常压直接质谱分析技术快速诊断肺癌的分子基础研究
本文关键词:常压直接质谱分析技术快速诊断肺癌的分子基础研究
【摘要】:目的:常压直接质谱分析(ambient mass spectrometry,AMS)是近年来迅速发展的基于样品中分子组成或含量的不同而实现样品检测的一种快速分析测试方法,较之以前的方法只需要对临床样品进行简单的处理或者不对样品进行任何处理就可以检测。尖端电喷雾离子源(Tip-spray ionization,TSI)是AMS的一种离子源,本研究采用TSI-MS分析肺癌组织及肺癌旁组织,探索潜在的肺癌分子标志物,从而达到对肺癌早期的快速诊断。方法:对留取的肺组织不进行任何的预处理,采用自制的甲醇萃取辅助的尖端放电喷雾离子源对20例肺癌患者的肺癌组织、癌旁组织和9例肺部良性疾病组织进行质谱检测,选取甲醇为萃取剂,调节流速为4ul/min,设置在正离子模式下,设定一级质谱、多级质谱的扫描范围为均为m/z 50-1000,离子传输管温度150℃,喷雾电压3.5 KV,透镜电压65.0 V,选定离子的隔离宽度为1.6 Da,碰撞能量为13%。用主成分分析(principal component analysis,PCA)方法对肺癌组织与癌旁组织和肺部良性疾病组织的质谱指纹谱图进行快速分类和鉴别;对11例肺癌患者的肺癌和癌旁组织的差异性m/z 756.7、782.7、808.7、832.7及标准品[DPPC+Na+]、[POPC+Na+]、[DOPC+Na+]、[SAPC+Na+]进行多级质谱检测。结果:通过TSI-MS检测及运用PCA可以有效的区分肺癌组织和癌旁组织及肺癌组织和肺部良性疾病组织,癌旁组织和肺部良性疾病组织不能区分;肺癌组织和癌旁组织的差异性物质为m/z 756.7、782.7、808.7、832.7;m/z 756.7、782.7、808.7、832.7的多级谱图均与标准品[DPPC+Na+]、[POPC+Na+]、[DOPC+Na+]、[SAPC+Na+]的多级谱图相符,即肺癌的差异性物质为二棕榈酰基卵磷脂DPPC、1-棕榈酰基-2-油酰基卵磷脂POPC、二油酰磷脂酰胆碱DOPC、花生四烯酰-硬脂酰磷脂酰胆碱SAPC。结论:AMS耦合PCA能够有效地将肺癌组织与肺癌旁组织及肺部良性疾病组织的质谱指纹信息区分,从而快速鉴别出肺癌组织,TSI-MS利用多级质谱分析可以很好的对肺癌和癌旁组织的差异性磷脂进行定性,DPPC、POPC、DOPC、SAPC可能成为潜在的肺癌分子标志物,为开发新的肺癌诊断方法提供新的思路以及为研究肺癌的发生机制提供新的思路。
【关键词】:肺癌 多级质谱分析 常压直接质谱
【学位授予单位】:南昌大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R734.2
【目录】:
- 摘要3-5
- ABSTRACT5-9
- 中英文对照表9-10
- 第1章 前言10-12
- 第2章 材料和方法12-18
- 2.1 实验材料12-14
- 2.1.1 样品及收集方法12-13
- 2.1.2 实验设备、试剂及材料13-14
- 2.2 实验方法14-16
- 2.2.1 样品准备14
- 2.2.2 样品准备14-15
- 2.2.3 TSI—MS离子源的参数设置15
- 2.2.4 实验步骤15-16
- 2.3 数据分析16-18
- 第3章 结果18-23
- 3.1 指纹谱图及PCA分析18-20
- 3.2 差异性物质的鉴定20-23
- 第4章 讨论23-32
- 4.1 常压直接质谱分析技术(AMS)的主要组成23-24
- 4.2 尖端电喷雾电离质谱技术(TSI-MS)联合PCA对肺癌的快速鉴别24-25
- 4.3 多级质谱(MS~n)分析25-27
- 4.3.1 多级质谱分析在m/z 756.7、782.7、808.7、832.7 的应用25-27
- 4.3.2 [DPPC+Na+]、[POPC+Na+]、[DOPC+Na+]、[SAPC+Na+]的多级质谱分析27
- 4.4 代谢组学与疾病的关系27-32
- 4.4.1 DPPC与肺癌的关系28-29
- 4.4.2 POPC、DOPC、SAPC与肺癌的关系29-32
- 第5章 结论32-33
- 致谢33-34
- 参考文献34-37
- 攻读硕士学位期间的研究成果37-38
- 综述38-42
- 参考文献41-42
【参考文献】
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,本文编号:963092
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