SERPINA3高表达对MGC803细胞增殖的影响

发布时间：2017-09-20 12:05

  本文关键词：SERPINA3高表达对MGC803细胞增殖的影响

  更多相关文章： 胃癌 MGC803细胞 周期与凋亡 细胞增殖

【摘要】：胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。虽然我国胃癌的诊断和治疗水平已明显提高,但是患者的5年生存率仍然非常低,不足15%。胃癌的发生是一个多因素参与、多基因相互作用和多阶段演进的复杂病理学过程。我们课题组前期采用激光捕获显微切割与定量蛋白质组学技术,从正常胃粘膜、非典型增生、胃低分化腺癌及淋巴结转移癌组织中鉴定了243个胃粘膜上皮细胞癌变过程中各阶段的差异表达蛋白质,其中SERPINA3蛋白质在胃粘膜癌变过程中表达进行性下调。为了探讨SERPINA3高表达对MGC803细胞增殖的影响,我们采用基因重组技术,建立了SERPINA3稳定高表达的胃癌MGC803细胞系(MGC803/pcDNA3.1-SERPINA3);通过绘制细胞生长曲线、平皿克隆形成实验、软琼脂集落形成实验、流式细胞术,观察SERPINA3高表达对MGC803细胞增殖、周期与凋亡的影响。结果显示:1、MGC803/pcDNA3.1-SERPINA3细胞较对照细胞MGC803/pcDNA3.1的生长速度减慢、平皿克隆数和软琼脂集落数均减少。2、MGC803/pcDNA3.1-SERPINA3细胞较对照细胞MGC803/pcDNA3.1的凋亡率增加、细胞增殖指数降低。结果表明:SERPINA3通过降低MGC803细胞的增殖指数,诱导细胞的凋亡,而发挥其抑制细胞增殖的作用。
【关键词】：胃癌 MGC803细胞 周期与凋亡 细胞增殖
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-9
• 主要缩略语英文索引9-10
• 第1章 前言10-12
• 技术路线12-14
• 第2章 材料和方法14-20
• 2.1 材料14-15
• 2.1.1 细胞系14
• 2.1.2 菌株和质粒载体14
• 2.1.3 主要试剂14
• 2.1.4 引物14-15
• 2.1.5 主要实验仪器15
• 2.2 方法15-20
• 2.2.1 质粒的转化和纯化15
• 2.2.2 RT-PCR15-16
• 2.2.3 pCDNA3.1- SERPINA3真核表达载体的构建16
• 2.2.4 细胞培养16-17
• 2.2.5 基因转染17
• 2.2.6 转染阳性克隆细胞的鉴定17
• 2.2.7 MTT比色法绘制细胞生长曲线17-18
• 2.2.8 流式细胞仪（FCM）检测细胞周期和凋亡18
• 2.2.9 平板克隆形成实验18-19
• 2.2.10 软琼脂集落形成实验19
• 2.2.11 结果统计学分析19-20
• 第3章 实验结果20-32
• 3.1 pcDNA3.1- SERPINA3质粒的重组与鉴定20-22
• 3.2 建立SERPINA3稳定高表达的MGC803细胞系22-24
• 3.3 MTT法检测SERPINA3高表达对MGC803细胞生长的影响1524-25
• 3.4 平皿克隆形成实验检测SERPINA3高表达对MGC803细胞停泊依赖性生长的影响25-26
• 3.5 软琼脂集落形成实验检测SERPINA3高表达对MGC803细胞非停泊依赖性生长的影响26-28
• 3.6 流式细胞术检测SERPINA3高表达对MGC803细胞周期分布的影响28-29
• 3.7 流式细胞术检测SERPINA3高表达对MGC803细胞凋亡的影响29-32
• 第4章 讨论32-36
• 第5章 结论36-38
• 参考文献38-42
• 文献综述 启动子报道基因分析的原理与应用42-52
• 参考文献48-52
• 作者攻读学位期间的科研成果52-54
• 致谢54-55
• 基金55

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2 成海燕;彭应梅;于建春;韩景献;;脑细胞增殖研究进展[J];现代生物医学进展;2008年02期

3 ;对人类生老病死奥秘的最新阐释——细胞增殖、分化与凋亡[J];山东中医学院学报;1993年04期

4 刘勇,路名芝;细胞增殖调控与肿瘤发生[J];九江医学;1997年04期

5 刘勇;肿瘤细胞增殖调控的研究进展[J];实用癌症杂志;1997年02期

6 周剑涛,徐久元;P21 CIP1/WAF1/SDI1与细胞增殖调控[J];九江医学;1999年04期

7 郑瑞玉,陈泽红;胰母细胞增殖症手术治疗护理要点[J];护士进修杂志;2001年03期

8 Kase S.;SaitoW.;YokoiM. ;王文军;;人类特发性视网膜前膜细胞增殖及谷氨酰胺合成酶的表达[J];世界核心医学期刊文摘.眼科学分册;2006年04期

9 陈洁;李瑞明;方娟;卢志勇;阮绪芝;;siRNA-FAM92A1-289对HeLa细胞增殖的影响[J];湖北医药学院学报;2011年02期

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1 王潇;高瑞兰;钱煦岱;林筱洁;陈小红;尹利明;;大黄素对K562细胞增殖和凋亡的影响[A];全国中西医结合血液学学术会议论文汇编[C];2010年

2 王潇;钱煦岱;陈晓红;林筱洁;尹利明;高瑞兰;;大黄素对K562细胞增殖和凋亡的影响[A];2009年浙江省中医药学会血液病学术年会、浙江省中西医结合学会血液病学术年会暨国家级中西医结合血液病新进展继续教育学习班论文汇编[C];2009年

3 邓锦波;牛艳丽;范文娟;刘彬;;死亡受体5与神经细胞增殖[A];Proceedings of the 8th Biennial Conference of the Chinese Society for Neuroscience[C];2009年

4 邓锦波;牛艳丽;范文娟;刘彬;;死亡受体5与神经细胞增殖[A];河南省细胞生物学学会第二届会员代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2009年

5 郑志宏;胡建达;陈英玉;郑静;林敏辉;;大黄素对K562细胞增殖、凋亡的影响[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

6 杨林;陶天遵;吴莹;李晓蕊;刘枫晨;刘伟;张淑云;闻颖;陶树清;吴丽萍;;地塞米松对成人骨细胞增殖和分化影响的实验研究(摘要)[A];第五次全国创伤康复暨第七次全国运动疗法学术会议论文汇编[C];2004年

7 李墨;韩艳玲;刘俊;吴非;韩昱晨;;RACK1直接与MCM7结合,促进细胞增殖、运动[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年

8 徐枫;赵玫;杜菲;林梁;周启兵;余权;黄常志;;Hsp 70与T细胞增殖的相关研究[A];第七届全国肿瘤生物治疗学术会议论文集[C];2001年

9 陈勇;吕合作;胡建国;李柏青;;可刺激人γδT细胞增殖的结核杆菌多肽抗原的生物学特性分析[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年

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1 四川省广元市元坝中学 叶静;《细胞增殖》第1课时[N];学知报;2011年

2 ;自身细胞可制再生血管[N];中国环境报;2000年

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1 李因涛;促微管聚合蛋白TPPP3在肥胖及肺癌中的功能及调控研究[D];复旦大学;2014年

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