小鼠胰腺癌细胞MPC-83中干性细胞群的筛选及其特性的鉴定

发布时间：2017-09-05 19:33

  本文关键词：小鼠胰腺癌细胞MPC-83中干性细胞群的筛选及其特性的鉴定

  更多相关文章： 肿瘤干细胞 胰腺癌 MPC-83细胞 流式细胞分选 生物学特性 耐药性

【摘要】：目的：本实验从小鼠胰腺癌细胞MPC-83中筛选出干性细胞群,对其在侵袭能力、致瘤性等方面的生物学特性进行鉴定,并对胰腺癌干细胞对化疗药的耐受性进行初步研究。为小鼠胰腺癌干细胞群免疫抑制功能的研究提供基础。方法：1.运用流式分选技术从小鼠胰腺癌细胞MPC-83中分选出CD24+CD44+的肿瘤干细胞群。2.运用无血清悬浮培养法,将分选获得的CD24+CD44+的MPC-83干性细胞群进行体外培养。将细胞传代培养,观察细胞成球能力。3.通过划痕实验和Transwell侵袭、迁移实验检测CD24+CD44+的MPC-83干细胞的迁移能力和侵袭能力。4.将细胞接种于昆明小鼠,观察细胞的成瘤能力,比较细胞成瘤率。5.运用流式细胞术检测分选获得的CD24+CD44+的MPC-83干细胞的细胞周期。6.MTT技术检筛选出的CD24+CD44+的MPC-83干细胞和普通MPC-83细胞对抗肿瘤药物吉西他滨作用的敏感性。使用不同浓度的吉西他滨干预CD24+CD44+的MPC-83干细胞和普通肿瘤细胞,分析化疗药物刺激对两种细胞生长的影响。结果：1.利用流式细胞分选技术,可以筛选出CD24+CD44+的MPC-83干性细胞群,这些干细胞约占细胞总数的5%。2.利用流式细胞技术筛选出的CD24+CD44+的MPC-83干性细胞群在无血清培养基中可以存活,形成细胞球。在体外可连续培养,具有自我更新能力。3.CD24+CD44+的MPC-83干性细胞群和普通MPC-83细胞Transwell迁移实验平均穿膜数分别为(145.2±15.4)个细胞vs(112.3±11.5)个细胞,侵袭实验平均穿膜数分别为(62.8±12.7)个细胞vs(48.7±21.5)个细胞。与普通MPC-83细胞相比,CD24+CD44+的MPC-83干性细胞群的侵袭能力和迁移能力更强。4.在体内成瘤能力试验中,CD24+CD44+的MPC-83干性细胞群形成移植瘤所需最少细胞数为1×103个,成瘤能力是普通MPC-83细胞的100倍。5.细胞周期检测的结果显示：在CD24+CD44+的MPC-83干性细胞群中,Go/G1期细胞占细胞总数的(76.8±2.57)%。在普通MPC-83细胞中,G0/G1期细胞占细胞总数的(47.28±1.31)%。两者之间相比,差异显著。6.在耐药性试验中：相同作用时间,相同作用浓度条件下吉西他滨对普通MPC-83细胞的杀伤能力要强于对CD24+CD44+的MPC-83干性细胞群的杀伤能力。CD24+CD44+的MPC-83干性细胞群对于吉西他滨的作用,具有耐受性。结论：通过流式细胞技术成功筛选出小鼠胰腺癌干性细胞群。来源于小鼠MPC-83细胞的CD24+CD44+的细胞具有干细胞的生物学特性,并且对化疗药物耐受,为今后进行胰腺癌个体化治疗和干细胞群免疫抑制功能的研究提供基础。
【关键词】：肿瘤干细胞 胰腺癌 MPC-83细胞 流式细胞分选 生物学特性 耐药性
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.9
【目录】：

• 中英文缩略词5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 引言10-13
• 第一部分：小鼠胰腺癌细胞MPC-83中干性细胞群的分选及成球能力的检测13-25
• 一. 实验材料13-15
• 二. 实验方法15-19
• 三. 实验结果19-22
• 四. 讨论22-25
• 第二部分：CD24~+CD44~+ MPC-83干细胞生物学特性的鉴定及耐药性研究25-45
• 一. 实验材料25-28
• 二. 实验方法28-34
• 三. 实验结果34-42
• 四、讨论42-45
• 总结45-46
• 参考文献46-51
• 综述51-58
• 综述参考文献56-58
• 发表文章情况58-59
• 致谢59

【共引文献】

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