p90/CIP2A在乳腺癌中的免疫诊断价值及其对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响
发布时间：2024-03-23 04:18
乳腺癌是女性患者中最普遍的肿瘤之一,并且在发达国家中是由于癌症导致死亡的第二大原因。虽然近年来,通过影像学的检测使乳腺癌的早期诊断有所改善,但是在许多国家中,乳腺癌的发病率和死亡率仍然呈上升趋势。因此,筛选和鉴定有价值的生物标志物可以提高乳腺癌的诊断率以及预防乳腺癌的复发和转移,同时发现新的治疗靶点对于有效地控制侵袭性乳腺癌也是极其重要的。蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase2A,CIP2A),也称为KIAA1524或者p90肿瘤相关抗原,是一个新发现的癌蛋白。据报道,它在人类肿瘤中通过稳定致癌性转录因子c-Myc的表达,抑制蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)的活性。在一些恶性肿瘤细胞中,下调p90/CIP2A的表达可以降低肿瘤细胞的增殖能力,并且减小异种移植肿瘤的生成。虽然p90/CIP2A在许多肿瘤中呈现高表达,并且其表达水平与某些肿瘤的预后相关,但是目前还没有完全揭示p90/CIP2A蛋白在肿瘤发生发展中的功能和机制。首先,本研究欲探讨抗p90/CIP2A自身抗体是...
【文章页数】：110 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词索引
引言
第一章 抗p90/CIP2A自身抗体在乳腺癌免疫诊断中的价值
前言
技术路线
1 材料
1.1 临床样本
1.2 主要仪器设备及相关材料
1.3 主要试剂
1.4 常用试剂的配制
2 方法
2.1 纯化GST-p90/CIP2A融合蛋白
2.2 提纯p90/CIP2A蛋白
2.3 酶联免疫吸附实验
2.4 间接免疫荧光实验
2.5 SDS-PAGE凝胶电泳
2.6 转膜
2.7 Western blotting
2.8 免疫组织化学实验
2.9 统计学分析
3 结果
3.1 GST-p90/CIP2A融合蛋白的诱导表达
3.2 GST-p90/CIP2A融合蛋白的纯化
3.3 GST-p90/CIP2A蛋白的提纯
3.4 Bradford法测定GST-p90/CIP2A蛋白浓度
3.5 抗p90/CIP2A自身抗体在乳腺癌血清中阳性率的测定
3.6 应用ROC曲线评价抗p90/CIP2A自身抗体对乳腺癌的诊断价值
3.7 p90/CIP2A蛋白在HEp-2 细胞中的表达位点
3.8 p90/CIP2A蛋白在乳腺癌组织中表达的检测
4 讨论
4.1 抗p90/CIP2A自身抗体在乳腺癌血清中阳性率的测定
4.2 p90/CIP2A蛋白在HEp-2 细胞中的表达位点
4.3 p90/CIP2A蛋白在乳腺癌组织中表达水平的检测
小结
第二章 p90/CIP2A调控乳腺癌细胞增殖和凋亡的作用
前言
技术路线
1 材料
1.1 细胞株的选择
1.2 慢病毒载体系统
1.3 主要仪器设备及相关实验材料
1.4 主要试剂
1.5 常用试剂的配制
2 方法
2.1 慢病毒介导的细胞转染
2.2 细胞计数
2.3 细胞的传代培养
2.4 细胞的冻存与复苏
2.5 SDS-PAGE电泳
2.6 转膜
2.7 Western blotting
2.8 细胞增殖实验
2.9 克隆形成实验
2.10 免疫荧光实验
2.11 细胞凋亡的检测
2.12 统计学分析
3 结果
3.1 p90/CIP2A在不同乳腺癌细胞系中的表达
3.2 RNA干涉抑制p90/CIP2A在乳腺癌细胞中稳定表达模型的建立
3.3 p90/CIP2A蛋白在乳腺癌细胞中表达的荧光定位
3.4 沉默p90/CIP2A的表达抑制乳腺癌细胞的增殖和克隆形成
3.5 p90/CIP2A的缺失促进由紫杉醇诱导乳腺癌细胞的凋亡作用
3.6 抑制p90/CIP2A的表达下调c-Myc和ERK1/2 磷酸化
4 讨论
4.1 沉默p90/CIP2A的表达抑制乳腺癌细胞的增殖和克隆形成
4.2 p90/CIP2A的缺失促进由紫杉醇诱导乳腺癌细胞的凋亡作用
4.3 抑制p90/CIP2A的表达下调c-Myc和ERK1/2 磷酸化
小结
本研究的创新点与不足之处
下一步研究计划
参考文献
综述
参考文献
个人简历、在学期间发表的学术论文及参与科研项目
致谢
本文编号：3935447
【文章页数】：110 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词索引
引言
第一章 抗p90/CIP2A自身抗体在乳腺癌免疫诊断中的价值
前言
技术路线
1 材料
1.1 临床样本
1.2 主要仪器设备及相关材料
1.3 主要试剂
1.4 常用试剂的配制
2 方法
2.1 纯化GST-p90/CIP2A融合蛋白
2.2 提纯p90/CIP2A蛋白
2.3 酶联免疫吸附实验
2.4 间接免疫荧光实验
2.5 SDS-PAGE凝胶电泳
2.6 转膜
2.7 Western blotting
2.8 免疫组织化学实验
2.9 统计学分析
3 结果
3.1 GST-p90/CIP2A融合蛋白的诱导表达
3.2 GST-p90/CIP2A融合蛋白的纯化
3.3 GST-p90/CIP2A蛋白的提纯
3.4 Bradford法测定GST-p90/CIP2A蛋白浓度
3.5 抗p90/CIP2A自身抗体在乳腺癌血清中阳性率的测定
3.6 应用ROC曲线评价抗p90/CIP2A自身抗体对乳腺癌的诊断价值
3.7 p90/CIP2A蛋白在HEp-2 细胞中的表达位点
3.8 p90/CIP2A蛋白在乳腺癌组织中表达的检测
4 讨论
4.1 抗p90/CIP2A自身抗体在乳腺癌血清中阳性率的测定
4.2 p90/CIP2A蛋白在HEp-2 细胞中的表达位点
4.3 p90/CIP2A蛋白在乳腺癌组织中表达水平的检测
小结
第二章 p90/CIP2A调控乳腺癌细胞增殖和凋亡的作用
前言
技术路线
1 材料
1.1 细胞株的选择
1.2 慢病毒载体系统
1.3 主要仪器设备及相关实验材料
1.4 主要试剂
1.5 常用试剂的配制
2 方法
2.1 慢病毒介导的细胞转染
2.2 细胞计数
2.3 细胞的传代培养
2.4 细胞的冻存与复苏
2.5 SDS-PAGE电泳
2.6 转膜
2.7 Western blotting
2.8 细胞增殖实验
2.9 克隆形成实验
2.10 免疫荧光实验
2.11 细胞凋亡的检测
2.12 统计学分析
3 结果
3.1 p90/CIP2A在不同乳腺癌细胞系中的表达
3.2 RNA干涉抑制p90/CIP2A在乳腺癌细胞中稳定表达模型的建立
3.3 p90/CIP2A蛋白在乳腺癌细胞中表达的荧光定位
3.4 沉默p90/CIP2A的表达抑制乳腺癌细胞的增殖和克隆形成
3.5 p90/CIP2A的缺失促进由紫杉醇诱导乳腺癌细胞的凋亡作用
3.6 抑制p90/CIP2A的表达下调c-Myc和ERK1/2 磷酸化
4 讨论
4.1 沉默p90/CIP2A的表达抑制乳腺癌细胞的增殖和克隆形成
4.2 p90/CIP2A的缺失促进由紫杉醇诱导乳腺癌细胞的凋亡作用
4.3 抑制p90/CIP2A的表达下调c-Myc和ERK1/2 磷酸化
小结
本研究的创新点与不足之处
下一步研究计划
参考文献
综述
参考文献
个人简历、在学期间发表的学术论文及参与科研项目
致谢
本文编号：3935447
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