GSG2在肝细胞肝癌中的表达及其调控机制研究

发布时间：2024-05-08 06:29

　　目的分析GSG2在肝癌及癌旁组织中的表达水平及其与患者临床病理特征的相关性。研究GSG2敲减对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移以及细胞周期的影响。构建荷瘤模型,研究GSG2敲减对小鼠体内肿瘤生长发育的影响。方法1.获取患者知情同意,收集患者肝癌及癌旁样本。同时记录患者临床病理资料,主要包括患者年龄、性别、TNM分期、肿瘤病理分级以及肿瘤分期。应用免疫组化测得肝癌及癌旁组织中GSG2的表达水平,并应用统计软件分析GSG2表达水平与病人临床资料的相关性。2.应用MTT法检测GSG2敲减后肝癌细胞增殖情况,克隆形成实验检测GSG2敲减对肝癌细胞克隆能力的影响,划痕实验检测GSG2敲减对肝癌细胞迁移的影响,流式细胞法检测GSG2敲减对肝癌细胞凋亡的影响。应用流式细胞仪检测出细胞DNA含量,最后软件分析计算出细胞所处周期。3.肿瘤在体内的生长发育:在小鼠前肢腋下注射肿瘤细胞建立荷瘤模型后,定期记录并计算出肿瘤大小、体积及小鼠重量,应用小动物活体成像仪测量肿瘤的荧光强度。处死小鼠获得肿瘤组织后,使用免疫组化检测肿瘤样本Ki-67表达水平。结果1.免疫组织化学结果显示:179例原发性肝癌标本中GSG2表达水...

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【部分图文】：

图３．?１?ＧＳＧ２在原发性肝癌组织及癌旁组织中的表达水平??

????３结果??３．?１?ＧＳＧ２在肝癌及癌旁组织中的表达??免疫组化检测ＧＳＧ２在肝癌及癌旁组织中的表达水平。ＧＳＧ２是胞浆和胞核??染色，阳性细胞可呈淡黄色或棕黄色。免疫组化结果：ＧＳＧ２在肝癌组织中的表??达水平较癌旁组织增高（放大倍数２００Ｘ），详见图３．?１。??ｍ?....

图３．?３转染７２小时后细胞感染效率??

????３．２?ＧＳＧ２在肝癌细胞系中的敲减效率??检测ＧＳＧ２在４种肝癌细胞系内本底表达水平，定量ＰＣＲ结果显示，??Ｈｅｐ３Ｂ２．１－７，?ＳＫ－ＨＥＰ－１和ＨＣＣＬＭ３细胞系中ＧＳＧ２的表达较ｈｕｈ－７细胞系显著??增高〇〇＜０．?０５），详见图３．?２。后续试验将选用Ｈｅ....

图３．?４通过ＰＣＲ测得的ＧＳＧ２的敲减效率，通过Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ测得ＧＳＧ２蛋白的水??平

????为?８９．?２?％?（户＜０．?０１）和?８３．?４?％?（户＜０．?００１）（图?３．?４?Ａ，Ｂ）。Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?分析显示，??与ｓｈＣｔｒ丨组相比，ｓｈＧＳＧ２组中ＧＳＧ２的蛋白水平显著下调（图３．?４?Ｃ，Ｄ）。由此??可见，我们成功建立了?ＧＳＧ２的....

图３．?６克隆形成实验表明ｓｈＧＳＧ２组克隆形成下降??

????图３．?５?ＧＳＧ２敲减对肝癌细胞增殖的影响??ＳＫ－ＨＥＰ－１细胞系的克隆形成试验表明，与ｓｈＣｔｒｌ组相比，ｓｈＧＳＧ２组的克隆??形成明显减少（户＜〇．?００１）。克隆实验结果说明ＧＳＧ２敲减后，肝癌细胞克隆形成??能力受到抑制，详见图３．?６。??１５０１?■ｓｈ....

本文编号：3967632