IGFBP2在肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭中的作用及机制研究
发布时间：2024-02-14 18:17
肝细胞癌(HCC)发病率逐年增加,已经成为威胁人类生命健康的重大疾病。HCC的早期诊断包括影像学(超声、CT和磁共振)和血清学检测等,由于影像学检测成本较高,血清学特异性肿瘤标志物的检测越来越受到人们的重视,其中甲胎蛋白(AFP)是当前诊断HCC最特异的标记物之一,但由于个体的差异,AFP检测会出现假阳性或假阴性的结果,因此我们需要寻求新的生物标志物与AFP联合诊断HCC,以提高诊断的准确性。近年,胰岛素样生长因子(IGF)家族蛋白成为HCC发展和进展中的重要因子,其中胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)在HCC病人血清中表达增高,与病人的不良预后相关,但IGFBP2在HCC中的作用机制尚不清楚。研究表明,IGFBP2可通过IGF非依赖途径介导细胞生长,蛋白的C端有Arg-Gly-Asp(RGD)结构域与整合素受体β1(Integrinβ1)相互作用,Integrinβ1的活化状态下,FAK发生磷酸化,可以介导下游信号通路的激活,如JNK通路、Rac1通路和Mek/Erk通路等,提示Integrinβ1可能作为其受体在HCC增殖中发挥作用。在HCC中,早期生长反应因子1(Egr-...
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
英文缩略词表(Abbreviation)
摘要
Abstract
一、前言
二、实验
实验一 IGFBP2、Integrinβ1和Egr-1 在临床HCC患者血清以及肿瘤组织中的表达
1.实验材料
1.1 临床样本的采集
1.2 材料与试剂
1.3 实验仪器
2.实验方法
2.1 蛋白芯片法检测HCC患者及健康人血清中IGFBP2 的含量
2.2 HE染色法检测HCC患者肿瘤组织及癌旁组织病理特征
2.3 免疫组化法比较IGFBP2、Integrinβ1及Egr-1在HCC患者肿瘤组织及癌旁组织中的表达
2.4 Western blot法比较IGFBP2、Integrinβ1及Egr-1在HCC患者肝癌组织及癌旁组织中的表达
2.4.1 HCC患者肿瘤组织及癌旁组织蛋白的提取
2.4.2 BCA法蛋白定量
2.4.3 Western blot法
2.5 统计学分析
3 结果
3.1 HCC患者血清和健康人血清中IGFBP2 的含量
3.2 HCC患者中肿瘤组织及癌旁组织病理特征
3.3 IGFBP2、Integrin β1 及 Egr-1 在 HCC 患者肿瘤组织及癌旁组织中的表达
3.4 IGFBP2、Integrin β1、Egr-1 及 p-FAK 在 HCC 患者肿瘤组织及癌旁组织中的表达
4 小结
实验二 IGFBP2对HCC细胞增殖、迁移和侵袭中的作用及分子影响
1 实验材料
1.1 细胞
1.2 试剂
1.3 实验仪器
2 实验方法
2.1 CCK-8 法检测不同浓度r IGFBP2对Hep G2和HCC-LM3 细胞增殖的影响
2.2 Transwell法检测不同浓度r IGFBP2对Hep G2和HCC-LM3 细胞迁移和侵袭的影响
2.3 Western blot法检测r IGFBP2 刺激Hep G2和HCC-LM3 细胞不同时间IGFBP2、Integrinβ1、p-FAK、Egr-1、p-Erk及 p-AKT蛋白的表达
2.4 免疫荧光法检测HCC细胞中活化的Integrinβ1 蛋白的表达
2.5 Co-IP法检测Hep G2 细胞中Integrinβ1和p-FAK的共表达
2.6 统计学分析
3 实验结果
3.1 不同浓度的rIGFBP2对Hep G2及HCC-LM3 细胞增殖的影响
3.2 不同浓度rIGFBP2 刺激Hep G2及HCC-LM3 细胞迁移的影响
3.3 不同浓度rIGFBP2对Hep G2和HCC-LM3 细胞侵袭的影响
3.4 rIGFBP2 刺激Hep G2 细胞不同时间对IGFBP2、Integrinβ1、p-FAK、Egr-1、p-Erk和 p-AKT蛋白的表达的影响
3.5 rIGFBP2对HCC细胞中活化的Integrinβ1 蛋白表达的影响
3.6 rIGFBP2对Hep G2 细胞中Integrinβ1和p-FAK的共表达的影响
4 小结
三、讨论
1.IGFBP2在HCC中的表达及临床意义
2.rIGFBP2 促进HCC细胞增殖、迁移和侵袭的作用可能与其上调Egr-1的表达有关
3.在HCC中,IGFBP2 可能通过与其受体Integrinβ1 结合,活化FAK,继而激活下游信号通路Mek/Erk,上调Egr-1 的表达
四、结论
五、下步工作设想
六、参考文献
附录
致谢
综述 胰岛素样生长因子结合蛋白在肝细胞癌中的作用
参考文献
本文编号：3898391
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
英文缩略词表(Abbreviation)
摘要
Abstract
一、前言
二、实验
实验一 IGFBP2、Integrinβ1和Egr-1 在临床HCC患者血清以及肿瘤组织中的表达
1.实验材料
1.1 临床样本的采集
1.2 材料与试剂
1.3 实验仪器
2.实验方法
2.1 蛋白芯片法检测HCC患者及健康人血清中IGFBP2 的含量
2.2 HE染色法检测HCC患者肿瘤组织及癌旁组织病理特征
2.3 免疫组化法比较IGFBP2、Integrinβ1及Egr-1在HCC患者肿瘤组织及癌旁组织中的表达
2.4 Western blot法比较IGFBP2、Integrinβ1及Egr-1在HCC患者肝癌组织及癌旁组织中的表达
2.4.1 HCC患者肿瘤组织及癌旁组织蛋白的提取
2.4.2 BCA法蛋白定量
2.4.3 Western blot法
2.5 统计学分析
3 结果
3.1 HCC患者血清和健康人血清中IGFBP2 的含量
3.2 HCC患者中肿瘤组织及癌旁组织病理特征
3.3 IGFBP2、Integrin β1 及 Egr-1 在 HCC 患者肿瘤组织及癌旁组织中的表达
3.4 IGFBP2、Integrin β1、Egr-1 及 p-FAK 在 HCC 患者肿瘤组织及癌旁组织中的表达
4 小结
实验二 IGFBP2对HCC细胞增殖、迁移和侵袭中的作用及分子影响
1 实验材料
1.1 细胞
1.2 试剂
1.3 实验仪器
2 实验方法
2.1 CCK-8 法检测不同浓度r IGFBP2对Hep G2和HCC-LM3 细胞增殖的影响
2.2 Transwell法检测不同浓度r IGFBP2对Hep G2和HCC-LM3 细胞迁移和侵袭的影响
2.3 Western blot法检测r IGFBP2 刺激Hep G2和HCC-LM3 细胞不同时间IGFBP2、Integrinβ1、p-FAK、Egr-1、p-Erk及 p-AKT蛋白的表达
2.4 免疫荧光法检测HCC细胞中活化的Integrinβ1 蛋白的表达
2.5 Co-IP法检测Hep G2 细胞中Integrinβ1和p-FAK的共表达
2.6 统计学分析
3 实验结果
3.1 不同浓度的rIGFBP2对Hep G2及HCC-LM3 细胞增殖的影响
3.2 不同浓度rIGFBP2 刺激Hep G2及HCC-LM3 细胞迁移的影响
3.3 不同浓度rIGFBP2对Hep G2和HCC-LM3 细胞侵袭的影响
3.4 rIGFBP2 刺激Hep G2 细胞不同时间对IGFBP2、Integrinβ1、p-FAK、Egr-1、p-Erk和 p-AKT蛋白的表达的影响
3.5 rIGFBP2对HCC细胞中活化的Integrinβ1 蛋白表达的影响
3.6 rIGFBP2对Hep G2 细胞中Integrinβ1和p-FAK的共表达的影响
4 小结
三、讨论
1.IGFBP2在HCC中的表达及临床意义
2.rIGFBP2 促进HCC细胞增殖、迁移和侵袭的作用可能与其上调Egr-1的表达有关
3.在HCC中,IGFBP2 可能通过与其受体Integrinβ1 结合,活化FAK,继而激活下游信号通路Mek/Erk,上调Egr-1 的表达
四、结论
五、下步工作设想
六、参考文献
附录
致谢
综述 胰岛素样生长因子结合蛋白在肝细胞癌中的作用
参考文献
本文编号：3898391
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3898391.html
