γ-氨基丁酸在胆管癌细胞中的作用机制及相关效应基因的探讨

发布时间：2017-09-25 02:36

  本文关键词：γ-氨基丁酸在胆管癌细胞中的作用机制及相关效应基因的探讨

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【摘要】：目的探讨胆管癌组织细胞中γ-氨基丁酸发挥抑制肿瘤生长作用的相关效应基因。方法1、收集43例胆管癌患者的癌组织标本,并同期行胆管修复的12例胆道损伤患者的正常胆管组织标本作为对照。应用免疫组织化学染色检测胆管癌及正常胆管组织中STAT3、磷酸化STAT3(p-stat3)、抗凋亡蛋白(Survivin)及环氧化物酶2(COX-2)蛋白的表达。2、培养QBC939胆管癌细胞株,分为实验对照组、GABA治疗组、GABA+phaclofen(B受体拮抗剂)控制组、AG490(JAK/STAT3信号通路受体拮抗剂)控制组。采用MTT法检查细胞增殖活性,流式细胞术检测凋亡情况,并用免疫组织化学法、免疫蛋白印记法、RT-PCR检测p-stat3、Survivin及COX-2蛋白的表达。3、将QBC939细胞接种至裸鼠体内培养移植瘤模型,分为GABA治疗组及空白对照组,对移植瘤进行免疫组化及WB法检测各蛋白表达。结果1、在人胆管癌组织标本中STAT3、p-STAT3、survivin及cox-2蛋白阳性表达率分别为69.8%(30/43)、65.1%(28/43)、72.1%(31/43)、79.1%(34/43);在正常胆管组织中的阳性表达率分别为41.7%(5/12)、8.3%(1/12)、16.7%(2/12)、41.7%(5/12)。p-STAT3、Survivin及COX-2蛋白在胆管癌组织中的阳性表达率显著高于正常胆管组织,差异具有统计学意义(X2=12.136,9.811,4.679,P0.05)2、GABA控制组及AG490控制组培养细胞株较对照组,肿瘤细胞增殖活性下降,凋亡率增加,应用phaclofen组肿瘤细胞增殖活性及凋亡率与对照组差异无统计学意义(p0.05)。WB、RT-PCR及免疫组化检测可见GABA及AG490控制组p-STAT3、Survivin及COX-2蛋白表达量较对照组明显下降,对比差异有统计学意义(p0.05)。3、与空白组相比,治疗组中免疫组化及WB检测移植瘤中各蛋白表达也明显下降,且差异有统计学意义(p0.05)。结论介导JAK/STAT3信号通路,下调Survivin及COX-2表达可能是GABA抑制胆管癌细胞株QBCQ939生长的作用机制之一。
【关键词】：胆管肿瘤 信号通路 免疫组织化学 免疫蛋白印迹法 γ-氨基丁酸
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.8
【目录】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-17
• 材料与方法17-24
• 结果24-33
• 讨论33-37
• 结论37-38
• 参考文献38-43
• 附录43-45
• 致谢45-46
• 综述46-54
• 参考文献51-54

【参考文献】

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1 欧阳波;黄强;王志华;;COX-2在胆管癌中的表达及其与血管生成的关系[J];肝胆外科杂志;2006年06期

2 张斌;钟德s，

本文编号：914893