miR-106b,miR-93靶向调控PTEN通过PI3K/Akt通路在乳腺癌进展中的研究

发布时间：2023-11-27 20:30

　　目的:通过比较miR-106b,miR-93在乳腺癌不同转移能力细胞株中(MCF-7,MDA-MB-231)的表达差异,阐明miRNAs在乳腺癌进展中的功能机制,为乳腺癌的早期诊断及治疗提供新的指导方向。方法:(1)通过qRT-PCR技术检测乳腺癌组织及细胞中miR-106b,miR-93的相对表达情况。(2)通过基因预测软件(TargetScan Human 7.1 and microRNA.org)预测miR-106b,miR-93的靶基因并采用双荧光素酶实验在乳腺癌细胞中确证miRNAs与靶向分子的调节关系。(3)特异性上调MCF-7(人类乳腺癌低转移株)中miR-106b,miR-93,下调MDA-MB-231(人类乳腺癌高转移株)中miR-106b,miR-93,检测上调及下调前后MCF-7,MDA-MB-231细胞中PTEN的变化及对功能实验的影响。(4)采用逆转实验检测过表达PTEN对上调miR-106b,miR-93的MCF-7细胞中PI3K/Akt通路及功能试验的影响,同时检测下调PTEN对干扰miR-106b,miR-93的MDA-MB-231细胞中PI3K/Akt...

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
    1. 实验材料
        1.1 实验对象
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器
    2. 实验方法
        2.1 细胞培养
        2.2 临床标本
        2.3 RNA提取Real-time PCR
        2.4 免疫组化分析（IHC）
        2.5 免疫荧光分析（IF）
        2.6 划痕试验
        2.7 侵袭实验
        2.8 细胞增殖实验 (CCK8)
        2.9 克隆形成实验
        2.10 免疫印迹分析
        2.11 肿瘤异种移植模型
        2.12 双荧光素酶报告实验
        2.13 转染实验
        2.14 统计分析
结果
    1. miR-106b, miR-93 在组织及细胞水平的差异表达
    2.在乳腺癌中，PTEN是miR-106b与mi R-93 的共同靶基因
    3. miR-106b, miR-93 表达调控对乳腺癌细胞生物学行为的影响
    4. miR-106b, miR-93 通过调控PTEN调节乳腺癌的生物学行为
    5. miR-106b, miR-93 靶向调控PTEN通过PI3K/Akt通路调节乳腺癌的生物学行为
讨论
结论
参考文献
综述 miRNAs与乳腺癌进展相关性的研究
    参考文献
攻读学位期间发表论文情况
致谢



本文编号：3868524