抗支糖浆抑制咳嗽变异性哮喘气道炎症的实验研究

发布时间：2018-03-30 05:09

  本文选题：咳嗽变异性哮喘　切入点：抗支糖浆　出处：《黑龙江中医药大学》2016年博士论文

【摘要】：目的：探讨抗支糖浆抑制咳嗽变异性哮喘气道炎症的作用及机制,为进一步深入研究及其临床推广应用提供依据。方法：将75只SPF级雄性豚鼠,体重200±30g,采用随机数字均衡法分为5组：空白对照组(简称空白组)、模型对照组(简称模型组)、地塞米松组、抗支糖浆组、CAPE(咖啡酸苯乙酸酯)组,每组15只,适应性饲养1周后开始实验。致敏方法：除空白组外其余各组于实验的第1天肌注4%OVA溶液0.5m1,同时腹腔注射2％Al(OH)30.2ml；空白组以生理盐水代替OVA致敏。药物干预方法：各组于实验的第15天起进行药物干预,每日1次,持续14天。其中,抗支糖浆组每次按5g/kg体重的剂量给予灌胃,给药体积设为1ml/100g体重；CAPE组以腹腔注射15mg/kg代替药物灌胃：地塞米松组给予0.5mg/kg体重灌胃；空白组和模型组以生理盐水代替药物灌胃。雾化激发方法：从实验第16天开始,除空白组外其余各组,药物干预半小时后用1%OVA溶液雾化攻击,隔日一次,共7次；空白组以生理盐水代替OVA激发。末次雾化结束24小时内取材,通过HE、ELISA、Western blot和Real-time PCR等技术,从组织学水平、细胞水平及分子水平分别观察抗支糖浆对动物模型气道及肺组织病理变化,细胞因子、炎症介质,NF-κB信号通路上相关因子的蛋白及基因表达的影响。结果：1.咳嗽次数：与空白组比较,模型组明显增多(P0.01)；与模型组比较,抗支糖浆组、地塞米松组及CAPE组动物的咳嗽次数明显减少(P0.01)。2.BALF中细胞分类与计数：与空白组比较,模型组BALF中白细胞总数显著增多(P0.01),同时EOS绝对计数明显增多(P0.01)；MAC比例减少,但绝对计数增多(P0.05)；BALF中EOS、LYM的比例均明显增高(P0.05),其中尤以EOS比例增高最为明显(p0.01)。抗支糖浆组、地塞米松组、CAPE组BALF中白细胞总数、EOS绝对计数及EOS分类比例较模型组均有明显降低(P0.01)；与空白组比较无显著性差异(P0.05)。3.病理组织HE染色：模型组肺组织存在较多的炎性细胞,如嗜酸性粒细胞、淋巴细胞等浸润,管腔内可见上皮细胞脱落及分泌物增多,抗支糖浆组、地塞米松组与模型组比较,炎症明显减轻；CAPE组与模型组比较,炎症减轻但不显著。4.ELISA检测显示：与空白组比较,模型组BALF中细胞因子IL-1p. TNF-α、TGF-β1和血清中炎症介质ECP的含量明显升高,BALF中IFN-γ的含量明显降低(P0.05)；与模型组比较,抗支糖浆组、地塞米松组、CAPE组IL-1β、TNF-α、TGF-β1和ECP的含量明显降低,IFN-γ的含量明显升高(P0.05)；抗支糖浆组、地塞米松组、CAPE组之间比较,细胞因子IL-1β、TNF-α、TGF-β1、IFN-γ和炎症介质ECP,无显著性差异(P0.05)。5.免疫组化结果显示：与空白组比较,模型组IKB表达明显减少(P0.05)；与模型组比较,抗支糖浆组、地塞米松组、CAPE组IkB表达明显增多(P0.05)；抗支糖浆组、地塞米松组、CAPE组之间比较,IκB表达无显著性差异(P0.05)。6.Western BlOt检测结果显示：与空白组比较,模型组肺组织中NF-κB和TGF-β1蛋白表达明显增多(P0.05)；与模型组比较,抗支糖浆组、地塞米松组、CAPE组NF-κB口TGF-β1蛋白表达明显减少(P0.05)；抗支糖浆组、地塞米松组、CAPE组之间比较,无显著性差异(P0.05)。7.Real-time PCR检测结果显示：与空白组比较,模型组肺组织中NF-κB和TGF-β 1的mRNA表达明显增多(P0.05)；与模型组比较,抗支糖浆组、地塞米松组、CAPE组NF-κB和TGF-β1的mRNA表达明显减少(P0.05)；抗支糖浆组、地塞米松组、CAPE组之间比较,无显著性差异(P0.05)。结论：1.抗支糖浆可以改善CVA豚鼠的咳嗽等一般状况,减轻其肺组织的炎性浸润,减少粘膜下水肿及分泌物的产生,从而减轻气道狭窄及气道高反应性。2.抗支糖浆可以降低CVA豚鼠BALF中细胞因子IL-1β、TNF-α、TGF-β1的含量,升高IFN-γ的含量；降低血清中炎症介质ECP的含量,从而起到抑制CVA气道炎症的作用。3.抗支糖浆可以上调CVA豚鼠肺组织中IκB的蛋白表达,下调NF-KB和TGF-β1的蛋白表达,从而起到抑制CVA气道炎症的作用。4.抗支糖浆可以下调CVA豚鼠肺组织中NF-κB和TGF-β1的mRNA表达,从而起到抑制CVA气道炎症的作用。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：黑龙江中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R272

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