癌基因c-jun在三氧化二砷抑制腺样囊性癌细胞中的表达及意义
本文关键词:癌基因c-jun在三氧化二砷抑制腺样囊性癌细胞中的表达及意义
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【摘要】:目的本实验旨在研究c-jun在三氧化二砷(arsenic trioxide As2O3)促进腺样囊性癌细胞ACC-2凋亡及抑制癌细胞增殖中的表达及意义,进而为腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)治疗的可行途径提供线索。方法(1)将经过不同浓度As2O3培养的ACC-2细胞作为实验组,不含As2O3培养液的ACC-2细胞作为对照组,倒置显微镜观察两组细胞的形态变化;(2)用RT-PCR法检测两组ACC-2细胞c-jun基因在m RNA水平上的表达变化情况;(3)免疫组化法观察药物作用前后Jun蛋白表达量的变化。采用SPSS 19.0统计软件包处理、分析数据,检验水准为a=0.05。结果(1)显微镜下:实验组ACC-2细胞生长缓慢,细胞贴壁能力下降,变圆变小,随着培养时间延长及As2O3浓度增加,细胞逐渐出现脱落、坏死。(2)RT-PCR:c-jun m RNA在对照组ACC-2细胞的表达量最高,而随着As2O3作用浓度的增加和作用时间的延长,其表达量明显下降,在6μmol/L作用48h时表达量最低,差异具有统计学意义(P=0.001);(3)免疫组化检测:Jun蛋白表达于细胞核,胞浆不着色,胞核呈棕黄色或褐色,Jun蛋白在对照组ACC-2细胞中呈高表达,As2O3作用于ACC-2细胞后,其表达量降低,差异具有统计学意义(P=0.008)。结论1、As2O3可抑制体外培养的ACC-2细胞生长并诱导细胞凋亡;2、ACC-2细胞中存在c-jun m RNA和蛋白的表达,As2O3能够改变ACC-2细胞中c-jun m RNA和蛋白的表达水平,其作用具有时间剂量性;3、c-jun基因在As2O3抑制ACC-2细胞生长并诱导其凋亡中起重要作用,为As2O3应用于腺样囊性癌的临床治疗提供了一定的理论依据。
【关键词】:腺样囊性癌 三氧化二砷 c-jun 免疫组化 RT-PCR
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R730.26
【目录】:
- 摘要2-3
- Abstract3-5
- 引言5-7
- 第一章 材料和方法7-14
- 1.1 实验材料7-9
- 1.1.1 细胞来源7
- 1.1.2 主要耗材7
- 1.1.3 实验设备7-8
- 1.1.4 主要试剂8
- 1.1.5 引物设计8-9
- 1.2 实验方法9-10
- 1.2.1 ACC-2 细胞培养9
- 1.2.2 常用液体的配置9-10
- 1.3 实验步骤10-12
- 1.3.1 免疫组织化学SP法染色步骤10-11
- 1.3.2 RT-PCR11-12
- 1.4 统计方法12-14
- 第二章 实验结果14-17
- 2.1 ACC-2 细胞的形态学变化14
- 2.2 免疫细胞化学实验结果14-15
- 2.3 RT-PCR实验结果15-17
- 第三章 讨论17-19
- 第四章 结论19-20
- 参考文献20-24
- 综述24-33
- 参考文献30-33
- 攻读学位期间的研究成果33-34
- 致谢34-35
【共引文献】
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本文编号:923698
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