生物钟基因Per1对人口腔鳞癌细胞生物学行为的影响和调控机制

发布时间：2017-09-17 01:18

  本文关键词：生物钟基因Per1对人口腔鳞癌细胞生物学行为的影响和调控机制

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【摘要】：目的研究生物钟基因Per1对人口腔鳞癌SCC15细胞生长、增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及调控机制。方法应用RNA干扰技术构建3组靶向Per1基因的短发夹RNA慢病毒质粒,感染人口腔鳞癌SCC15细胞;经测序、实时荧光PCR及Western blot鉴定并筛选沉默效果最佳组为实验组,对照组为不含Per1片段的scramble质粒病毒,空白组为未做任何处理的SCC15细胞。利用CCK-8试剂盒和克隆形成实验检测癌细胞SCC15体外的生长能力,流式细胞仪检测SCC15细胞的增殖和凋亡水平变化,Transwell细胞小室检测SCC15细胞的迁移和侵袭能力,裸鼠体内成瘤实验检测SCC15细胞体内成瘤能力改变。实时荧光定量PCR检测Ki-67、MDM2、c-Myc、P53、Bax、Bcl-2、MMP2、MMP9、TIMP-2和VEGF mRNA的表达。结果成功的构建了3组靶向Per1基因的Per1-shRNA慢病毒质粒,其中Per1-shRNA-I组沉默效果最佳,可作为实验组。沉默Per1基因后促进了SCC15癌细胞的生长和增殖能力,抑制了细胞凋亡水平,增强了SCC15细胞的迁移和侵袭能力,同时,促进了裸鼠体内SCC15细胞的成瘤能力(P均0.05)。Per1基因沉默后显著提高了Ki-67、MDM2、Bcl-2、MMP2和MMP9 mRNA的表达(P均0.05),降低了c-Myc、p53、Bax和TIMP-2 mRNA的表达(P均0.05),而VEGF mRNA的表达无显著改变(P0.05)。结论生物钟基因Perl能调控下游重要的肿瘤相关基因,如Ki-67、MDM2、c-Myc、p53、Bax、Bcl-2、MMP2、MMP9和TIMP-2,其表达变化影响癌细胞的生长、增殖、凋亡、迁移和侵袭,对Per1基因的深入研究可以进一步明确癌症的发生和发展机制,提供癌症的治疗的新方法。
【关键词】：生物钟基因 Per1 口腔 癌 鳞状细胞
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.8
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照4-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-12
• 第一部分 Per1-shRNA慢病毒质粒的构建和鉴定12-22
• 1 材料和方法12-18
• 2 结果18-21
• 3 讨论21-22
• 第二部分 沉默Per1基因对人口腔鳞癌细胞生物学行为的影响及其机制22-34
• 1 材料和方法22-26
• 2 结果26-31
• 3 讨论31-34
• 参考文献34-39
• 全文总结39-40
• 文献综述40-51
• 参考文献45-51
• 致谢51-52
• 攻读硕士学位期间发表的文章52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：866428