血管活性肠肽在脾气虚大鼠中的作用研究

发布时间：2018-04-27 13:09

  本文选题：脾气虚证 + 小肠运动　； 参考：《辽宁中医药大学》2016年硕士论文

【摘要】：目的：研究发现小肠运动异常是脾气虚的常见症状,但发生机制不甚清楚。血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide, VIP)是一种重要的脑肠肽,其在脾气虚动物模型小肠运动异常中的作用还有争议。本工作主要研究脾气虚时小肠VIP-VPAC2R-cAMP—PKA信号转导通路的变化,探讨VIP在脾气虚小肠运动中的作用。材料与方法：1.动物分组20只SPF级雄性SD大鼠,随机地分为对照组和脾气虚证模型组(模型组),每组10只。2.模型复制及评价建立饮食失节加劳倦型脾气虚模型,即15d内：①先饱食1d,再禁食2d,均不禁水,共5个循环；②每日水温35～37℃游泳至力竭。评价标准：消瘦,食少,神疲,乏力等。3.小肠运动评价炭末推进法测定大鼠的小肠推进率水平。4.小肠形态学变化HE染色和透射电镜观察小肠的形态学变化。5.小肠VIP、cAMP和PKA水平制备小肠组织匀浆,采用ELISA方法检测。6.小肠VPAC2表达免疫组化法观察大鼠小肠组织中表达。7.数据处理采用SPSS17.0统计分析软件分析,实验数据均采用X±S表示,采用t检验,P0.05为有统计学有意义。结果：1.模型评价与对照组相比,模型组大鼠体质量、饮食和进水量减少,双前肢抓力下降,在旷场实验中,对照组大鼠表现活跃,运动距离远,且垂直活动次数多,其活动区域大,反映其好奇程度较高。模型组大鼠反应较为迟钝,运动距离均显著缩短,垂直活动次数也降低,活动区域变小；说明两模型组大鼠对外界事物关注度降低,好奇程度下降,且反应迟钝,这提示了脾气虚证大鼠出现了神疲乏力的症候模型,已经导致了脾气虚证大鼠的中枢神经系统严重损伤。模型组大鼠处于消瘦、纳少、神疲和乏力状态,提示模型复制成功。2.小肠推进率与对照组相比,模型组大鼠小肠推进率明显降低。3.形态学变化光镜下,与对照组相比,模型组未见明显改变；电镜下,对照组可见小肠黏膜上皮排列规则,表面微绒毛丰富,规则。细胞核杆状,形态较一致,细胞间紧密连接较短,桥粒结构良好。胞质内粗面内质网、线粒体丰富,而模型组黏膜表面上皮排列规则,胞质丰富,表面微绒毛丰富、规则,明显变长。细胞连接发育较差,紧密连接短,桥粒丰富,局部胞膜分离。胞质内含有大量溶酶体,电子密度均匀,粗面内质网丰富,轻度扩张。4.VIP-VPAC2-cAMP-PKA信号转导通路变化与对照组比较,模型组大鼠小肠组织的VIP含量显著升高,而cAMP和PKA的含量均显著降低,VIP受体在小肠组织的表达显著降低。结论：1.脾气虚状态下小肠运动减慢与VPAC2R受体表达下调所引起的cAMP及PKA的水平下降有关。
[Abstract]:Objective: the study found that abnormal small intestine movement is a common symptom of spleen qi deficiency, but the mechanism is not clear. Vasoactive intestinal peptide (VP) is an important brain-intestinal peptide, and its role in intestinal motor abnormality of spleen Qi deficiency animal model is still controversial. The purpose of this study was to study the changes of VIP-VPAC2R-cAMP-PKA signal transduction pathway in the small intestine during spleen qi deficiency and to explore the role of VIP in the small intestine movement of spleen qi deficiency. Materials and methods: 1. The animals were divided into 20 SPF male SD rats and randomly divided into two groups: the control group and the model group (model group, 10 rats in each group). The model was duplicated and evaluated to establish the spleen Qi deficiency model of dietetic disconnection and tiredness, that is, within 15 days, 1% 1 fed with full food for 1 day, then fasting 2 days, all could not help water, a total of 5 cycles 2 daily water temperature 3537 鈩，

本文编号：1810861