不同来源党参成分含量测定及党参HPLC特征图谱研究

  目的:党参(Codonopsis Radix)为中医治病常用的补中益气良药。2010版《中国药典》规定,党参来源于Codonopsis pilosula(Franch.)Nannf.、素花党参Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta(Nannf.)L.T.Shen.或川党参Codonopsis tangshen Oliv.[1],栽培历史悠久,目前市面上多为栽培品。由于党参种植范围广,产地自然环境、栽培加工方式等不同,党参药材质量参差不齐。药典还对党参的性状鉴别、显微鉴别、党参炔苷TLC鉴别和浸出物等检查项做了规定。产于山西古潞州(今长治市、晋城市等地)的党参统称为“潞党参”。潞党参是著名的山西省道地药材,质量上乘,栽培历史悠久。有关党参的各地方标准及不同基源党参鉴别的文献报道,多性状鉴别和显微鉴别项。因此,在现有质量标准基础上,以高效液相色谱指纹图谱入手,为进一步完善潞党参地方质量标准提供方法技术,为党参(潞党参)标准制订和质量控制提供方法,同时为不同基源党参鉴别、党参药材生产加工等提供理论依据。方法:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC色谱法),测定74批次党参药材中主要成分党参炔苷和苍术内酯III的含量,并比较差异;通过RP-HPLC色谱法,研究三种基源的54批次党参药材的HPLC特征图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2.0版)进行相似度评价,比较潞党参与其他来源党参特征图谱的差异;潞党参甲醇超声提取物经D101大孔树脂、ODS柱层析等反复分离纯化后,得到8个化合物,通过质谱、核磁共振氢谱和碳谱等光谱学方法检测及查阅相关等,确定化合物分子结构。结果:1不同来源党参成分含量测定不同来源党参样品含量差异明显。不同基源党参,均可检测到党参炔苷,部分可检测到苍术内酯III。潞党参中党参炔苷和苍术内酯III含量分别为0.356mg·g-1和0.035mg·g-1,含量较高,品质较好,但喷施壮根灵后,两种成分均显著降低。素花党参中10年生凤党含量最高,为2.236 mg·g-1,其次为纹党(3~4年生),显著高于其他产地、基源党参,推测生长年限对党参炔苷含量影响较大。而苍术内酯III,在基源为党参的野生台党中含量最高,为0.174 mg·g-1,潞党参次之,为0.035 mg·g-1,显著高于同基源白条党,川党参未检测到,素花党参中含量较低或检测不到,认为基源对苍术内酯III含量影响最大,可将苍术内酯III作为反映潞党参道地性的特征成分。结果表明,潞党参品质好,具有道地性。2不同来源党参HPLC特征图谱研究2.1潞党参HPLC特征图谱通过对20批次潞党参的特征图谱进行匹配,建立了潞党参对照药材的HPLC特征图谱,将5号峰(党参炔苷)作为参照峰,确定7个特征峰的相对保留时间,分别为:0.195(峰1)、0.323(峰2)、0.443(峰3)、0.616(峰4)、1.00(峰5)、1.01(峰6)、1.36(峰7)。将codonopyrrolidium B、党参苷I、党参炔苷、紫丁香苷和苍术内酯III通过标准品加入法,指认了HPLC特征图谱中的5个特征峰分别为:1号峰—codonopyrrolidium B、2号峰—紫丁香苷,4号峰—党参苷I,5号峰—党参炔苷,7号峰—苍术内酯III。2.2不同来源党参HPLC特征图谱相似度比较通过中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2.0版)对54批次不同来源党参HPLC特征图谱进行相似度评价,结果显示,潞党参与台党相似度最高在0.8以上,与白条党相似度为0.4~0.8,不同产地白条党之间相似度差异明显;与素花党参和川党参的相似度仅为0.1~0.4。表明党参基源差异大于产地差异,不同来源党参质量存在明显差异。2.3潞党参与其他来源党参HPLC特征图谱比较相同基源党参比较。潞党参与白条党和台党,基源植物相同,均为党参。白条党HPLC特征图谱中7个峰面积均值显著低于潞党参,尤其是1号(codonopyrrolidium B)、4号(党参苷I)、6号和7号峰(苍术内酯III),而且相对峰面积显著区别于潞党参;与台党差异主要为野生党参未检测到6号峰,1号(codonopyrrolidium B)、3号、7号(苍术内酯III)峰面积均值显著高于潞党参。不同基源党参比较,川党参HPLC特征图谱中,未检测到6号和7号峰(苍术内酯III),1号(codonopyrrolidium B)、3号和4号(党参苷I)峰的峰面积均值显著低于潞党参,相对峰面积差异显著。素花党参HPLC特征图谱均未检测到6号峰,1号(codonopyrrolidium B)、4号(党参苷I)和7号(苍术内酯III)峰面积均值显著低于潞党参,相对峰面积差异显著,但2号(紫丁香苷)和5号(党参炔苷)峰的峰面积均值高于潞党参。2.4不同栽培与加工处理方式党参比较喷施壮根灵后,党参HPLC特征图谱发生显著变化,相似度降低;不同采收年限党参HPLC特征图谱比较,4号(党参苷I)、6号和7号(苍术内酯III)峰差异明显;生长年限较长的党参中未检测到6号峰。熏硫后党参与白条党相似度仅为0.4~0.5,特征图谱中,仅主要检测到2号(紫丁香苷)、4号(党参苷I)和5号(党参炔苷)峰,峰面积显著低于潞党参。3党参特征性成分的分离鉴定潞党参中分离确定3个化合物结构分别为codonopyrrolidium B、党参苷I、党参炔苷,和5个疑似成分为三个寡糖和β-槐糖正己醇苷、9,10,13-三羟基-反-11-十八烯酸。codonopyrrolidium B在潞党参中首次分离到。结论:潞党参中党参炔苷和苍术内酯III含量较高,质量好,具有道地性。党参因基源、产地和栽培、加工处理方式的不同,特征图谱有明显差异;不同基源、产地党参HPLC特征图谱差异明显,潞党参比川党参多检测到6号和7号(苍术内酯III)峰,比素花党参多未检测到6号峰,比白条党峰面积高;而且,潞党参中4号峰(党参苷I)峰面积最高,均可检测到6号和7号峰(苍术内酯III)且峰面积明显较高,可作为反映潞党参道地性的特征成分。潞党参HPLC特征图谱,能够体现潞党参的独特性和道地性,为潞党参质量控制、标准制订提供了依据,同时也可以鉴别潞党参与川党参和素花党参,为党参生产加工方式的研究提供理论依据。

【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R284;O657.72
【目录】：

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