SDF-1激活PI3K-Akt通路在卵巢癌细胞增殖和侵袭中的作用

发布时间：2017-07-04 21:15

  本文关键词：SDF-1激活PI3K-Akt通路在卵巢癌细胞增殖和侵袭中的作用

  更多相关文章： 卵巢恶性肿瘤 基质细胞衍生因子-1 基质金属蛋白酶-9 细胞增殖 细胞侵袭 PI3K/Akt 信号传导通路

【摘要】：目的通过观察基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor l,SDF-1)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信号传导通路抑制剂LY294002对卵巢癌细胞SKOV3和CAOV3增殖和侵袭能力的影响,探讨SDF-1对上皮性卵巢癌细胞的增殖和侵袭产生影响的分子机制中是否有PI3K/Akt信号传导通路的作用。方法1.将卵巢癌细胞SKOV3和CAOV3分别分为以下4组:(1)空白对照组,(2)实验组1(含100ng/ml SDF-1的培养液),(3)实验组2(含50μmol/L LY294002的培养液),(4)实验组3(预先用含50μmol/L LY294002的培养液作用卵巢癌细胞0.5h后再加入含100ng/ml SDF-1的培养液)。2.将卵巢癌细胞SKOV3和CAOV3分别在不同药物处理条件下培养24h、48h和72h后,应用四甲基偶氨唑蓝比色(MTT)法检测两种卵巢癌细胞在不同药物处理条件下培养不同时间的细胞增殖能力。3.将卵巢癌细胞SKOV3和CAOV3分别在不同药物处理条件下培养48h后运用体外微孔隔离室板(Transwell)法检测两种卵巢癌细胞的侵袭能力。4.运用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测卵巢癌细胞SKOV3和CAOV3分别在不同药物处理条件下培养48h后,Akt的磷酸化程度和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的分泌情况。结果1.不同药物处理条件下卵巢癌细胞SKOV3的MTT结果:不同药物作用24h对卵巢癌细胞SKOV3的增殖作用无明显影响,四组卵巢癌细胞吸光度值之间的差异无统计学意义(P0.05)。不同药物作用48h和72h时,SDF-1组(实验组1)与对照组进行比较,SDF-1可以明显促进卵巢癌细胞SKOV3的增殖(P0.05);50μmol/L的LY294002组(实验组2)以及预先用50μmol/L的LY294002处理卵巢癌细胞SKOV3后再加入100ng/ml的SDF-1组(实验组3)分别与对照组进行比较,卵巢癌细胞SKOV3的增殖能力明显减弱(P0.05);而预先用50μmol/L的LY294002处理卵巢癌细胞SKOV3后再加入100ng/ml的SDF-1组(实验组3)与100ng/ml的SDF-1组(实验组1)进行比较,SDF-1对卵巢癌细胞SKOV3促进增殖的作用明显被抑制(P0.05),同时预先用50μmol/L的LY294002处理卵巢癌细胞SKOV3后再加入100ng/ml的SDF-1组(实验组3)与50μmol/L的LY294002组(实验组2)进行比较,两组卵巢癌细胞吸光度值之间的差异无统计学意义(P0.05)。不同药物处理条件下卵巢癌细胞CAOV3的MTT结果:不同药物分别作用于卵巢癌细胞CAOV3 24h、48h和72h时,100ng/ml的SDF-1组与对照组进行比较,SDF-1可以明显促进卵巢癌细胞CAOV3的增殖(P0.05);50μmol/L的LY294002组以及预先用50μmol/L的LY294002处理卵巢癌细胞CAOV3后再加入100ng/ml的SDF-1组分别与对照组进行比较,卵巢癌细胞CAOV3的增殖能力明显减弱(P0.05);而预先用50μmol/L的LY294002处理卵巢癌细胞CAOV3后再加入100ng/ml的SDF-1组与100ng/ml的SDF-1组进行比较,SDF-1对卵巢癌细胞CAOV3的促进增殖的作用明显被抑制(P0.05),同时预先用50μmol/L的LY294002处理卵巢癌细胞CAOV3后再加入100ng/ml的SDF-1组与50μmol/L的LY294002组进行比较,两组卵巢癌细胞吸光度值之间的差异无统计学意义(P0.05)。2.体外细胞侵袭实验结果:100 ng/ml的SDF-1组与对照组进行比较,SDF-1可以明显促进两种卵巢癌细胞的侵袭(P0.05);50μmol/L的LY294002组以及预先用50μmol/L的LY294002处理两种卵巢癌细胞后再加入100ng/ml的SDF-1组分别与对照组进行比较,两种卵巢癌细胞的侵袭能力明显减弱(P0.05);而预先用50μmol/L的LY294002处理两种卵巢癌细胞后再加入100ng/ml的SDF-1组与100ng/ml的SDF-1组进行比较,SDF-1对两种卵巢癌细胞促进侵袭的作用明显被抑制(P0.05),同时预先用50μmol/L的LY294002处理两种卵巢癌细胞后再加入100ng/ml的SDF-1组与50μmol/L的LY294002组进行比较,两种卵巢癌细胞的侵袭能力无明显差异(P0.05)。3.Western Blot结果:卵巢癌细胞SKOV3和CAOV3在不同药物处理48h后表达Akt、p-Akt和MMP-9蛋白量的变化基本一致,在基础状态下两种卵巢癌细胞内均有一定程度的PI3K/Akt信号传导通路的激活以及MMP-9蛋白的分泌,而且两种卵巢癌细胞在不同药物处理条件下表达Akt蛋白的量均无明显差异(P0.05)。100ng/ml的SDF-1组与对照组进行比较,SDF-1对PI3K/Akt信号传导通路中Akt的活化以及MMP-9蛋白的分泌起到促进作用(P0.05);50μmol/L的LY294002组以及预先用50μmol/L的LY294002处理两种卵巢癌细胞后再加入100ng/ml的SDF-1组分别与对照组进行比较,表达p-Akt和MMP-9蛋白的量均明显减少(P0.05);而预先用50μmol/L的LY294002处理两种卵巢癌细胞后再加入100ng/ml的SDF-1组与100ng/ml的SDF-1组进行比较,SDF-1对Akt活化和MMP-9蛋白分泌的促进作用明显被抑制(P0.05),同时预先用50μmol/L的LY294002处理两种卵巢癌细胞后再加入100ng/ml的SDF-1组与50μmol/L的LY294002组进行比较,Akt的活化程度以及MMP-9蛋白分泌之间的差异均无明显统计学意义(P0.05)。结论1.SDF-1对人卵巢癌细胞系SKOV3和CAOV3的增殖和侵袭起促进作用;2.PI3K/Akt信号传导通路抑制剂LY294002对人卵巢癌细胞系SKOV3和CAOV3的增殖和侵袭起抑制作用;3.阻断PI3K/Akt信号传导通路后,SDF-1对人卵巢癌细胞系SKOV3和CAOV3增殖和侵袭的促进作用被抑制;4.PI3K/Akt信号传导通路参与了刺激人卵巢癌细胞系SKOV3和CAOV3分泌MMP-9蛋白的过程;5.SDF-1促进人卵巢癌细胞系SKOV3和CAOV3增殖和侵袭的作用可能是通过PI3K/Akt信号传导通路刺激MMP-9蛋白表达的作用机制而实现的。
【关键词】：卵巢恶性肿瘤 基质细胞衍生因子-1 基质金属蛋白酶-9 细胞增殖 细胞侵袭 PI3K/Akt 信号传导通路
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.31
【目录】：

• 摘要4-7
• Abstract7-12
• 英文缩略词表12-13
• 引言13-17
• 材料与方法17-30
• 结果30-35
• 讨论35-40
• 结论40-41
• 参考文献41-43
• 综述43-52
• 参考文献49-52
• 个人简历52-53
• 致谢53

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 尹东;张佐;高素;李斌;;趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移中的作用[J];华西口腔医学杂志;2013年01期

2 郎志芳;刘兰涛;王莹;李文媛;吴琦;;肿瘤转移相关蛋白1的表达与人直肠癌组织淋巴管转移及预后关系[J];解剖科学进展;2013年06期

3 杨飞;周意;;喉癌患者血清、唾液及组织VEGF及MMP的变化[J];海南医学院学报;2014年10期

4 吴靖芳;黄静;薛刚;张静;张文静;张小俊;;TFF3和SDF-1在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义[J];天津医药;2013年09期

5 陈琛;李胜泽;;SDF-1/CXCR4生物学轴在宫颈癌中的研究进展[J];中华全科医学;2014年03期

6 杜聃;郑力维;;喉癌患者血清、唾液及组织中VEGF及MMP的表达及其临床意义[J];实用癌症杂志;2014年12期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 郭清;CXCL12-CXCR4生物轴与卵巢上皮性癌腹腔转移关系的研究[D];河北医科大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前8条

1 吉向丽;趋化因子受体CXCR4对卵巢上皮性癌生长及侵袭转移的影响[D];河北医科大学;2009年

2 徐婴花;CXCR4与NF-κB p65在宫颈癌中的表达及临床意义[D];中南大学;2009年

3 常春艳;趋化因子受体CCR5, CCR7和CXCR4在子宫内膜异位症中的表达[D];佳木斯大学;2009年

4 董正华;CXCR4、SDF-1和VEGF在小儿肾母细胞瘤中的表达及意义[D];郑州大学;2009年

5 汤容;siRNA抑制人卵巢癌SW626细胞CXCR4基因的研究[D];重庆医科大学;2010年

6 董国伟;CXCL12/CXCR4生物学轴对舌鳞癌Tca8113细胞生物学行为的研究及AMD3100对其的干预[D];郑州大学;2012年

7 陈琛;SDF-1和CXCR4在宫颈癌组织中的表达及临床意义[D];蚌埠医学院;2014年

8 王会军;通路抑制剂LY294002、PD98059对SDF-1介导的卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响[D];郑州大学;2014年

，

本文编号：519370