MiR-182对恶性胸膜间皮瘤细胞活力、增殖及侵袭能力的影响及机制

发布时间：2024-02-06 22:36

　　目的:探讨Mi R-182对恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)细胞中的生物学行为的影响及作用机制。方法:构建人mi R-182的类似物mi R-182 mimic及对照NC-mimic。将人间皮瘤细胞NCI-H2452分为如下三组:Control组(不转染),NC-mimic组(NC-mimic转染组),mi R-182 mimic组(mi R-182 mimic转染组)。然后,RT-PCR测定各组细胞mi R-182的表达,MTT法评估细胞的活力,流式检测细胞的增殖、凋亡情况,而Transwell检测侵袭能力。此外,荧光素酶报告实验及Western blot实验明确下游靶分子。结果:mi R-182 mimic组中mi R-182的表达显著高于Control组及NC-mimic组(P<0.001)。mi R-182 mimic组的细胞活力与增殖较Control组及NC-mimic组显著升高。此外,mi R-182 mimic组穿过Transwell小室的细胞数明显增加(P<0.01)。双荧光素酶报告实验表明mi R-18...

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图1.RT-PCR检测各组细胞中miR-182的表达

实验结果7实验结果1miR-182mimic可上调miR-182的表达在MPM细胞系NCI-H2452转染miR-182mimic24h后，miR-182mimic组miR-182的表达显著高于对照组(图1，P＜0.001)，而NCmimic、Control两对照组间无差异。这提....

图2.miR-182mimic对NCI-H2452活力的影响

青岛大学硕士学位论文82高表达miR-182对NCI-H2452活力的影响为明确miR-182对NCI-H2452活力的作用，转染miR-182mimic或NC-mimic48h并行MTT实验。MTT结果显示，miR-182mimic组的细胞活力显著高于对照组(图2，P＜0.00....

图3.流式法检测各组细胞的周期分布

实验结果93高表达miR-182促进NCI-H2452的增殖细胞增殖、分裂往往伴随细胞周期的改变，而细胞周期的改变亦反映细胞的增殖情况，为明确miR-182对NCI-H2452细胞增殖及周期分布的影响，我们待细胞转染48h后，采用流式进行了周期检测。细胞周期检测显示，miR-18....

图4.流式检测细胞的凋亡

青岛大学硕士学位论文104高表达miR-182对细胞凋亡的影响凋亡抵抗是包括胸膜间皮瘤在内多种肿瘤的重要细胞病理改变，为评估miR-182对NCI-H2452凋亡的影响，我们对干预后的细胞进行AnnexinⅤ-FITC和PI双重染色，并流式上机检测。流式检测结果示：miR-182....

本文编号：3896306