FAM83D促进非小细胞肺癌细胞上皮间质转化及侵袭迁移的作用研究

发布时间：2024-01-29 11:23

　　研究背景肺癌是最常见的癌症之一,发病率与死亡率位居恶性肿瘤之首。非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)占所有肺癌诊断病例的80%-85%。随着放化疗、分子靶向治疗、免疫治疗的广泛应用,NSCLC患者预后得到明显改善。然而,因NSCLC早期常无明显症状,40%左右的肺癌患者被确诊时已处于中晚期或已出现转移,包括淋巴结、脑和肝组织的远处转移等。对于已经出现转移的NSCLC患者目前尚缺乏有效的治疗手段,其5年生存率不足15%,复发和转移仍是NSCLC患者死亡的最主要原因。目前,NSCLC发生转移的分子机制尚未完全阐明,深入研究NSCLC转移相关的发病机制,对寻找有效的治疗靶点、提高NSCLC晚期患者的生存率和生活质量具有重要意义。细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程,在癌症的转移和多纤维化疾病中发挥了重要作用。在上皮间质转化过程中,癌症细胞由上皮细胞形态向间质细胞形态转化,细胞间黏附能力减弱,细胞侵入性和迁移能力增强,进而促进肿瘤细胞发...

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
前言
材料和方法
    1. 实验材料
        1.1 细胞株及质粒
        1.2 细胞培养及冻存试剂
        1.3 质粒构建及提取试剂
        1.4 RNA提取及qRT-PCR试剂
        1.5 蛋白质提取试剂
        1.6 细胞转染试剂
        1.7 抗体
        1.8 Western blot实验试剂
        1.9 免疫荧光和免疫组化实验试剂
        1.10 其他试剂
    2. 主要实验仪器
    3. 实验方法
        3.1 主要溶液和试剂的配制
        3.2 细胞转染
        3.3 细胞RNA提取
        3.4 逆转录和实时定量PCR (qRT-PCR)
        3.5 琼脂糖凝胶电泳
        3.6 免疫组织化学染色
        3.7 总蛋白提取
        3.8 BCA法测试蛋白浓度
        3.9 Western blot
        3.10 逆转录病毒制备和感染
        3.11 慢病毒制备和感染
        3.12 注意事项
        3.13 质粒构建及纯化
        3.14 细胞迁移实验
        3.15 细胞划痕实验
        3.16 细胞侵袭实验
        3.17 MTT实验
        3.18 免疫荧光实验
        3.19 统计学分析
结果
    1. FAM83D在NSCLC细胞和组织中表达明显升高
        1.1 FAM83D在NSCLC细胞中高表达
        1.2 FAM83D在NSCLC组织中高表达
    2. FAM83D促进NSCLC细胞的肿瘤特性
        2.1 构建稳定沉默和过表达FAM83D细胞系
        2.2 FAM83D促进NSCLC细胞增殖
        2.3 FAM83D促进NSCLC细胞EMT的发生
        2.4 FAM83D促进NSCLC细胞侵袭和迁移的作用
    3. FAM83D调控AKT/mTOR信号通路促进NSCLC转移
        3.1 FAM83D激活AKT/mTOR信号通路
        3.2 FAM83D通过调控AKT/mTOR通路促进NSCLC细胞EMT及侵袭迁移
讨论
展望
附图
参考文献
致谢
攻读硕士期间发表的论文
学位论文评阅及答辩情况表



本文编号：3888093