TM4SF1在人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231中的表达及其对细胞增殖和迁移能力的影响

发布时间：2017-09-27 16:44

  本文关键词：TM4SF1在人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231中的表达及其对细胞增殖和迁移能力的影响

  更多相关文章： TM4SF1 乳腺癌 转染 细胞增殖 迁移

【摘要】：背景乳腺癌是全世界女性最常见的恶性肿瘤,大约占患癌女性的18%。最新统计数据指出,全世界约有120万女性被确诊为乳腺癌。与发达国家相比,我国属于乳腺癌的低发区,但近年来的发病率增长趋势明显,目前约有47万乳腺癌患者。由于早期诊断和治疗方式的改善,越来越多的妇女得以存活,每年死于乳腺癌的绝对人数在逐年下降,其5年生存率约为50%-60%。然而,国内外相关研究报道,侵袭和转移仍然是临床工作中乳腺癌治疗的主要挑战,并是导致治疗失败和患者死亡的主要原因,且现阶段,乳腺癌的转移机制还不完全清楚,加之现有分子靶向药物使用的局限性和耐药的出现,因此,急切需要我们深入探索乳腺癌的转移机制和发现新的靶基因用于乳腺癌的治疗。TM4SF1(Transmembrane-4-L-six-family-member-1)是四次跨膜蛋白L6超家族成员之一,其在肺癌,胰腺癌,前列腺癌,结直肠癌等多种恶性肿瘤组织中呈现异常高表达,而在正常组织及正常血管内皮细胞呈相对低表达,该基因与肿瘤细胞的增殖,粘附,迁移,侵袭和肿瘤血管生成等密切相关。近年来,TM4SF1作为多种恶性肿瘤治疗的新靶点被广泛研究。目的1.对比研究TM4SF1在人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231中的表达情况,初步探讨该基因与细胞恶性程度的相关性;2.采用si RNA靶向抑制TM4SF1基因后,分析两种细胞的增殖、迁移能力的变化。方法采用Real-time PCR(Q-PCR)检测人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231中TM4SF1 m RNA相对表达情况,并以人正常乳腺细胞系MCF-10A中TM4SF1m RNA的表达作为参照;应用TM4SF1-si RNA瞬时转染MCF-7、MDA-MB-231两种细胞株,采用Western blot方法分析转染效果和TM4SF1蛋白表达情况;CCK-8法和划痕实验分别检测沉默TM4SF1前后2种细胞株增殖能力和迁移能力的变化。结果1.瞬时转染的效率:特异性转染TM4SF1-si RNA后,沉默组TM4SF1m RNA相对表达量较si NC组和空白对照组明显下降,表明该基因成功被抑制(P0.01)。2.三种细胞株TM4SF1 m RNA的相对表达量:正常乳腺癌细胞株MCF-10A TM4SF1 m RNA相对表达量为(0.016±0.004),乳腺癌细胞MCF-7 TM4SF1 m RNA相对表达量为(1.159±0.218),MDA-MB-231 TM4SF1 m RNA相对表达量为(1.396±0.199),MCF-7和MDA-MB-231的TM4SF1 m RNA相对表达量均高于MCF-10A的表达量(F=150.447,P0.01);高度恶性的三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231 TM4SF1m RNA相对表达量高于低度恶性的雌激素受体阳性细胞株MCF-7的表达量(P0.05)。3.Western blot结果:沉默组TM4SF1蛋白条带明显暗于阴性对照组和空白对照组,表明两种乳腺癌细胞株已成功被转染。4.CCK-8结果:MCF-7细胞沉默TM4SF1基因0h后,si NC组和si TM4SF1组的增殖力分别为:(0.113±0.015)、(0.112±0.010);24h后,上述实验组的增殖力分别为:(1.074±0.081)、(1.028±0.042);48h后,上述实验组的增殖力分别为:(1.114±0.061)、(1.021±0.055);72h后,上述实验组的增殖力分别为:(1.070±0.101)、(0.909±0.075)。MDA-MB-231细胞沉默TM4SF1基因0h后,si NC组和si TM4SF1组的增殖力分别为:(0.110±0.010)、(0.112±0.009);24h后,上述实验组的增殖力分别为:(1.296±0.072)、(1.199±0.055);48h后,上述实验组的增殖力分别为:(1.335±0.054)、(1.247±0.071);72h后,上述实验组的增殖力分别为:(1.261±0.047)、(1.123±0.097)。以上各段时间的si NC组和si TM4SF1组采用两独立样本的t检验,结果均无统计学差异(P0.05)。5.划痕实验结果:沉默TM4SF1基因24h后,MCF-7 si NC组迁移率为(42.359±3.639)%,si TM4SF1组为(23.412±6.397)%,两两比较结果:t=4.459,P=0.011;MDA-MB-231 si NC组迁移率为(51.799±5.429)%,Si TM4SF1组为(30.549±5.978)%,两两比较结果:t=4.558,P=0.010。结论1.TM4SF1在乳腺癌细胞中较正常乳腺细胞呈现相对高表达;2.TM4SF1基因增强乳腺癌细胞的迁移能力,而与细胞的增殖能力相关性无统计学意义;3.TM4SF1可能与细胞的恶性程度正相关。
【关键词】：TM4SF1 乳腺癌 转染 细胞增殖 迁移
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 摘要4-7
• Abstract7-12
• 英文缩略词索引12-14
• 前言14-18
• 材料与方法18-27
• 结果27-32
• 讨论32-34
• 结论34-35
• 参考文献35-37
• 综述 乳腺癌分子靶向治疗最新进展37-54
• 参考文献50-54
• 个人简历及在研究生期间发表的学术论文54-55
• 致谢55

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 黄啸原;用“印度阅兵”形容乳腺癌合适吗?[J];诊断病理学杂志;2001年02期

2 张嘉庆,王殊,乔新民;乳腺癌的现状和远景[J];中华外科杂志;2002年03期

3 张维彬,汪波,石灵春;中医药在现代乳腺癌治疗中的运用[J];中国中西医结合急救杂志;2002年01期

4 薛志勇;食物与乳腺癌[J];山东食品科技;2002年04期

5 王旬果,王建军,郑国华;乳腺癌相关标志物的研究进展[J];山东医药;2002年33期

6 陆尚闻;;男人也患乳腺癌[J];环境;2003年12期

7 ;新技术清晰拍摄早期乳腺癌细胞[J];上海生物医学工程;2005年04期

8 田富国;郭向阳;张华一;;乳腺癌诊治研究新进展[J];肿瘤研究与临床;2005年S1期

9 马涛,谷俊朝;血管内皮生长因子与乳腺癌的临床研究进展[J];国外医学(外科学分册);2005年01期

10 郭庆良,谷俊朝;乳腺癌和瘦素相关性研究进展[J];国外医学.外科学分册;2005年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 于永利;;抗乳腺癌免疫治疗融合蛋白[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年

2 郭红飞;;中医治疗乳腺癌的策略[A];江西省中医、中西医结合肿瘤学术交流会论文集[C];2012年

3 庞朋沙;伍会健;;乳腺癌治疗靶标的研究进展[A];北方遗传资源的保护与利用研讨会论文汇编[C];2010年

4 陆劲松;邵志敏;吴炅;韩企夏;沈镇宙;;新型维甲酸抑制乳腺癌细胞的生长及诱导凋亡的机制研究[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年

5 刘爱国;胡冰;;乳腺癌临床治疗进展[A];安徽省抗癌协会第四次代表大会暨乳腺癌、肺癌专业委员会成立会议、安徽省肿瘤防治进展学术研讨会论文汇编[C];2001年

6 张嘉庆;王殊;乔新民;;乳腺癌的现状和远景[A];第一届全国中西医结合乳腺疾病学术会议论文汇编[C];2002年

7 刘清俊;;乳腺癌综合治疗的新进展[A];山西省抗癌协会第六届肿瘤学术交流会论文汇编[C];2003年

8 邵志敏;;21世纪乳腺癌治疗的展望[A];第三届中国肿瘤学术大会教育论文集[C];2004年

9 陈松旺;张明;;乳腺癌治疗的回顾与展望[A];西部地区肿瘤学学术会议论文汇编[C];2004年

10 白霞;傅建新;丁凯阳;王兆钺;阮长耿;;组织因子途径抑制物-2在乳腺癌细胞中的表达研究[A];第10届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2005年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 ;血检有望揭示乳腺癌治疗效果[N];医药经济报;2004年

2 记者 郑晓春;乳腺癌细胞扩散基因被找到[N];科技日报;2007年

3 中国军事医学科学院肿瘤中心主任 宋三泰;乳腺癌有了新疗法[N];中国妇女报;2002年

4 王艳红;抑制ＤＮＡ修补可消灭乳腺癌细胞[N];医药经济报;2005年

5 詹建;乳腺癌饮食 两个时期不一样[N];中国中医药报;2006年

6 辛君;乳腺癌扩散基因“浮出水面”[N];大众卫生报;2009年

7 记者 毛黎;美发现有效抑制乳腺癌细胞生长的分子[N];科技日报;2010年

8 记者 吴春燕　通讯员 王丽霞;乳腺癌治疗将有新途径[N];光明日报;2011年

9 王乐　沈基飞;我科学家发现导致乳腺癌耐药的新标志物[N];科技日报;2011年

10 刘霞;一种天然分子能阻止乳腺癌恶化[N];科技日报;2011年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 柴红燕;疾病状态下CYP4Z1和4A的生物学行为及其药物干预研究[D];武汉大学;2012年

2 李凯;ID(inhibitor of DNA binding)家族蛋白调控乳腺细胞的分化并影响乳腺癌的预后[D];复旦大学;2014年

3 江一舟;乳腺癌新辅助化疗前后基因变异检测及其功能论证[D];复旦大学;2014年

4 马邵;酪氨酸去磷酸化增强表皮生长因子受体在乳腺癌治疗中靶向性的研究[D];山东大学;2015年

5 姚若斯;精氨酸甲基转移酶PRMT7诱导乳腺癌细胞发生表皮—间质转换及转移的作用机制研究[D];东北师范大学;2015年

6 侯培锋;α-酮戊二酸二甲酯(DM-2KG)上调缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)诱发高致瘤性干细胞样乳腺癌细胞机制研究[D];福建医科大学;2014年

7 李丽丽;分泌蛋白SHON调控乳腺癌细胞EMT的分子机制研究[D];东北师范大学;2015年

8 陈丽艳;PI3K抑制剂联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂对乳腺癌协同杀伤作用的分子机制研究[D];延边大学;2015年

9 朴俊杰;乳腺癌差异基因筛选及PAIP1对其生物学行为的影响[D];延边大学;2015年

10 汪[?如;染色体6q25.1区域基因多态性与乳腺癌遗传易感性的关联研究[D];南方医科大学;2015年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 杜文英;乳腺癌分子亚型的临床与病理特点[D];郑州大学;2011年

2 单系金;Mfn2磷酸化修饰对其调控乳腺癌细胞增殖功能的重要性的研究[D];河北联合大学;2014年

3 徐晶;缺氧对乳腺癌细胞miR-210表达及侵袭能力的影响[D];河北联合大学;2014年

4 李丽;Mfn2对乳腺癌细胞MCF-7侵袭迁移能力的影响及机制探究[D];河北联合大学;2014年

5 杨洋;醌氧化还原酶及其抑制剂在乳腺癌增殖与迁移中的作用研究[D];延边大学;2015年

6 张秀娟;免疫组化与荧光原位杂交检测乳腺癌Her-2表达的对比研究及17号染色多体对检测结果的影响[D];泰山医学院;2014年

7 韩晶;纳米脂质体多西他赛抑制乳腺癌细胞增殖降低骨髓毒性的机制[D];安徽大学;2015年

8 钟显峰;乳腺癌的分子亚型与淋巴结转移的关系研究[D];泰山医学院;2014年

9 张硕稳;MTDH、IκB、NF-κB P65在乳腺癌组织中的表达及意义[D];河北医科大学;2015年

10 谢少利;RNAi阻低UBE3A后对乳腺癌细胞MDA-MB-231生物学行为的影响及其机制研究[D];川北医学院;2015年

，

本文编号：930793