功能性腹泻脾虚证动物模型制作及评价方法研究

发布时间：2016-09-20 08:05

  本文关键词：功能性腹泻脾虚证动物模型制作及评价方法研究，，由笔耕文化传播整理发布。

《北京中医药大学》 2014年

功能性腹泻脾虚证动物模型制作及评价方法研究

白世敬  

【摘要】：功能性腹泻作为一种临床常见功能性胃肠疾病,其临床表现与以泄泻为主要表现的脾虚证非常相似,而临床中,功能性腹泻常与脾虚证共见,故从病证结合角度研究功能性腹泻有重要意义。功能性腹泻脾虚证临床研究较多,而实验室研究较少,故建立功能性腹泻脾虚证动物模型很有必要。本文将从理论研究与实验研究来提出并验证功能性腹泻脾虚证的造模方法及评价方法。 理论研究：目的：研究功能性腹泻脾虚证动物模型的制作方法与评价方法。方法：系统研究关于功能性腹泻与脾虚证的相关文献,提出功能性腹泻动物模型制作方法与评价方法思路,并通过总结实验研究的结果,完善功能性腹泻脾虚证动物模型的制作与评价方法。结果：查阅功能性腹泻相关文献,认为目前功能性腹泻动物模型制作方法存在不足,评价方法也存在缺陷。脾虚证动物模型制作方法繁多,存在所用动物不同、造模时间长短不一、模型评价繁杂等情况。从病证结合角度研究功能性腹泻脾虚证结合有意义,但动物模型欠缺。故在查阅大量文献的情况下,我们提出功能性腹泻脾虚证动物模型的制作的基本原则为：动物模型从病因、症状、病程上兼具功能性腹泻及脾虚证的特点。在症状上,功能性腹泻脾虚证须兼有功能性腹泻与脾虚证的临床表现。即其动物模型须具备至少75%的排便为松软(糊状)或水样便,动物出现体重增加缓慢、纳呆、消瘦、少动、四肢无力、毛发枯涩等症状。功能性腹泻与脾虚证病程都较长,在造模时应以人与动物寿命长度比例要求造模时间,使动物模型病程与人类功能性腹泻“诊断前症状出现至少6个月,近3个月症状符合以上标准”时间同比例。功能性腹泻脾虚证动物模型评价的基本要求为：1、其病因、症状、病程符合功能性腹泻与脾虚证的特点；2、参考临床研究可能存在的客观指标对动物模型进行检测；3、运用临床有效药物对模型进行反证,药物有效。由于功能性腹泻病因未明,故在制作动物模型时可以参考中医脾虚证病因。结论：劳倦过度和饮食不节是临床脾虚证最常见的病因,故我们可以选择国外经典慢性腹泻造模方法一一高乳糖饲料喂养(饮食不节)加北京中医药大学中医诊断系研究的水环境小平台站立法(劳倦过度)造模,既符合中医病因要求,又能达到功能性腹泻与脾虚证的症状表现要求,造模14天,也可以满足功能性腹泻脾虚证的病程较长要求。 实验研究：目的：验证功能性腹泻脾虚证动物模型的制作方法与评价方法。方法：在此实验中,我们将实验分为两部分,分别为复制并选出较为合适的功能性腹泻脾虚证动物模型、药物反证模型。在第一部分的实验中,我们采用雄性wistar三周龄大鼠135只,复制了常见脾虚证劳倦过度及功慢性腹泻的制作方法,分为空白对照组、游泳组、水环境小平台站立组、游泳加水环境小平台站立组、高乳糖组、高乳糖加游泳组、高乳糖加水环境小平台站立5h组、高乳糖加水环境小平台站立组9h组、高乳糖加水环境小平台站立组14h组,造模14天,并每天对模型进行观察记录,计算腹泻指数。第15天,每组随机选取10只腹主动脉取血,其余大鼠去除施加因素,基础配方饲料喂养,每天对动物进行观察记录,计算腹泻指数。第29天,将余下大鼠取材,方法同前。在第二部分的实验中,我们使用治疗脾虚泄泻的经典药物参苓白术散来反证模型。采用wistar雄性三周龄大鼠90只,分为空白对照组、模型组、参苓白术散高剂量组(简称参高组)、参苓白术散中剂量组(简称参中组)、参苓白术散低剂量组(简称参低组)、黄连素组(简称西药组),运用在第一部分实验中选出的高乳糖加水环境小平台站立9h法造模14天,然后空白对照组、模型组纯净水灌胃,其他组大鼠分别灌胃不同剂量药物,共7天。第22天全部取材,取材方法如前。结果：通过症状记录及测定指标,我们发现造模14天后,高乳糖加小平台站立9h组大鼠腹泻便溏、体重增加缓慢、纳呆、少动、毛发疏松不泽等症状。腹泻指数高于空白对照组,与空白对照组相比P0.01；血清淀粉酶活性降低,与空白对照组相比P0.01；血清乳酸含量升高,与空白对照组相比P0.01。第28时,高乳糖加小平台站立9h组大鼠依然神疲乏力,毛发疏松,淀粉酶活性低于空白对照组(P0.01),因此我们认为高乳糖加水环境小平台站立9h是比较符合功能性腹泻脾虚证的动物模型制作办法。在第二部分的实验中,经过治疗,参苓白术散高、中、低剂量组皆可改善大鼠症状,大鼠大便正常或稍软,毛发有光泽,体重增长速度加快、摄食量增加,参高组与参中组大鼠血清淀粉酶活性接近空白对照组,无统计学差异；参高组、参低组乳酸含量与空白对照组接近,无统计学差异；参高组、参中组大鼠尿D-木糖排泄率较空白对照组明显增高(P0.01)。因此可以认为参苓白术散对高乳糖加水环境小平台站立9h法造模大鼠有治疗作用。结论：高乳糖加水环境小平台站立9h法是合格的功能性腹泻脾虚证动物模型制作方法。功能性腹泻脾虚证的评价应以症状表现为主,客观指标(血清淀粉酶、乳酸、尿D-木糖)检测为辅。

【关键词】：
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R259;R-332
【目录】：

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