不同剂型七味白术散对肠道菌群失调腹泻模型小鼠治疗作用的相关免疫学机理研

发布时间：2016-10-29 15:39

  本文关键词：不同剂型七味白术散对肠道菌群失调腹泻模型小鼠治疗作用的相关免疫学机理研究，，由笔耕文化传播整理发布。

《湖南中医药大学》 2015年

不同剂型七味白术散对肠道菌群失调腹泻模型小鼠治疗作用的相关免疫学机理研究

刘卫东  

【摘要】：目的：观察不同剂型七味白术散对肠道菌群失调小鼠的治疗作用及对肠道黏膜免疫影响作用。 方法：1、采用盐酸林可霉素和头孢曲松钠注射液联合中药潘泻叶灌胃小鼠制备肠道菌群失调腹泻模型。 2、分组与治疗：模型成功后,将小鼠随机分为模型组(MG)(随后称自然恢复组ZFG)、七味白术散水煎液组(QJG)、七味白术散滴剂组(QDG)、七味白术散提取物组(QTG),并设正常对照组(NG)。各组在造模的第5天开始治疗,MG (ZFG)与NG给予蒸馏水灌胃,其余各治疗组小鼠给予相应剂型药物灌胃。 3、观察指标：给药治疗的第2天、4天、6天、8天各组各时间点取10只小鼠称体重后心脏采血处死,取粪便培养观察微生物种类及数量；小鼠小肠行病理切片HE染色观察肠组织病理,电镜观察肠组织超微结构；免疫组织化学法与RT-PCR检测小鼠小肠黏膜上皮细胞IFN-α、IL-4、IL-10的表达。 结果：1.造模后小鼠大便水样,稀便率、稀便级、腹泻指数显著增高,治疗过程中QJG、 QDG和QTG小鼠的腹泻次数、稀便率、稀便级和腹泻指数与MG比较(p0.05)。 2.模型组小鼠小肠绒毛断裂,上皮细胞肿胀,部分坏死脱落,炎性细胞增多,提示造模是成功。给药的第4、6、8天,QJG、 QDG和QTG治疗组小鼠肠黏膜病理损伤明显减轻,病理积分明显低于ZFG(p0.05)。 3.肠道菌群①造模后MG(ZFG)小鼠肠道粪便肠球菌、大肠杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌数量明显低于正常组p0.05)。②各治疗组小鼠肠道双歧杆菌、乳酸杆菌总数均在给药的第2天开始增加,给药的第8天QJG、 QDG和QTG菌群总数量分别与第6天、4天、2天比较明显增加p0.05,但低于正常组p0.05,三治疗组双歧杆菌、乳酸杆菌数量明显高于ZFG(p0.05); QJG、 QDG、 QTG双歧杆菌、乳酸杆菌恢复的顺序QTGQDGQJG。随观察时间延长模型组(ZFG)小鼠肠道双歧杆菌与乳酸杆菌细菌总数随观察时间延长也有一定程度恢复,与NG三治疗组比较差别有统计学意义(p0.05)。③小鼠肠道中肠球菌、大肠杆菌在给药的第2天开始下降,QJG、QTG、QDG与ZFG比较肠球菌、大肠杆菌数量明显下降p0.05,给药的第8天时QTG大肠杆菌数基本接近NG(p0.05), QJG.QDG也恢复迅速,与正常组比较(p0.05)。ZFG随观察时间延长肠球菌、大肠杆菌数量也有所下降,与NG三治疗组比较及差别有统计学意义p0.05。 4.给药的第2天QDG.QTG.QJG小鼠体重增加,不同时间各治疗组小鼠体重均重于MG小鼠,差别有统计学意义(p0.05),同组内不同治疗时间小鼠体重比较,差别有统计学意义(p0.05)。 5.①MG(ZFG)小鼠肠黏膜IL-4表达低于NG(p0.05),随观察时间延长其表达逐近上升,但给药的第8天时仍达不到NG.QJG.QTG.QDG水平(p0.05)；QJG.QTG.QD G小鼠小肠道黏膜IL-4表达各时间点差别无统计学意义(p0.05),三治疗组IL-4表达增高速度明显快于ZFG,差别有统计学意义(p0.05)。②MG(ZFG)小肠黏膜IL-10表达水平明显低于NG(p0.05),ZFG小鼠小肠道黏膜IL-10表达随时间的延长逐近恢复,不同时间点比较(p0.05),观察至给药第8天时ZFG仍然没有达到NG水平p0.05,与QJG.QTG.QDG比较p0.05.QJG.QTG. QD G小鼠小肠道黏膜IL-10表达增强其速度快于ZFG,差别有统计学意义(p0.05)。经QJG.QTG.QDG治疗的小鼠给药的第8天时IL-10表达与NG比较差别无统计学意义(p0.05)。③模型组小鼠肠道黏膜IFN-α表达明显高于NG(p0.05),高于QJG.QTG.QDG p0.05；随着治疗时间的延长QJG.QTG.QDG小鼠肠道黏膜上皮细胞IFN-α表达逐近下降,三组之间不同时间比较差别有统计学意义(p0.05),各时间点IFN-α表达均低于ZFG(p0.05),高于正常组差别有统计学意义(p0.05)。 结论：不同剂型的七味白术散均对肠道道菌群失调腹泻小鼠有良好的治疗作用,能恢复肠道正常菌群以及保护小肠黏膜。其机理可能是七味白术散通过下调肠道IFN-a的表达,上调IL-4、IL-10的表达,从而改善肠道免疫环境,抑制肠道炎症病理反应。

【关键词】：
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R272
【目录】：

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