慢性阻塞性肺疾病稳定期肺气虚证及其中药干预的血浆代谢组学研究

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中国中西医结合杂志 2011 年 12 月第 31 卷第 12 期 CJITWM，December 2011，Vol． 31，No. 12

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慢性阻塞性肺疾病稳定期肺气虚证及其中药 干预的血浆代谢组学研究
刘志刚 摘要 目的
1

李泽庚

1

彭

波

2

章天寿

1

徐

彬

1

张念志

2

童佳兵

2

杨

程

2

COPD) 稳 运用代谢组学方法研究慢性阻塞性肺疾病( chronic obstructive pulmonary disease， 定期肺气虚证及其中药干预的血浆代谢组学特征， 探索其可能存在的生物标记物。方法 选择 40 例 COPD 稳 定期肺气虚证患者( 肺气虚证组) ， 给予六味补气胶囊进行干预， 并设健康对照组( 37 名) 。分别对健康对照组 及肺气虚证组药物干预前后进行肺功能检查; 采用高效液相色谱 － 二极质谱联用仪检测血浆代谢物， 利用主成 PCA) 和偏最小二乘法( partial least squares， PLS) 对数据进行统计分析， 分分析( principal component analysis， 比 较两组血浆代谢组学原始谱图和数据。进行两组全谱氨基酸代谢组学检测。结果 与健康对照组比较， 肺气 虚证组治疗前肺功能明显下降( P ＜ 0. 05) ， 治疗 30 天后仍低于健康对照组( P ＜ 0. 05) 。肺气虚证组治疗前的代 但治疗后有向健康对照组回归的趋势。发现 15 种 COPD 肺气虚证可能的疾病标 谢谱与健康对照组明显不同， 记物。两组氨基酸代谢各有特点。结论 运用血浆代谢组学方法可以发现 COPD 稳定期肺气虚证患者存在代 谢谱和氨基酸代谢改变， 并发现其潜在的疾病标记物。对 COPD 稳定期肺气虚证患者进行中医药干预， 其代谢 。 谱和氨基酸代谢具有积极的变化 关键词 代谢组学; 慢性阻塞性肺疾病; 稳定期; 肺气虚证; 六味补气胶囊

Plasma Metabonomics Studies on the Stable Phase Chronic Obstructive Pulmonary Disease Patients of Fei- Deficiency Syndrome and the Chinese Materia Medica Intervention qi
PENG Bo，et al ABSTRACT Objective LIU Zhigang，LI Zegeng， Clinical Medicine College，Anhui University of Traditional Chinese Medicine，Hefei ( 230038) By using the metabonomics method， study the plasma metabonomics of the stato Forty stable

qi and of ble phase chronic obstructive pulmonary disease ( COPD) patients of Fei- deficiency syndrome ( FQDS) ， Chinese materia medica ( CMM) intervention，thus exploring possibly existent biomarkers． Methods phase COPD patients of FQDS were recruited as Group A． Liuwei Buqi Capsule ( LWBQC) was given to them as 37 intervention． A healthy control group ( Group B， cases) was set up． The pulmonary function test was performed on patients in Group B and Group A before and after intervention． The plasma metabolites were detected using high performance liquid chromatographymass spectrometry ( HPLC- / MS) ． Statistical data were analyzed using MS principal component analysis ( PCA) and partial least squares ( PLS) ． The original spectrum and data of plasma metabonomics were compared between the two groups． The whole spectrum amino acid metabonomics tests were performed in the two groups． Results Compared with Group B， pulmonary function significantly decreased bethe fore intervention in Group A ( P ＜0. 05) ． The pulmonary function was more mildly improved after 30 days' treatment than before treatment，but still lower than it in Group B ( P ＜ 0. 05) ． The metabolic spectrum before treatment in Group A was significantly different from Group B， showing regressive trend to Group B after treatment． Fifteen but possible disease markers were found in COPD patients of FQDS． Results of the whole spectrum of amino acid metabolomics showed different features． Conclusions The changes of metabolic spectrum and amino acids could be found in the stable phase COPD patients of FQDS using plasma metabonomics， and potential markers could be detected． The intervention of the stable phase COPD patients of FQDS by Chinese medicine could brought positive changes in the metabolic profiling and amino acid metabolism． KEYWORDS metabonomics; chronic obstructive pulmonary disease; the stable phase; Fei- deficiency qi syndrome; Liuwei Buqi Capsule
基金项目: 国家自然科学基金资助项目( No． 81270781) ; 安徽中医学院青年科学研究基金资助项目( No． 2010qn006) 作者单位: 1． 安徽中医学院临床学院( 合肥 230038) ; 2． 安徽省中医院呼吸科( 合肥 230031) Tel: E通讯作者: 李泽庚， 0551 － 2821852， mail: liudoctor@ 163． com

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慢性阻塞 性 肺 疾 病 ( chronic obstructive pulmonary disease， COPD) 现已成为第二大慢性疾病， 目前认为吸烟 COPD 发生的重要 和吸入生物燃烧的烟雾等有害气体是 原因， 但其根本的病因病机尚未完全阐明; 治疗 COPD 的 方法亦非常有限， 尚无能够缓解病情发展和功能损害的 有效措施 。研究 COPD 的发生、 发展过程及病情变化 并阐明其原理， 对减少 COPD 的发生、 减缓患者肺功能下 降时间、 改善生活质量、 延长生存时间等具有重要意义。 肺气虚证是 COPD 稳定期一种常见证型， 临床以咳喘无 力、 痰液清稀、 畏风自汗等为主要表现。代谢组学能够高 通量、 全景式、 直观地研究生物体在生理、 病理以及药物 和毒物作用下发生的各种代谢动态变化， 并揭示生物体 的作用机制。中医学强调从整体和系统角度认识和调节 人体生命活动规律， 代谢组学的特点能够在分子水平上 揭示和提高中医学的机理认识， 这将推动中医学理论的 现代化进程。本研究旨在探索 COPD 稳定期肺气虚证患 者及其中医药干预后的血浆代谢物特征， 并与健康人的 为 血浆代谢组学进行比较， COPD 稳定期肺气虚证的诊 断和治疗研究提供新的方法。 资料与方法 诊断标准及中医辨证分型标准 COPD 诊断 《 标准按 2007 年中华医学会呼吸病学分会制定的 慢性
［2 ］ 阻塞性肺疾病诊治指南 》 。 中医肺气虚证辨证标准 ［3 ］ 《 参照 中药新药临床研究指导原则》 。 ［］ 1

( 56. 8 ± 10. 1) 岁。 两组性别、 年龄等基线资料比较， ( P ＞ 0. 05) 。 差异无统计学意义 主要试 剂 、 器 及 应 用 软 件 试 剂 : 乙 腈 、 仪 甲醇色谱级 ， 国 菲 舍 尔 公 司 ; 蒸 馏 水 、 纯 水 系 美 超 统 ， 国 Thermo 公 司 ; 色 谱 柱 ， 国 Thermo 公 司 。 美 美 仪 器 : 高 效 液 相 色 谱 － 二 极 质 谱 联 用 仪 ( HPLC MS / MS ) ， 国 AB 公 司 ; 高 速 离 心 机 ( Centrifuge 美 5415 D) ， 国 Eppendorf 公 司 ; 液 体 快 速 混 合 器 德 ( YKA) ， 西 医 疗 器 械 厂 。 软 件 : SIMCA-11. 5 及 江 Mzmine ， 均为瑞士 Umetrics 公司 。 健康对照组正常生活， 不做任何干 预。肺气虚证组患者根据病情给予化痰 ( 溴己新， 上 治疗方法 海信谊制药有限公司生产， 批号: 101205，， 规格: 8 mg， 口服， 每次 16 mg， 每天 3 次 ) 、 解痉平喘 ( 氨茶碱缓释 片， 州 民 生 药 业 集 团 有 限 公 司 生 产，批 号: 杭 H109440037， 格: 0. 1 g， 服， 次 0. 2 g， 天 2 规 口 每 每 次) 、 营养支持 ( 复合维生素， 南京白敬宇制药公司生 ， : 101205， ， 2 片， 产 批号 口服 每次 每天 3 次) 及控制性 氧疗( 2 L / min 鼻导管吸入， 每天 12 ～ 15 h) 等常规治 并在常规治疗基础上服用六味补气胶囊 ( 院内制 疗， 剂， 安徽中医学院第一附属医院制剂室提供， 药物组 成: 生晒参 10 g 炙黄芪 15 g 益智仁 6 g 玉竹 10 g 陈皮 6 g 肉桂 3 g， 每粒 0. 5 g， 含生药 0. 4 g) ， 每天 3 次， 每次 3 粒， 连续服用 30 天。 6 肺功能检查 两组治疗后进行肺功能检测［ 用力 FEV 。 肺活量( FVC) 、 1 秒用力呼气量( FEV1 ) 、 1 / FVC］ 第 7 血浆代谢组学检测 标本制备 两组分别于药物干预前后于清晨 3 空腹行肘静脉采血 5 mL， 标本采集后， 000 r / min 离心 10 min， 取血浆 1 mL， 密封后置于 － 80 ℃ 冰箱中保存备 用。实验前将血浆样本放置室温下解冻后， 血浆样本涡 13 流， 200 r / min离心 5 min， 10 μL 上清液， 取 加入 100 μL 质谱检测用日常工作液， 使用涡流混匀机混匀， 旋转离 ， 50 ℃ 下氮气吹干， 60 μL 盐酸正丁醇， 心 然后在 加 使用 涡流混匀机混匀， 旋转离心， 65 ℃ 下衍生 15 min， 50 在 在 ℃ 下氮气吹干， 100 μL 乙腈和水( 8∶ 2) 混合液复溶， 用 使 用涡流混匀机混匀， 旋转离心， 。 备用 7. 2 HPLC- / MS 检测 在解放军第二炮兵总 MS 医院和北京艾米诺医学技术研究有限公司共建的实验 MS 室， 采用 HPLC- / MS 对供试血浆样品进行分离、 检 测、 析。 色 谱 分 离 条 件: 色 谱 柱 为 AAA C18， 分 5 μmol / L， mm × 4. 6 mm; 流动相: A 溶剂 0. 1% 甲 150 酸 水 溶 液，B 溶 剂 0. 1% 甲 酸 乙 腈 溶 液; 流 速: 0. 35 mL / min; 柱温: 50 ℃ 。 质谱检测条件: 毛细管电 压 2. 5 kV; 采样电压 38 V; 电离源温度 115 ℃ ; 脱溶剂 7. 1 5 4

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纳入及排除标准 ( 1) 纳入标准: 属 COPD 稳 ［4 ］ 且中医辨证符合肺气虚证 定期( 肺功能Ⅰ ～ Ⅲ级 ) ， 者; 年龄 30 ～ 70 岁; 经检查血、 尿常规， 、 肝 肾功能， 血 糖及血脂正常， 心电图无明显异常， 胸片示慢性支气管 炎、 肺气肿， 肺功能Ⅰ ～ Ⅲ级; 自愿参加并签署知情同 意书。( 2) 排除标准: 合并有结核、 真菌感染、 肿瘤及 ; 合并心功能不全者、 其他肺部原发性疾病 肺性脑病等 危重患者; 合并其他疾病如心血管、 泌尿、 消化、 造血、 内分泌、 代谢系统等严重并发症; 精神病患者; 妊娠或 哺乳期妇女; 除肺气虚证外， 有明显兼夹证者。 3 一般资料 选择 2008 年 9 月—2009 年 5 月安 徽中医学院第一附属医院呼吸内科门诊和合肥市区的 社区卫生服务中心门诊 COPD 稳定期肺气虚证患者 40 例， 均符合上述标准， 设为肺气虚证组， 其中男性 16 例， 女性 24 例; 年龄 41 ～ 70 岁， 平均 ( 59. 7 ± 9. 5) 岁。 37 名安徽中医学院职工和健康体检中心的志愿者， 无 心肺等基础疾患， 无遗传病史及吸烟史， 与受试者无血 缘关系， 经检查肺功能正常， 身体健康， 设为健康对照 组。其中男性 14 名， 女性 23 名; 年龄 39 ～ 68 岁， 平均

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气温度360 ℃ ; 脱溶剂气流量1 000 L / h。 7. 3 数据处理 采用 Mzmine 软件对原始色谱数 据进行处理: ( 1) 数据格式转换、 导入; ( 2) 图谱查看、 对比［ 总离子流图 ( TIC) 、 二维图像 ( 2D) 、 三维 图 像 ( 3D) 、 ; 质谱图像( MS) ］ ( 3) 去噪音; ( 4) 质谱峰提取; ( 5) 反卷积处理; ( 6) 峰排列、 对齐、 合并; ( 7) 峰合并 后开始列表去噪音; ( 8) 缝隙填补处理; ( 9) 数据导出。 11. 然后将数据导入 SIMCA- 5 软件， 进行主成分分析 ( principle component analysis， PCA) 和 偏 最 小 二 乘 法 ( partial least squares， PLS) 分析。 采用高效液相 色谱 － 二极质谱联用仪准确定量人体内 42 种氨基酸 在正常对照组及肺气虚证组治疗前、 治疗后的含量。 8 统计学方法 采用 SPSS 17. 0 统计学软件进 行分析， 计量资料以 x ± s 表示， 采用 t 检验; 计数资料 2 采用 χ 检验。P ＜ 0. 05 为差异有统计学意义。 7. 4 全谱氨基酸代谢组学检测 1

结

果 治疗前

两组 治 疗 前 后 肺 功 能 比 较 ( 表 1 )

COPD 肺气虚证组患者肺功能较健康对照组明显下降 ( P ＜ 0. 05) 。肺气虚证组治疗 30 天后， 肺功能较治疗 前有轻度改善， 但差异无统计学意义 ( P ＞ 0. 05) ; 与健 康对照组比较， 差异有统计学意义( P ＜ 0. 05) 。
表1
组别 健康对照 肺气虚证 例数 37 40

两组治疗前后肺功能比较
时间 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 FVC ( L) 3. 26 ± 0. 65 3. 22 ± 0. 68 2. 53 ± 0. 68 * 2. 66 ± 0. 71 *

( x ± s)
FEV1 /FVC ( % ) 76. 50 ± 6. 67 74. 22 ± 6. 85 60. 87 ± 5. 61 * 61. 69 ± 0. 72 *

FEV1 ( L) 2. 45 ± 0. 52 2. 39 ± 0. 51 1. 54 ± 0. 62 * 1. 55 ± 0. 78 *

* 注: 与健康对照组同期比较， P ＜ 0. 05

两组血浆代谢组学原始谱图和数据比较 ( 图 1 ～ 7， 2) 在健康对照组中保留时间为 301. 400 s 表 峰最高( 图 1) ， 在人类代谢组学数据库( human metabolome

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图1

健康对照组血浆样本 TIC 及其保留时间为 5 min 离子图 ( 分子量为 50 ～ 1 000)

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database， HMDB) 中 检 索 的 物 质 主 要 是 Palmitic acid ( 十六烷酸) ; 其在肺气虚证组治疗前对应的峰高 ( 保 留时间为 301. 300 s) 明显下降 ( 图 2) ， 说明该物质明 显减少; 在肺气虚证组治疗后 ( 图 3 ) 对应的峰高 ( 保 留时间为 301. 300 s) 接近健康对照组 。 肺气虚证组 治疗前与健康对照组的 TIC 图及其保留时间为 5 min 的离子图 ( 棒状图 ) 有明显的区别 ， 说明二者的代谢 物有明显不同 ， 即二者的代谢指纹图谱有明显不同 ; 肺气虚证组治疗后的 TIC 图及其保留时间为 5 min 的离子图与 治 疗 前 比 较 有 显 著 改 变 ， 明 显 有 趋 向 且 健康对照组的趋势 ( 图 1 ～ 3) 。 图 4 是健 康 对 照 组 和 肺 气 虚 证 组 治 疗 前 、 疗 治 后各一个样 本 的 血 浆 TIC 对 照 图 ， 图 中 可 以 更 直 从 观地看出肺气虚证组治疗前与健康对照组之间的差 异以及肺 气 虚 证 组 治 疗 后 向 健 康 对 照 组 回 归 的 趋 势 。 即在图 4 中肺气虚证治疗后的图形走向与健康 对照组的图 形 走 向 比 较 一 致 ， 肺 气 虚 证 治 疗 前 的 而 图形走向与 前 两 组 差 别 较 大 ， 明 健 康 对 照 组 与 肺 说

气虚证治疗 后 的 代 谢 物 成 分 相 似 ， 肺 气 虚 证 治 疗 与 。 前的代谢物则差别较大 11. 图 5 是使用 SIMCA- 5 软件做代谢物 PCA 分析 的散点得分图， 每个点代表一个样本。肺气虚证组治疗 前、 治疗后及健康对照组的样本分别处于不同区域， 说 肺气虚证组治疗后的 明各组的代谢物都有各自的特征， 样本处于本组治疗前和健康对照组之间的区域， 说明肺 气虚证组治疗后的代谢物特征介于肺气虚证组治疗前 和健康对照组之间， 显示中医药治疗 COPD 稳定期的有 效性( 代谢物成分相似的标本集中在某一个区域) 。 11. 图 6 是 使 用 SIMCA- 5 软 件 在 正 离 子 模 式 下 PLS 分析结果输出散点得分图， 每个点代表一个样本。 肺气虚证组治疗前、 治疗后及健康对照组的样本分别 分布在 3 个不同的区域内， 能够被明显地区分开来， 肺 气虚证组治疗前明显偏离健康对照组， 说明二者的代 谢物有明显差别; 而治疗后又偏离出治疗前， 有明显回 归健康对照组的趋势， 说明药物干预具有较好的作用 ( 代谢物成分相似的标本集中在某一个区域) 。

图2

肺气虚证组治疗前血浆样本 TIC 及其保留时间为 5 min 离子图 ( 分子量为 50 ～ 1 000)

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11. 图 7 是 SIMCA- 5 软件在正离子模式下 PLS 分析 的负载图， 左右两边为肺气虚证组区分健康对照组的可 能标记物质。对分组贡献较大的重要变量因子 ( VIP) 值前 50 种代谢物进行了提取， 根据同一分子量出现的 频次， t 检验筛选出候选标志物， 经 并观察各组样本血 浆中该代谢物的变化趋势。在正离子模式下， 检测得到 了肺气虚证组治疗前与健康对照组比较有明显变化的 15 种物质的质荷比， 并且比较 15 种物质在肺气虚证组

治疗前和健康对照组之间变化的趋势( 表 2) 。 3 两组氨基酸检测结果比较 在对样本做全谱 氨基酸代谢组学检测中发现， 氨基酸在肺气虚证组治 、 疗前 后和健康对照组中变化明显， 结果如下: 同型半 胱氨酸、 鹅肌肽、 肌肽在肺气虚证组治疗前出现， 肺气 虚证组治疗后和健康对照组未检出; 组氨酸、 赖氨酸、 苏氨酸、 缬氨酸、 甘氨酸、 丝胺酸、 酪氨酸、 天门冬酰胺、 b谷氨酰胺、 鸟氨酸、 半胱氨酸、 胱硫醚 、 丙氨酸 、 氨基

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图7 表2
编号 3375 874 3523 2933 3466 2939 3526 3328 3527 2501 686 2550 475 2062 1889 保留时间 ( min) 5. 02 6. 72 7. 66 9. 19 7. 56 7. 42 7. 68 11. 23 7. 73 9. 24 12. 47 4. 61 2. 24 12. 49 9. 35 分子量 重要变量因子 ( 道尔顿) 202. 173 257. 579 228. 386 353. 070 74. 300 362. 690 228. 500 339. 508 228. 200 353. 383 337. 069 202. 109 135. 283 311. 628 522. 125 2. 81 2. 72 2. 34 2. 29 2. 27 2. 23 2. 18 2. 18 2. 11 2. 10 2. 10 2. 06 2. 03 2. 01 2. 01

11. PLS 分析结果负载图 血浆 SIMCA- 5COPD 肺气虚证潜在生物标记物鉴定结果
标记物名称 变化趋势 ↑ ↓ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↓ ↑ ↓ ↑ ↑ 物质成分 C10 H19 NO3 C16 H32 O2 C5 H10 NO7 P C20 H32 O5 C3 H7 NO C22 H35 NO3 C9 H9 NO6 C22 H42 O2 C9 H13 N3 O4 C20 H32 O5 C21 H28 O6 C10 H19 NO3 C5 H10 O4 C20 H38 O2 C26 H52 NO7 P HMDB HMDB HMDB HMDB HMDB HMDB HMDB HMDB HMDB HMDB HMDB HMDB HMDB HMDB HMDB

Capryloylglycine( 辛酰甘氨酸) Palmitic acid( 十六烷酸) L-glutamic acid 5-phosphate( 5-磷酸左旋谷氨酸) 13， 14-dihydro15-keto-PGE2 ( 13， 14-双氢- 酮基前列腺素 E2 ) 15 3-aminopropionaldehyde( 3-氨丙醛) N-arachidonoyl glycine( N-花生四烯酰甘氨酸) 5-( 2'-carboxyethyl) 4，6-dihydroxypicolinate［ β-羧乙基) - 6-二羟基甲 5-( 4， 基吡啶］ Cetoleic acid( 廿十烯酸) Deoxycytidine( 脱氧胞苷) 8-iso15-keto-PGF2α( 8-异15-酮基前列腺素 F2α) 18-oxocortisol( 18-氧代皮质醇) Valproyl glycine( 丙戊酰甘氨酸) Deoxyribose( 脱氧核糖) Eicosenoic acid( 二十碳烯酸) LysoPC［ 1( 9Z) ］( 溶血性磷脂酰胆碱) 18:

3异丁酸、 乙醇胺、 甲基组氨酸、 脯氨酸在肺气虚证组 治疗前降低， 治疗后升高; 苯丙氨酸、 色氨酸、 γ 氨基丁 酸、 α 氨基已二酸、 天门冬氨酸、 瓜氨酸、 谷氨酸、 α氨 b1基正丁酸、 丙氨酸、 δ 羟基赖氨酸、 甲基组氨酸、 磷 酸丝胺酸、 羟化胍氨酸、 正缬氨酸、 正异亮氨酸、 磷酸乙 醇胺、 肌氨酸、 精氨 ( 基 ) 琥珀酸肺气虚证组治疗前升 高， 治疗后降低; 其他无明显变化。 讨 论

功能显著 下 降 ( P ＜ 0. 05 ) ; 肺 气 虚 证 组 使 用 六 味 补气胶囊治 疗 30 天 后 ， 功 能 稍 有 提 高 ， 明 中 肺 说 ， 气 道 阻 塞、 流 受 限 是 不 医药干预有一定作 用 但 气 可完全逆转的 。 寻找疾病的生物标记物是对疾病进行代谢组学研 究的最终目标。如果发现疾病特异性的标记物， 将对疾 病的预防、 、 诊断 治疗和预后等方面有着非常重大的意 义。本研究检测到肺气虚证组治疗前与健康对照组比 可能与 COPD 的发生有非 较有明显变化的 15 种物质， 常密切的关系， 即疾病标记物。 同时表明基于 HPLCMS / MS 的代谢组学可以检测出特征性的代谢物， 用于

本研究肺气虚证组治疗前较健康对照组的肺

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COPD 发病过程中及发病后与健康对照者的区分。 目前关于 COPD 发病标志物或 COPD 肺气虚证标 志物的文献报道甚少。本研究利用代谢组学方法试图 寻找 COPD 肺气虚证的标志物进行研究， 在检测这些 体液中内源性小分子物质时， 代谢组学方法是一种重 ［5， 6 ］ 。 Bathen TF 等［7］ 利 用 核 磁 共 振 要的 技 术 手 段 ( NMR) 方法在乳腺癌研究中分析乳腺活组织样品检 测出 30 种内源性代谢物， 发现与良性乳腺肿瘤组织、 健康人乳腺组织比乳腺癌组织中总胆碱化合物 ( tcho) 水平降低， 葡萄糖及丙三醇水平升高。 在前列腺癌的
［8 ］ 检测也显示了 tcho 及胆碱磷酸水平升高 。 赵晓山

始阶段， 在设计上有不足之处， 如未设其他疾病及中医 ， 证候作对照 拟在今后的研究中加以改进， 深入探索。
参 考 文 献

等

对中医脾脏在病理生理状态下唾液进行代谢组 N学研究， 正常对照组唾液中葡萄糖、 乙酰糖蛋白、 比 咯氨酸、 乙醇、 山梨醇、 羟脯氨酸等物质含量相对较高， 湿热蕴脾组唾液中乙酸、 丙酸盐、 牛磺酸等物质含量相 对较高， 脾气虚证组唾液中主要是谷氨酰胺、 蔗糖、 乳 、 。 孙理军等［10］研 酸盐 苯丙氨酸等物质含量相对较高 6、 究发现脾虚证大鼠白细胞介素- 唾液溶菌酶增高， 分 泌型免疫球蛋白 A 降低， 说明大鼠脾虚证存在着免疫 功能紊乱的现象， 且经过四君子汤治疗后， 紊乱的免疫 功能恢复正常， 萎缩及破坏的唾液腺有所恢复。 以上 研究结果揭示利用代谢组学技术对中医证候进行探索 研究， 是有可能找到中医证候的标志物的。 本研究发 现 15 种潜在的 COPD 肺气虚证的疾病标记物， 但这些 物质的定性和定量还需进一步检测， 这些标记物能否 确立， 还要继续探索研究， 结合临床进一步证实。 氨基酸是人类营养的基础， 是最重要的营养组分。 对氨基酸的研究是代谢组学中最为重要的一环。目前 对氨基酸的研究是比较广泛和系统的。临床上经常将 氨基酸分为必需氨基酸 ( 组氨酸、 赖氨酸等 ) 、 必需氨 —神经内分泌新陈代谢相关氨基酸 ( γ基酸衍生物 氨 基丁酸、 甘氨酸等) 、 / 能量新陈代谢相关氨基酸 ( α 氨 氨基已二酸、 天门冬酰胺等) 、 硫 新陈代谢相关氨基酸 ( 半胱氨酸、 胱硫醚等 ) 及其他代谢物相关氨基酸 ( α 氨基正丁酸、 丙氨酸等 ) 5 类， 根据各类氨基酸的变化 对身体健康状况和疾病情况进行评价。通过对全谱氨 基酸检测结果的系统分析提示检测结果的临床意义和 干预调节建议。 本研究发现， 组氨酸等在 COPD 肺气 虚证组治疗前降低， 中药干预后升高， 苯丙氨酸等反 之， 而患 者 表 现 好 转， 明 六 味 补 气 胶 囊 能 够 调 节 说 COPD 稳定期肺气虚证患者氨基酸代谢， 具有明确的 治疗作用。提示应用代谢组学技术与中医学理论相结 合对中医药进行研究有一定探索价值。本研究尚在初

［9 ］

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  本文关键词：慢性阻塞性肺疾病稳定期肺气虚证及其中药干预的血浆代谢组学研究，由笔耕文化传播整理发布。