白花丹素体内外抗Lewis肺癌的效果及机制研究

发布时间：2017-09-12 03:26

  本文关键词：白花丹素体内外抗Lewis肺癌的效果及机制研究

  更多相关文章： 白花丹素 Lewis肺癌细胞 凋亡 肺癌移植瘤 VEGF Bcl-2

【摘要】：目的:研究白花丹素(Plumbagin,PL)对Lewis肺癌的抑制作用。方法:1、CCK-8检测白花丹素对Lewis肺癌(Lewis lung carc,LLC)细胞的增殖影响;2、流式细胞仪检测Lewis肺癌细胞的凋亡率;3、qRT-PCR检测Lewis肺癌细胞内VEGF mRNA表达水平;4、Western blot检测Lewis肺癌细胞内Bcl-2和VEGF蛋白的表达水平;5、使用30只C57BL/6近交系小鼠,建立Lewis肺癌小鼠模型;造模后,分为5组,每组6只,分别使用生理盐水、白花丹素(分小、中、大3个剂量组)及环磷酰胺(CTX)作用于动物模型;观察各组肿瘤体积大小,称取瘤重,并计算抑瘤率,应用免疫组化法检测肿瘤组织VEGF表达情况。结果:1、CCK-8结果显示白花丹素对Lewis肺癌细胞有明显的抑制作用,各药物浓度组与对照组比较(P0.05);2、当浓度为2.5μmol/L,5μmol/L和10μmol/L的白花丹素干扰Lewis肺癌细胞24h,细胞的凋亡率为(4.84±0.54)%、(10.37±1.15)%、(20.27±2.51)%,与空白对照组(2.45±1.09)%比较差异有统计学意义(P0.05);3、白花丹素干扰Lewis肺癌细胞后VEGF mRNA水平与对照组比较明显下调(P0.05);4、Western bolt结果显示不同浓度白花丹素(2.5、5、10μmol/L)对Lewis肺癌细胞中Bcl-2和VEGF蛋白表达与对照组相比(P0.05),各药物组间比较(P0.05);5、在瘤株接种的第10、13、16、19天,白花丹素小、中、大剂量组及CTX组的肿瘤体积与对照组比较(P0.05),白花丹素各剂量组之间肿瘤体积比较(P0.05);白花丹素(小、中、大剂量组)及CTX组对荷Lewis肺癌小鼠的肿瘤生长抑制率分别为14.48%、31.47%、48.27%、57.76%,各组之间瘤重的比较(F=33.253,P=0.000),白花丹素各剂量组之间瘤重比较(P0.05);对照组、白花丹素(小、中、大剂量组)及CTX组肿瘤组织中VEGF蛋白表达水平比较采用单因素方差分析(F=153.52,P=0.000),各药物组与对照组比较(P0.05)。结论:⑴体外:白花丹素抑制Lewis肺癌细胞的增殖,下调Bcl-2、VEGF蛋白的表达,并诱导Lewis肺癌细胞凋亡。⑵体内:白花丹素下调Lewis肺癌肿瘤组织内VEGF蛋白表达,并延缓肿瘤的生长,结合体外实验证实白花丹素对Lewis肺癌具有抑制作用。
【关键词】：白花丹素 Lewis肺癌细胞 凋亡 肺癌移植瘤 VEGF Bcl-2
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文缩略词表9-10
• 第1章 前言10-12
• 第2章 实验材料与方法12-21
• 2.1 实验材料12-13
• 2.1.1 动物及细胞株12
• 2.1.2 主要试剂和仪器12
• 2.1.3 实验材料12-13
• 2.1.4 细胞培养相关试剂的配制13
• 2.2 实验方法13-21
• 2.2.1 Lewis肺癌细胞的培养和传代13-14
• 2.2.2 CCK-8 法检测细胞的增殖14
• 2.2.3 AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率14
• 2.2.4 qRT-PCR检测VEGF mRNA的表达14-17
• 2.2.5 Western blot检测Bcl-2、VEGF蛋白表达17-18
• 2.2.6 免疫检测及分析18-19
• 2.2.7 建立荷Lewis肺癌小鼠模型、分组及给药19
• 2.2.8 观察各组荷Lewis肺癌小鼠生长情况19
• 2.2.9 计算肿瘤生长抑制率19
• 2.2.10 采用免疫组化法检测肿瘤组织内VEGF蛋白的表达19-20
• 2.2.11 统计学方法20-21
• 第3章 结果21-28
• 3.1 白花丹素对Lewis肺癌细胞增殖的影响21-22
• 3.2 白花丹素诱导Lewis肺癌细胞凋亡的影响22-23
• 3.3 白花丹素对Lewis肺癌细胞VEGF mRNA表达的影响23-24
• 3.4 白花丹素对Lewis肺癌细胞中Bcl-2、VEGF蛋白表达的影响24-25
• 3.5 白花丹素对荷Lewis肺癌小鼠肿瘤体积的影响25
• 3.6 白花丹素对荷Lewis肺癌小鼠肿瘤质量的影响25-26
• 3.7 白花丹素对荷Lewis肺癌小鼠VEGF表达的影响26-28
• 第4章 讨论28-31
• 第5章 结论31-32
• 第6章 展望32-33
• 致谢33-34
• 参考文献34-36
• 攻读学位期间的研究成果36-37
• 综述 白花丹素抗肿瘤机制研究37-42
• 参考文献41-42

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李仪奎;;白花丹素对细胞生长和有丝分裂的影响[J];国外药学(植物药分册);1981年03期

2 黄慧学;梁秋云;刘华钢;韦燕萍;农达舒;;白花丹素在小鼠体内的药代动力学和组织分布特性[J];广西中医学院学报;2008年01期

3 韦敏;刘丽敏;刘华钢;李丹妮;;白花丹素的体外肾毒性及酸性成纤维细胞生长因子对白花丹素所致肾损伤的保护作用[J];药学服务与研究;2009年04期

4 黄厚泽;谭明雄;李冬青;;白花丹素的提取及其抗氧化活性研究[J];安徽农业科学;2011年13期

5 张峨,粟惜兰,曾琼英,余柏儒,武爱云;白花丹素治疗沙眼及结膜炎448例[J];新医学;1982年07期

6 章一凡;;白花丹素的抗促性腺活性[J];国外药学(植物药分册);1980年02期

7 韦敏;刘华钢;刘丽敏;;白花丹素的体外肝毒性研究[J];时珍国医国药;2010年06期

8 韦敏;刘华钢;刘丽敏;;白花丹素的体外肾毒性研究[J];中成药;2009年11期

9 王希斌;黄慧学;刘华钢;刘丽敏;杨斌;;白花丹素和白花丹素-铜配合物体外抗肿瘤活性研究[J];广西中医药;2008年04期

10 顾运琼;梁伟江;罗旭健;周能;谭明雄;;白花丹素镧(Ⅲ)配合物与牛血清白蛋白相互作用的光谱学研究[J];化学研究;2013年06期

中国博士学位论文全文数据库 前5条

1 潘淑婷;基于SILAC定量蛋白质组学研究白花丹素杀伤舌鳞癌细胞的作用及其分子机制[D];南昌大学;2016年

2 黄慧学;白花丹素脂质体给药系统的研究[D];广西医科大学;2008年

3 何远桥;白花丹素对膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响及其作用机制[D];华中科技大学;2010年

4 谭明雄;中药白花丹活性成分白花丹素金属配合物的合成、抗肿瘤活性及与DNA作用研究[D];中南大学;2008年

5 叶海青;抗结核分枝杆菌先导化合物筛选及白花丹素对H37Rv转录组的影响[D];吉林大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前9条

1 刘方方;白花丹素体内外抗Lewis肺癌的效果及机制研究[D];南昌大学;2016年

2 王巧红;ATM/NF-κB在白花丹素提高舌鳞癌细胞放疗增敏中的作用[D];南昌大学;2016年

3 徐雅玲;白花丹素诱导体外大鼠肝细胞损伤及改构型酸性成纤维细胞生长因子对其保护作用的实验研究[D];广西医科大学;2011年

4 王栋;白花丹素对树突状细胞和实验性自身免疫性脑脊髓炎的调节作用研究[D];天津医科大学;2015年

5 钟全强;白花丹素—单壁碳纳米管复合物的制备及其抗肿瘤研究[D];广西医科大学;2011年

6 张丽;白花丹素对黑素瘤A375细胞体外增殖及凋亡的影响[D];华中科技大学;2010年

7 黎艳聪;白花丹素诱导人非小细胞肺癌细胞的凋亡及通过抑制PI3K/Akt/mTOR旁路自噬细胞死亡[D];南方医科大学;2014年

8 徐璇;白花丹素增强术前诱导化疗PF方案对舌癌细胞的杀伤作用[D];南昌大学;2014年

9 沈想;白花丹素对舌癌细胞Tca-8113放疗增敏的影响[D];南昌大学医学院;2013年

，

本文编号：834816