WDR54在结直肠癌中的表达及其生物学功能研究

发布时间：2024-02-24 01:03

　　目的:WDR重复(WD40 repeat)结构域蛋白家族参与细胞的多种活动,如:G蛋白偶联受体信号转导、DNA损伤感知和修复、细胞生长和分裂等。本文旨在对其家族成员之一WDR54(WD repeat domain 54)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的生物学功能进行研究。方法:(1)应用免疫组化技术检测945例结直肠癌组织、36例癌旁组织、17例肝转移标本中WDR54的表达情况;(2)应用qRT-PCR、WB技术检测WDR54在FHC、RKO、Caco-2、SW480中mRNA和蛋白的表达情况;(3)siRNA下调WDR54的表达,观察对CRC细胞株增殖、侵袭、迁移能力的影响;(4)在WDR54过表达(亚型a,b,c)株中分别转染siRNA后与对照组相比,观察CRC细胞增殖表型的变化;(5)将稳敲细胞株植入裸鼠背部构建移植瘤模型,探索WDR54下调是否对体内的肿瘤生长产生影响。结果:(1)免疫组化显示WDR54在CRC中的表达是升高的,WDR54高表达的肿瘤患者相对于WDR54低表达的患者通常有一个较低的疾病特异性生存率(DSS),尤其是高度分化的肿瘤组。多...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
主要缩略词中英文对照
第一章 前言
第二章 材料与方法
    1 材料
        1.1 实验动物
        1.2 组织标本
        1.3 细胞株
        1.4 主要试验仪器
        1.5 主要试剂与耗材
        1.6 试剂配置
    2 实验方法
        2.1 WDR54的生物信息学分析
        2.2 细胞培养
        2.3 免疫组化
        2.4 WDR54的qPCR检测
        2.5 WB检测WDR54的蛋白表达水平
        2.6 细胞瞬转
        2.7 稳转细胞株的构建
        2.8 细胞增殖实验
        2.9 侵袭迁移实验(24孔板)
        2.10 动物实验
        2.11 统计分析
第三章 实验结果
    1 生物信息学分析WDR54在CRC中高表达
    2 qPCR、WB验证WDR54在结直肠癌中表达上调
    3 IHC检测WDR54在结直肠癌组织中的表达及生存分析
    4 下调WDR54基因抑制CRC细胞的生长
    5 WDR54下调抑制CRC细胞的侵袭迁移能力
    6 WDR54-shRNA抑制裸鼠体内移植瘤的生长
    7 过表达WDR54亚型回复siWDR54对CRC细胞的抑制作用
第四章 讨论
附录
参考文献
致谢



本文编号：3908269