淫羊藿素联合氟尿嘧啶对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用

发布时间：2017-10-05 05:19

  本文关键词：淫羊藿素联合氟尿嘧啶对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用

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【摘要】：目的：以人肝癌HepG2细胞为研究材料,探讨淫羊藿素联合氟尿嘧啶对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用和抑制其迁移及修复,为淫羊藿素联合氟尿嘧啶作为联合用药抗肿瘤提供理论依据。方法：以不同药物处理体外培养的人肝癌HepG2细胞,倒置显微镜下观察细胞贴壁情况和形态变化；用微量移液器20ul枪头做细胞划痕,于不同时间段观察不同药物处理后HepG2细胞的修复及迁移情况；在药物作用不同时间段后用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长抑制情况,并计算其生长抑制率(IR)和药物相互作用系数(CDI)；用流式细胞仪检测分析不同药物处理后细胞凋亡；用流式细胞仪检测分析不同药物处理后细胞周期。统计学方法处理：所有数据应用SPSS 18.0进行统计分析,计量资料的描述用均数±标准差表示(x±s),单处理因素各组间样本均数的多重比较采用单因素方差分析和LSD-t检验,两组比较采用成组t检验。检验水准α=0.05,定义P0.05有统计学意义。结果：1.倒置显微镜下发现正常HepG2细胞生长状态良好,细胞轮廓清楚。5-FU组、ICT组及ICT+5-FU组随着药物作用时间的增加,细胞形态逐渐变的不规则,数目不断减少,伪足不断增多,胞浆内出现空泡,细胞逐渐贴壁不良,不断出现凋亡小体,细胞脱落死亡逐渐增多,细胞碎片增多。2.MTT比色检测法发现ICT.5-FU、ICT+5-FU各组作用于人肝癌HepG2细胞有明显的抑制增殖的作用,且具有时间依赖性。同时亦发现在10～80umol/l浓度范围内ICT单独及联合5-FU对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用亦呈浓度依赖性；不同浓度的ICT与5-Fu联合运用后对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用均较各相应单药组明显增加(P0.05)。ICT (10umol/l、20umol/l、40umol/l)与5-FU联合作用人肝癌HepG2细胞24h、48h、72h,两药具有协同作用(CDI1),而ICT(80umol/l)与5-FU联合作用人肝癌HepG2细胞48h、72h,两药具有拮抗作用(CDI1)。3.流式细胞仪检测周期结果5-FU、ICT均对人肝癌HepG2细胞的S期周期有阻滞作用,并发现联合用药后对HepG2细胞的S期周期阻滞作用与各相应单用药物组比较,其阻滞作用增强。4.流式细胞检测凋亡结果可见各组药物对人肝癌HepG2细胞均有促进凋亡的作用。其中联合用药组与各相应单用药物组对人肝癌HepG2细胞细胞凋亡数量明显增加。5.细胞划痕实验发现各组药物均对HepG2细胞有明显的抑制迁移和修复的作用,随着各组药物作用时间的延长,其作用越明显。其中联合用药组与各相应单用药物组对人肝癌HepG2细胞迁移和修复的抑制作用明显增强。结论：淫羊藿素对人肝癌HepG2细胞增殖具有抑制作用,且呈时间-浓度依赖性,联合5-FU后其抑制作用更加显著。淫羊藿素对人肝癌HepG2细胞的S期周期阻滞,联合5-FU后其对S期周期阻滞作用增强。淫羊藿素对人肝癌HepG2细胞有促进凋亡的作用,联合5-FU后其促进凋亡的作用增强。淫羊藿素、氟尿嘧啶对人肝癌HepG2细胞具有抑制其迁移和修复的能力,联合5-FU后其抑制其迁移和修复的能力增强。
【关键词】：淫羊藿素 氟尿嘧啶 HepG2细胞 肝癌 抑制
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 中英文缩略词表5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-14
• 材料与方法14-24
• 1. 实验材料14-17
• 2. 实验方法17-23
• 3. 统计学处理23-24
• 实验结果24-35
• 1、普通显微镜下的HEPG2细胞形态学改变24-27
• 2、MTT检测不同药物对HEPG2细胞增殖的影响27-29
• 3、不同药物对HEPG2细胞迁移的影响29-32
• 4、不同用药对HEPG2细胞周期的影响32-33
• 5、不同药物对HEPG2细胞凋亡的影响33-35
• 讨论35-39
• 总结与展望39-40
• 1、课题总结39
• 2、课题展望39-40
• 参考文献40-43
• 综述43-50
• 参考文献48-50
• 攻读硕士研究生期间发表论文情况50-51
• 致谢51

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 解丽梅;刘丹丹;;肝细胞癌直方图血流定量分析参数与肿瘤血管生成的相关性研究[J];实用医技杂志;2007年25期

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本文编号：974990