8法测定不同浓度梯度的谷氨酰胺酶抑制剂CB-839对胃癌细胞MGC803和SGC7901增殖活力的影响,分别计算CB-839对胃癌细胞MGC803和SGC7901的IC50值。2.采用平板克隆实验检测谷氨酰胺酶抑制剂CB-839处理胃癌细胞MGC803和SGC7901后对细胞克隆形成的影响。3.采用流式细...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩略词
引言
1 实验材料
    1.1 研究对象
    1.2 实验试剂
    1.3 实验仪器
    1.4 溶剂的配置
2 实验方法
    2.1 细胞冻存与培养
    2.2 药物处理方法
    2.3 CCK8法检测抑制谷氨酰胺酶1对细胞增殖活力的影响
    2.4 平板克隆实验检测抑制谷氨酰胺酶1对细胞克隆的影响
    2.5 流式细胞仪检测谷氨酰胺酶1抑制后对细胞凋亡的影响
    2.6 细胞划痕法检测谷氨酰胺酶1抑制后对细胞迁移的影响
    2.7 Transwell实验检测谷氨酰胺酶1抑制后对侵袭的影响
    2.8 用试剂盒检测谷氨酰胺酶1抑制对ROS的影响
    2.9 Western Blot检测谷氨酰胺酶1抑制后对相关蛋白表达的影响
    2.10 数据的统计与分析
3 实验结果
    3.1 抑制谷氨酰胺酶1对细胞增殖活力的影响
    3.2 抑制谷氨酰胺酶1对细胞克隆形成的影响
    3.3 谷氨酰胺酶1抑制后对细胞凋亡的影响
    3.4 谷氨酰胺酶1抑制后对细胞迁移能力的影响
    3.5 抑制谷氨酰胺酶1对细胞侵袭能力的影响
    3.6 抑制谷氨酰胺酶1对ROS的影响
    3.7 抑制谷氨酰胺酶1对相关蛋白表达的影响
4 讨论
5 结论
参考文献
综述
    参考文献
个人简历
致谢



本文编号：3854758