三七乳膏的制备及体外透皮特性的研究

发布时间：2016-10-27 20:13

  本文关键词：三七乳膏的制备及体外透皮特性的研究，由笔耕文化传播整理发布。

《南方医科大学》 2014年

三七乳膏的制备及体外透皮特性的研究

黎月桃  

【摘要】：[研究背景] 2000年,世界卫生组织把疼痛列为继呼吸、脉搏、体温和血压之后的人类第5大生命指征。这种医学上的新观点、新认识正在逐渐普及到人民大众,使得疼痛医学受到了社会的广泛关注,得到了迅猛的发展。虽然在中国还缺乏大规模、多中心的流行病学调查数据,但在中国医院的临床诊疗中,疼痛是最常见的主诉之一,也是门诊患者就诊最主要的原因。 对于疼痛的治疗目前还存在着手段单一的局面。药物治疗是疼痛治疗的主导,包括各种麻醉、镇痛药物的口服和注射、麻醉药物神经阻滞疗法等。但存在着口服药物胃肠道反应大,不宜长期应用,麻醉剂成瘾性和神经阻滞专业技术要求高,难以普遍推广应用等问题。如何快速、高效、安全、稳定、有效、可控性镇痛,提高镇痛质量一直是医学界共同关注的重大课题之一 随着传统中药的研究与现代药理研究的不断深入,发现许多中草药具有明显的镇痛效果,对多种疼痛的镇痛疗效确切。而且没有明显的成瘾性、耐受性等毒副作用,是当今镇痛药研究的热点,具有广阔的开发应用前景。 三七(Panax notoginseng(Burk.) F.H.Chen)为五加科人参属植物,以干燥的根入药。其用于治疗疾病有着悠久的历史,是我国特有的珍贵药材。现代化学和药理学研究表明,三七具有止血、补血、营养心肌、抗动脉粥样硬化、保护心脑血管、营养脑神经、增加智力、调节免疫、镇痛、镇静、抗炎、抗衰老等作用。其中活血、镇痛作用尤为突出,刘荣东等研究证明三七总皂苷注射剂能明显缓解老年人骨关节炎疼痛的疗效。目前临床应用较多的三七总皂苷产品有血塞通注射液、云南白药、血塞通软胶囊、络泰粉针、正康脑明注射液、血栓通注射液、路路通注射液等。 经皮给药系统(Transdermal Drug Delivery System,TDDS):是指在皮肤表面给药,使药物以恒定速度(或接近恒定速度)通过皮肤各层,进入人体血液循环并达到有效血药浓度、实现疾病治疗或预防的一类新型制剂。TDDS的基本类型有：膜控释型、粘胶分散型、骨架扩散型、微贮库型。 TDDS是无创给药的新途径,具有以下特点及优势：避免了口服给药时肝脏的首过效应及胃肠道对药物的破坏,提高了药物的生物利用度；具有缓释作用,可减少给药次数,延长给药时间；保持血药水平稳定在治疗有效浓度范围内,降低了药物的毒性和副作用,提高了药物的疗效；避免了药物对胃肠道的刺激性,且给药无创伤,提高了患者的依从性；患者可以自主用药,相对减少患者个体间差异和个体内差异。 TDDS可通过化学渗透法及物理方法促进药物渗透。常用的渗透促进剂有月桂氮卓酮、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等。常用的物理促渗方法则有离子导入法、电致孔法、超声导入法、激光技术、磁导入及热穿孔。 乳膏是其中一种经皮给药制剂,是采用乳剂型基质制成的软膏剂,主要有保护创面、润滑皮肤和局部治疗作用。乳膏剂因使用方便、性质稳定、溶解性能较好等优点越来越受到人们的关注,很多新的医药原料正在尝试着制成乳膏,通过透皮吸收达到较好的治疗效果。 [研究目的] 确立三七乳膏的处方及制备工艺,并考察乳膏的稳定性；建立高效液相色谱梯度洗脱法测定三七乳膏中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Rd的含量、研究三七乳膏的体外透皮能力。 [研究方法] 1、三七乳膏的处方筛选及其制备工艺 根据三七的理化特性,以三七总皂苷为主药,以O/W型基质为载体,制备成三七乳膏。本课题通过对油相、水相组成配比和乳化剂及其用量进行筛选,以外观形状、离心实验、耐热耐寒实验及室温留样观察实验等评价指标,最终确定了乳膏的最佳处方,并通过对乳化方式、乳化温度、药物加入方式等考察来优选乳膏制备的最佳工艺。 2、三七乳膏稳定性考察 根据《中国药典》相关规定,运用离心实验、耐热耐寒实验、加速实验及室温留样观察实验考察三七乳膏稳定性。为进一步考察乳膏安全性,进行了皮肤刺激性实验,观察局部红斑和红肿反应。 3、分析方法学的建立 采用高效液相色谱法同步测定三七乳膏透皮吸收液中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1及Rd的含量。 标准对照品的制备：精密称取干燥至恒重的三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Rd对照品适量,置于10mL的容量瓶中,加25%甲醇溶解并稀释至刻度,制成三七皂苷R10.247mg·mL-1、人参皂苷Rg10.251mg·mL-1、人参皂苷Rb10.248mg·mL-1、人参皂苷Rd0.250mg·mL-1的混标溶液,于4℃冰箱保存。 标准曲线的绘制：分别精密量取标准对照品溶液0,1,2,3,4,5mL置于10mL量瓶中,用25%甲醇定容,稀释至刻度,摇匀,得到系列标准溶液。分别进样10μL,以峰面积为纵坐标、浓度X(μg·mL-1)为横坐标,绘制标准曲线,计算回归方程。 精密度试验：将标准对照品溶液连续进样6次,每次进样10μL,测定峰面积,计算相对标准差(RSD)。 稳定性试验：取透皮接收液按标准对照品溶液制备方法制成供试品溶液,1、2、4、6、8、10、12、14h进样1次,每次进样10μL,测定峰面积,计算RSD。 加样方法回收率实验：精密称取已知含量的样品,分别精密加入一定量的三七皂苷Rl,人参皂苷Rg1、Rb1、Rd标准对照品,按样品溶液制备项下操作,重复操作5份。按色谱条件测定含量,计算回收率。 4、体外透皮试验的研究 采用改良Franz扩散池,以完整裸鼠皮肤为渗透屏障,对三七乳膏进行体外透皮试验,分别在不同时间点取样测定透皮接收液中的浓度,采用高效液相色谱法测定三七总皂苷中主要成分三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Rd的累积透皮量。实验条件：扩散池面积为2.92cm2,接收液体积为7ml,接收液温度为32℃±0.5,磁振子转速200r·min-1,接收液为含30%乙醇的生理盐水。三七乳膏4份,置于扩散池中,涂匀,分别于给药后1、2、4、6、8、10、12、14h各取接受液1mL(取液后补充等体积接收液)。 [实验结果] 1、三七乳膏的制备 通过对处方筛选,最终确立三七乳膏的最佳处方,乳化剂：司盘-801g、吐温-804g；油相：硬脂酸5g、单硬脂酸甘油酯4g、白凡士林3g、液体石蜡10g；水相：甘油10g、蒸馏水61.8g；防腐剂：尼泊金乙酯0.2g。制备方法：采用后加乳化剂法,将三七总皂苷充分溶解于蒸馏水中,再加入其它基质(乳化剂除外),加热至85℃,待其充分溶解、混合。另称取乳化剂吐温-80、司盘-80加热至85℃,搅匀,将乳化剂加入其它基质中,均匀搅拌(1000rpm,15min),冷却、凝固、分装、即得。 2、三七乳膏稳定性考察结果 经过离心实验、耐热耐寒实验、加速实验及室温留样观察实验等的稳定性考察,三七乳膏未见酸败、变色、分层等现象,证明本乳膏性状稳定。 3、检测方法学的建立 色谱柱：Thermo C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相：A为乙腈,B为纯水,梯度洗脱。(0-4min)12%A,(4～30min)12%～45%A,(30-31min)45%-12%A,(31-33min)12%A；检测波长:203nm；流速:1.0ml-min-1；柱温：恒温；进样量：10μL。三七皂苷R1标准曲线：Y=0.1079X-2.636(0.9999),线性范围：24.7～123.5μg·mL-1；人参皂苷Rg1标准曲线：Y=0.1129X-2.774(0.9997),线性范围：25.1～125.5μg·mL-1人参皂苷Rbl标准曲线：Y=0.1082X-2.657(0.9997)；线性范围：24.8-124.0μg·mL-1;人参皂苷Rd标准曲线：Y=0.1120X-2.792(0.9999)；线性范围：25.0～125.0μg·mL-1。 精密度试验结果：三七皂苷R1RSD1.71%,人参皂苷Rg1RSD1.65%,人参皂苷Rb1RSD1.87%,人参皂苷Rd RSD0.82%,表明测定方法的精密度较高,符合含量测定的要求。 稳定性试验结果：三七皂苷R1RSD1.53%,人参皂苷Rgl RSD1.24%,人参皂苷Rb1RSD2.18%,人参皂苷Rd RSD0.92%。结果表明,样品中成分在14h内均较稳定,符合含量测定的要求。 加样方法回收率结果：三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Rd平均回收率分别为96.67%,99.30%,96.87%,98.23%。RSD分别为2.62%,1.83%,1.93%,2.13%。 4、体外透皮吸收结果 三七乳膏成分群渗透动力学参数：三七皂苷R1：Qn=4.83t+40.23,透皮吸收速率为4.83μg·cm-2·h-1;人参皂苷Rg1：Qn=8.15t+51.56,透皮吸收速率为8.15μg·cm-2·h-1;人参皂苷Rb1：Qn=5.02t+39.42,透皮吸收速率为5.02μg·cm-2·h-1;人参皂苷Rd：Qn=4.68t+41.35,透皮吸收速率为4.68μg·cm-2·h1。累积透皮吸收量与时间呈良好的线性关系,符合零级速率特征。 [结论] 三七乳膏生产工艺简便,渗透性良好,性质稳定可靠。本课题建立了三七的HPLC含量测定方法,该方法准确、灵敏、简单、重复性好,适用于三七体外透皮的系列研究。确立了三七的体外透皮试验仪裸鼠皮肤为渗透用皮肤,乙醇/生理盐水(3：7,V：V)为接收液,三七成分群累积透皮吸收量与时间呈良好的线性关系,符合零级速率特征。本课题为三七透皮吸收制剂的研制提供了实验依据。

【关键词】：
【学位授予单位】：南方医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R283.6;R286.0
【目录】：

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本文编号：155913