硫利达嗪对类肝癌干细胞的杀伤作用研究

发布时间：2017-10-03 22:10

  本文关键词：硫利达嗪对类肝癌干细胞的杀伤作用研究

  更多相关文章： THO 肝癌干细胞 磷酸化STAT3 caspase 凋亡

【摘要】：硫利达嗪（Thioridazine，THO）在临床上通常被用于治疗精神类疾病；近年来，，研究发现THO对肿瘤细胞具有杀伤效果，但其对肝癌干细胞的杀伤作用还未曾有报道。肿瘤干细胞在肿瘤的转移，复发及耐药性方面起着十分重要的作用。本文利用体外悬浮培养富集类肿瘤干细胞并检测药物THO对其杀伤效果来评价THO对肿瘤生长的体外抑制效应及基础机制研究。 通过检测体外悬浮培养类肝癌干细胞在肿瘤干细胞相关因子表达、耐药性及细胞周期等方面因素，显示在一定程度上其具备肿瘤干细胞样特征，磷酸化STAT3，NANOG和XIAP表达显著上调，而Albumin表达下调；进一步运用MTT、Western blotting和细胞流式等实验验证了THO对类肝癌干细胞具有较强的杀伤效果并能诱导caspase依赖的细胞凋亡，而对分化的肝癌细胞影响较弱；此外，THO和化疗药物盐酸阿霉素(DOX)的联合使用显著增强了其对肝癌干细胞和分化的肝癌细胞的杀伤作用。 本课题实验结果首次显示THO对体外悬浮培养的类肝癌干细胞具有较强的杀伤能力，可能为今后肝癌的临床治疗带来新的希望。
【关键词】：THO 肝癌干细胞 磷酸化STAT3 caspase 凋亡
【学位授予单位】：浙江理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-6
• 缩略词表6-7
• 目录7-9
• 第一部分 硫利达嗪对类肝癌干细胞的杀伤作用研究9-23
• 1 引言9-10
• 2 材料与方法10-13
• 2.1 材料10
• 2.2 方法10-13
• 2.2.1 肝癌干细胞的悬浮培养10-11
• 2.2.2 MTT 检测药物对肝癌细胞的杀伤作用11
• 2.2.3 流式检测细胞周期11
• 2.2.4 克隆形成实验11
• 2.2.5 结晶紫染色观察细胞活性11-12
• 2.2.6 Hoechst33342 染色法检测细胞凋亡12
• 2.2.7 流式细胞术检测细胞凋亡12
• 2.2.8 Western blot 检测相关目的蛋白及细胞凋亡蛋白12
• 2.2.9 实验数据的统计学分析12-13
• 3 结果13-21
• 3.1 体外悬浮培养富集肝癌干细胞13
• 3.2 Western blot 检测肝癌干细胞相关蛋白表达的变化13-14
• 3.3 肝癌干细胞对传统化疗药物具有耐药性14-15
• 3.4 悬浮培养富集的肝癌干细胞生长速率迟缓15
• 3.5 MTT 检测硫利达嗪(Thioridazine)对肝癌细胞生长的抑制效果15-16
• 3.6 结晶紫染色检测 THO 对肝癌细胞的生长抑制效果16-17
• 3.7 Hoechst33342 染色实验检测 THO 诱导的肝癌细胞凋亡17
• 3.8 细胞流式检测 THO 诱导肝癌细胞发生凋亡现象17-18
• 3.9 Western blot 检测 THO 诱导肝癌细胞凋亡相关蛋白18-19
• 3.10 THO 联合 DOX 对肝癌细胞的增强杀伤作用19-21
• 4 结论与讨论21-23
• 第二部分 重组抑制肝癌单纯疱疹病毒相关质粒 tkBAC-fr 的构建23-48
• 1 引言23-28
• 1.1 肝癌研究进展23-25
• 1.2 溶瘤单纯疱疹病毒（HSV）治疗肿瘤的现状25-27
• 1.3 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF)27-28
• 2 实验材料与方法28-42
• 2.1 实验材料28-31
• 2.1.1 生化试剂28-29
• 2.1.2 菌株与质粒29
• 2.1.3 主要仪器29-30
• 2.1.4 主要溶液配制30
• 2.1.5 引物合成30-31
• 2.2 实验方法31-42
• 2.2.1 分子克隆31-40
• 2.2.2 疱疹病毒的构建40-42
• 2.2.2.1 细胞培养40-41
• 2.2.2.2 病毒的包装41-42
• 3. 实验结果42-47
• 3.1 tkBAC-fr 重组质粒的构建42-46
• 3.2 tkBAC-fr 质粒与疱疹病毒基因组进行同源重组46-47
• 4. 结论与展望47-48
• 参考文献48-53
• 致谢53

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：966986