miR-103a-3p对PANC-1细胞增殖与迁移侵袭能力的影响

发布时间：2017-06-25 12:00

  本文关键词：miR-103a-3p对PANC-1细胞增殖与迁移侵袭能力的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:胰腺癌是具有高侵袭转移生物学特征的消化道肿瘤之一,而胰腺癌的发生、发展及侵袭转移等过程与mi RNA密切相关。本课题组前期通过应用q RT-PCR检测mi R-103a-3p在胰腺癌细胞株中表达明显增高,并通过构建其抑制表达的慢病毒感染PANC-1细胞从而获得稳定转染的细胞株[1]。本研究旨在细胞层面了解mi R-103a-3p对PANC-1胰腺癌细胞增殖与迁移侵袭能力的影响,并为下一步的动物体内实验及靶基因机制及其信号通路的研究提供实验及理论基础。方法:1、选取课题组前期PANC-1细胞株作为研究对象,将课题组前期构建好的抑制mi R-103a-3p表达的慢病毒载体分别取1ul、5ul、10ul、20ul和空病毒载体分别转染PANC-1细胞株。2、利用荧光显微镜观察其转染效率,再通过q RT-PCR检测其表达情况,并筛选出mi R-103a-3p表达量最低的一组慢病毒转染的PANC-1细胞株和空病毒转染的PANC-1细胞株。3、将筛选出来的PANC-1细胞株分为三组:1)抑制mi R-103a-3p表达的慢病毒载体感染的PANC-1组(controlPANC-1);2)空病毒载体感染的PANC-1细胞株(NC-PANC-1);3)胰腺癌细胞组(PANC-1)。4、MTT法检测三组细胞株的增殖能力;5、划痕愈合试验检测三组细胞株的迁移能力;6、Transwell小室实验检测三组细胞株的侵袭能力。结果:1)将mi R-103a-3p-inhibitor慢病毒和空病毒载体转染PANC-1细胞株后观察其转染效率,通过q RT-PCR检测后筛选mi R-103a-3p表达量最低的PANC-1细胞株。2)MTT法检测结果显示:与空白组和NC-PANC-1相比,control-PANC-1组的PANC-1细胞数明显减少(P0.05),并且随着培养时间延长,control-PANC-1组细胞数量增长幅度比PANC-1组和NC-PANC-1组逐渐减弱。3)划痕愈合试验结果显示:下调mi R-103a-3p表达量的control-PANC-1组比NC-PANC-1和空白组的划痕愈合能力明显下降。4)Transwell小室实验结果显示:下调mi R-103a-3p表达量的control-PANC-1组比NC-PANC-1和空白组的侵袭能力明显下降。结论:mi R-103a-3p的高表达能促进PANC-1胰腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力。
【关键词】：mi R-103a-3p PANC-1细胞 增殖 迁移 侵袭
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.9
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 第1章 前言11-15
• 第2章 实验内容15-25
• 第3章 实验结果25-31
• 第4章 讨论31-37
• 第5章 结论37-39
• 参考文献39-43
• 综述43-51
• 参考文献47-51
• 附录51-53
• 致谢53

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本文编号：481966