化肝通络方对大鼠活化的肝星状细胞增殖的影响及其作用机制研究

发布时间：2018-04-23 20:47

  本文选题：化肝通络方 + 原发性胆汁性肝硬化　； 参考：《南京中医药大学》2016年硕士论文

【摘要】：目的：进行原发性胆汁性肝硬化体外研究,探索化肝通络方对大鼠肝星状细胞增殖的影响及其作用机制。方法：1.含药血清的制备：40只清洁级SD大鼠随机分为化肝通络方高剂量组(73.7g/kg/d)、中剂量组(36.8g/kg/d)、低剂量组(18.4g/kg/d)及空白组(0.9%NaCl),持续灌胃7天,每天1次,每次2m1,最后1天灌胃之前禁食24h,最后一次灌胃1h后腹主动脉采血,静置,离心,补体灭活,过滤细菌,分装,-80℃冻存。2.药物成分测定：质谱分析药物组成并与标准品比对,确定其药物成分。3.化肝通络方对大鼠活化肝星状细胞增殖的影响：MTT法测定不同组别含药血清作用于活化肝星状细胞24h后,各组之间OD值的改变,确定药物对细胞增殖的影响。4.化肝通络方影响活化肝星状细胞增殖作用机制研究：不同组别含药血清和空白组血清作用于相同条件活化肝星状细胞24h,提取蛋白后western blot法检测TGF-β1、smad2/3、 smad7蛋白质的表达,确定本方对TGF-β/smad通路的影响。结果：1.含药血清制备：质谱分析对照品与中药原液,确定药液中含有化肝通络方有效成分。2.化肝通络方对大鼠肝星状细胞增殖的影响：中药作用后的细胞DO值显著下降,说明本方对肝星状细胞的增殖起到抑制作用,但是低剂量组无统计学差异(P0.05),中、高剂量组差异明显(**P0.01)。3.化肝通络方影响肝星状细胞增殖作用机制研究：western blot检测结果显示与空白组相比含药血清低剂量组TGF-β1、smad2/3蛋白无明显差异(*P0.05),中高剂量组含量下降(*P0.05)；含药血清中高剂量组smad7蛋白表达明显上升(*P0.05),低剂量组差异不显(P0.05)。结论：1.化肝通络方药液含有目标成分。2.化肝通络方含药血清对活化肝星状细胞增殖活动具有抑制作用。3.化肝通络方治疗原发性胆汁性肝硬化的其中一条路径是通过TGF-β/smad信号通路实现。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of Huagan Tongluo recipe on the proliferation of rat hepatic stellate cells in vitro. Method 1: 1. Preparation of serum containing drugs: 40 clean SD rats were randomly divided into high dose group (73.7 g / kg / d), middle dose group (36.8 g / kg / d), low dose group (18.4g / kg / d) and blank group (0.9g / kg / d). The abdominal aorta was collected, resting, centrifuged, complement inactivated, filtrated bacteria, and frozen at 80 鈩，

本文编号：1793578