经穴反应性时间动态变化与不同部位TRPV1、TRPV4表达的相关研究
本文选题：经穴反应性 + 时间特征 ； 参考：《成都中医药大学》2016年硕士论文
【摘要】：目的：根据针刺后不同部位TRPV1、TRPV4受体的改变探讨经穴反应性时间动态变化的机理。方法：实验分为两部分进行：(1)将清洁级的雄性SD大鼠光暗驯化7天后,先进行基础痛阈的筛选,然后按照痛阈结果进行随机分组,将大鼠分为造模组和空白组；造模组在右足足垫部注射完全弗氏佐剂。造模成功后又按基础痛阈将大鼠随机分为模型组和模针组,每组均按照不同的处理时间点分为ZT0(7:00)、ZT4 (11:00)、ZT8(15:00)、ZT12(19:00)、ZT16(23:00)、ZT20(3:00)6个亚组。在6个不同时间点进行处理,模针组在相应时间点手针针刺大鼠患侧足三里30min,其间每5分钟捻转1min,频率为120次/min。空白组和模型组捆绑固定30min,不针刺。治疗结束后运用甩尾法检测不同时间点大鼠痛阈变化。(2)根据实验一重复测量方差分析的结果,选取针刺后痛阈曲线最高点和最低点对应的时相点进行实验,分组及造模方法同前,针刺治疗7天,在第7天治疗结束后立即取材,采用免疫组化的方法检测大鼠穴位局部、背根神经节以及脊髓中TRPV1、TRPV4的表达,比较经穴反应时间动态性与TRPV1、TRPV4的关系。结果：1、时间因素对空白组痛阈有显著影响,F=9.205,P=0.00,P0.05；痛阈的峰值出现在ZTO,谷值分别出现在ZT4和ZT12。2、造模后,大鼠痛阈明显下降,节律紊乱,时间因素对模型组痛阈无明显影响,F=1.155,P=0.3540.05。3、针刺后,大鼠痛阈明显升高,时间因素对痛阈的影响有显著意义,F=30.414,P=0.0000.05。其中针刺后痛阈升高最明显的时间点为ZT8,最不明显的时间点为ZT16。4、穴位局部皮肤：ZT8时间点,与空白组相比,模型组大鼠皮肤的TRPV1、TRPV4表达明显上调(P0.05或P0.01)；与模型组相比,模针组TRPV1、TRPV4含量显著下降(P0.05)。ZT16时间点中：与空白组相比,模型组大鼠皮肤的TRPV1、 TRPV4表达明显上调(P0.05)；针刺后,模针组大鼠皮肤TRPV1的含量与模型组比较,明显下降(P0.05),但TRPV4勺含量与模型组相比无明显差异(P0.05)。5、背根神经节：ZT8时间点,模型组大鼠背根神经节TRPV1、TRPV4含量与空白组相比,明显增加(P0.01),模针组大鼠背根神经节TRPV1、TRPV4含量与模型组相比,含量显著下降(P0.01或P0.05)。ZT16时间点：模型组背根神经节TRPV1、TRPV4含量非常明显增加(P0.01或P0.05)；与模型组相比,模针组背根神经节TRPV1含量明显下降(P0.05),但TRPV4含量与模型组相比无明显差异(P0.05)。6、在脊髓：ZT8时间点,模型组的TRPV1、TRPV4含量与空白组相比,明显增加(P0.01或P0.05)；与模型组相比,模针组的TRPV1含量明显下降(P0.01),但TRPV4蛋白含量无明显差异(P0.05)。ZT16时间点,模型组的TRPV1、TRPV4含量明显增加(P0.01)；针剌后,模针组TRPV1、TRPV4含量与模型组相比明显减少(P0.05)。结论：1、正常大鼠痛阈呈现节律性波动,受时间因素的影响。表现为双谷结构,谷值分别出现在ZT4和ZT12。2、经穴反应具有时间动态性变化,不同时间点针刺均可提高大鼠的痛阈,针刺后穴位反应性的强弱受时间因素的影响,表现为单峰一谷的结构。不同时间针刺对痛阈的影响不同,说明穴位的反应性不同,其中针刺后经穴反应最佳时间点为ZT8、最差的时间点为ZT16。3、经穴反应性时间动态变化可能与针刺后穴位局部、背根神经节、脊髓TRPV1、 TRPV4兴奋的数量以及种类有关。
[Abstract]:Objective: To explore the mechanism of dynamic changes in the response time of the meridians according to the changes of TRPV1 and TRPV4 receptors in different parts of the post acupuncture. Methods: the experiment was divided into two parts: (1) after the dark acclimation of the clean male SD rats for 7 days, the basic pain threshold was screened first, and then the rats were randomly divided into the models according to the pain threshold, and the rats were divided into models. Group and blank group; the model group was injected with complete Freund's adjuvant at the right foot pad. After the success of the model, the rats were randomly divided into the model group and the model needle group according to the basic pain threshold. Each group was divided into ZT0 (7:00), ZT4 (11:00), ZT8, ZT12, ZT16, ZT20, at different time points. At the corresponding time point, the group was treated with the hand acupuncture at the corresponding time point of the rats with the 30min of the Zusanli, which was twirling 1min every 5 minutes. The frequency of the 120 times /min. blank group and the model group were bound to the fixed 30min, without acupuncture. After the treatment, the pain threshold of the rats at different time points was detected by the tail flick method. (2) according to the result of the analysis of variance analysis of one repeated test, the results were selected. After the acupuncture, the highest point of pain threshold curve and the time point corresponding to the lowest point were tested. The group and the modeling method were the same before the acupuncture treatment for 7 days. After the treatment at the end of the seventh day, the material was taken immediately. The immunohistochemical method was used to detect the expression of TRPV1 and TRPV4 in the dorsal root ganglion and spinal cord, and the time dynamic of the acupoint reaction and the TRPV were compared. 1, TRPV4. Results: 1, time factors have a significant effect on the pain threshold of blank group, F=9.205, P=0.00, P0.05; the peak of pain threshold appears in ZTO, the valley value appears in ZT4 and ZT12.2 respectively. After the model, the pain threshold of the rat is obviously decreased and the rhythm is disordered. The time factors have no obvious effect on the pain threshold of the model group, F=1.155, P=0.3540.05.3, and acupuncture, pain threshold of rats. The effect of time factors on pain threshold was significant, F=30.414, P=0.0000.05., the most obvious time point was ZT8 after acupuncture, the most obvious time point was ZT16.4, the local skin of acupoint: ZT8 time point, TRPV1 of skin skin in model group, TRPV4 expression was obviously up up (P0.05 or P0.01), and the model was compared with the blank group. Compared with the model group, the content of TRPV1 and TRPV4 decreased significantly (P0.05).ZT16 time point: compared with the blank group, the expression of TRPV1 and TRPV4 in the model group was obviously up (P0.05). After acupuncture, the content of TRPV1 in the skin of the rat model group was significantly lower than that in the model group (P0.05), but there was no significant difference between the TRPV4 spoon content and the model group (P0.). 05).5, dorsal root ganglion: ZT8 time point, model group rat dorsal root ganglion TRPV1, TRPV4 content compared with the blank group, significantly increased (P0.01), the rat dorsal root ganglion TRPV1, TRPV4 content compared with the model group, the content was significantly decreased (P0.01 or P0.05).ZT16 time point: the model group dorsal root ganglion TRPV1, TRPV4 content was remarkably increased ( P0.01 or P0.05); compared with the model group, the TRPV1 content in the dorsal root ganglion of the model group was significantly decreased (P0.05), but the TRPV4 content was not significantly different from the model group (P0.05).6. In the spinal cord: ZT8 time point, the content of TRPV1 in the model group was significantly higher than that in the blank group (P0.01 or P0.05). Compared with the model group, the content of the model group was obvious. Decrease (P0.01), but there was no significant difference in TRPV4 protein content (P0.05).ZT16 time point, TRPV1 and TRPV4 content in model group increased significantly (P0.01); after acupuncture, the content of TRPV4 in model needle group was significantly reduced (P0.05) compared with model group (P0.05). Conclusion: 1, normal rats' pain threshold showed rhythmic fluctuation, influenced by time factors. The expression was double valley structure, valley The value of the acupoint reaction has time dynamic change, and the acupuncture at different time points can improve the pain threshold of the rats. The effect of acupuncture at different time points can increase the pain threshold of the rat. The intensity of acupoint reactivity after acupuncture is influenced by the time factor, which is the structure of single peak and one valley. The effect of acupuncture on pain threshold at different time is different, which shows that the reactivity of acupoints is different, among which acupuncture after acupuncture is different. After acupuncture, the effect of acupuncture on the pain threshold is different, among which acupuncture after acupuncture is different. The best time point of acupoint reaction is ZT8 and the worst time point is ZT16.3. The dynamic changes of the acupoint reactivity time may be related to the number and type of the acupoint, the dorsal root ganglion, the spinal cord TRPV1 and the TRPV4, after the acupuncture.
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R246
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，本文编号：2013645
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