【摘要】：目的:胆囊结石是常见病,多发病,严重影响人们的生活和工作,其治疗以手术为主,尤其是近年来发展迅速的EMIC,但手术最大的缺憾是存在结石复发。中医药对胆囊结石有良好的防治效果。在本研究中我们首先用高脂致石性豚鼠饲料建立胆囊结石豚鼠动物模型,然后再分别灌胃以疏肝理气、养肝柔肝和清肝利湿为治法的十二味疏肝利胆颗粒、一贯煎颗粒、龙胆泻肝颗粒,最后观察豚鼠大体生长情况;计算结石形成率;检测血清低密度脂蛋白胆固醇、丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、甘油三酯、胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇浓度;检测胆汁总胆汁酸、总胆红素、间接胆红素和钙离子浓度;光学显微镜下观察胆囊和肝脏组织病理改变。通过以上研究明确以疏肝理气、养肝柔肝和清肝利湿为治法的十二味疏肝利胆颗粒、一贯煎颗粒和龙胆泻肝颗粒有无防治胆囊结石的作用,并进一步揭示其作用机制及其作用效果之间有无差异,为其临床应用提供理论依据。方法:75只豚鼠随机分成5组,分别为正常组、模型组、疏肝组、养肝组和清肝组,每组15只。⑴干预方法正常组:喂以普通啮齿动物饲料,正常蔬菜量,同时予以与药物等量的生理盐水灌胃;模型组:喂以高脂致石性豚鼠饲料,少量蔬菜(相当于正常组的1/10),同时予以与药物等量的生理盐水灌胃;疏肝组:喂以高脂致石性豚鼠饲料,少量蔬菜的同时予以十二味疏肝利胆颗粒灌胃;养肝组:喂以高脂致石性豚鼠饲料,少量蔬菜的同时予以一贯煎颗粒灌胃;清肝组:喂以高脂致石性豚鼠饲料,少量蔬菜的同时予以龙胆泻肝颗粒灌胃;造模结束后观察豚鼠大体生长情况,称重;处死豚鼠,计算结石形成率,检测结石成分;采集豚鼠血液和胆汁并检测;光镜下观察胆囊和肝脏组织病理改变。⑵检测方法(1)结石成分检测采用红外光谱定性法;(2)丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶的检测采用赖氏法;甘油三酯的检测采用GPO-PAP法;总胆固醇的检测采用COD-PAP法;低密度脂蛋白胆固醇的检测采用直接法;高密度脂蛋白胆固醇的检测采用直接法;(3)总胆汁酸的检测采用酶比色法;总胆红素和间接胆红素的检测采用化学比色法;钙离子的检测采用甲基百里香酚蓝比色法。⑶统计学方法所有数据均运用17.0版本SPSS统计软件包处理,p㩳0.05认为差异有统计学意义。计数资料采用百分率表示,各组间差异的比较采用行×列表的卡方检验。计量资料采用均数±标准差(sx±)表示,各组间均数的比较采用单因素方差分析。结果:⑴与模型组相比疏肝组、养肝组和清肝组豚鼠的大体生长情况均明显改善,三组豚鼠体质量均明显升高(均p㩳0.05)。⑵与模型组相比疏肝组、养肝组和清肝组豚鼠的胆囊结石形成率均明显降低(均p㩳0.01)。⑶与模型组相比疏肝组、养肝组和清肝组豚鼠血清丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶活性均明显降低(均p㩳0.01)。与养肝组相比疏肝组和清肝组血清天门冬氨酸氨基转移酶活性均明显升高(p㩳0.01,p=0.002;p㩳0.05,p=0.034)。⑷与模型组相比疏肝组、养肝组和清肝组豚鼠血清甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇浓度均明显降低(均p㩳0.01);同时三组豚鼠血清高密度脂蛋白胆固醇浓度均明显升高(均p㩳0.01)。与清肝组相比疏肝组和养肝组血清甘油三酯浓度均明显降低(均p㩳0.05,p=0.029,p=0.027)。与清肝组相比疏肝组和养肝组血清总胆固醇浓度均明显降低(均p㩳0.01,p=0.000,p=0.000);与养肝组相比疏肝组血清总胆固醇浓度明显降低(p㩳0.01,p=0.002)。与养肝组相比疏肝组和清肝组血清低密度脂蛋白胆固醇浓度均明显升高(均p㩳0.01,p=0.000,p=0.000)。⑸与模型组相比疏肝组、养肝组和清肝组豚鼠胆汁总胆汁酸浓度均明显升高(均p㩳0.01);同时三组豚鼠胆汁间接胆红素浓度均明显降低(均p㩳0.05);总胆红素浓度均稍升高,但差异无统计学意义(均p㧐0.05,p=0.596,p=0.221,p=0.166);三组中仅清肝组豚鼠胆汁钙离子浓度明显降低(p㩳0.05,p=0.037)。⑹与模型组相比疏肝组、养肝组和清肝组豚鼠胆囊组织病理变化明显改善,差异显著。五组豚鼠中仅模型组少数豚鼠肝脏细胞呈嗜酸性改变,且与正常组相比无明显差异。结论:⑴十二味疏肝利胆颗粒、一贯煎颗粒和龙胆泻肝颗粒对豚鼠均具有促进进食,增加体质量,改善生长情况,维持生存的作用。⑵十二味疏肝利胆颗粒、一贯煎颗粒和龙胆泻肝颗粒均具有降低豚鼠血清丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶活性的作用。在降低天门冬氨酸氨基转移酶活性方面,一贯煎颗粒较十二味疏肝利胆颗粒和龙胆泻肝颗粒效果更显著,差异有统计学意义,但后两者之间差异无统计学意义。在降低豚鼠丙氨酸氨基转移酶活性方面,三者作用效果无明显差异。⑶十二味疏肝利胆颗粒、一贯煎颗粒和龙胆泻肝颗粒均具有降低豚鼠血清甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白浓度的作用,同时三者又均具有升高豚鼠血清高密度脂蛋白浓度的作用。在降低豚鼠血清甘油三酯方面,十二味疏肝利胆颗粒和一贯煎颗粒较龙胆泻肝颗粒效果更显著,差异有统计学意义,但二者之间差异无统计学意义。在降低豚鼠血清总胆固醇浓度方面,十二位疏肝利胆颗粒效果最显著,其次为一贯煎颗粒,龙胆泻肝颗粒相对前两者效果稍弱。在降低豚鼠血清低密度脂蛋白浓度方面,一贯煎颗粒较十二味疏肝利胆颗粒和龙胆泻肝颗粒效果更显著,差异有统计学意义,但后两者之间差异无统计学意义。在升高豚鼠血清高密度脂蛋白浓度方面,三者作用效果无明显差异。⑷十二味疏肝利胆颗粒、一贯煎颗粒和龙胆泻肝颗粒均具有升高豚鼠胆汁总胆汁酸浓度的作用,同时三者又均具有降低豚鼠胆汁间接胆红素浓度的作用,而三者对豚鼠胆汁总胆红素浓度均无明显影响,三者中仅龙胆泻肝颗粒具有降低豚鼠胆汁钙离子浓度的作用,而十二味疏肝利胆颗粒和一贯煎颗粒对豚鼠胆汁钙离子浓度均无明显影响。在升高豚鼠胆汁总胆汁酸浓度方面,一贯煎颗粒较十二味疏肝利胆颗粒效果更显著,差异有统计学意义,但龙胆泻肝颗粒与两者之间的差异无统计学意义。在降低豚鼠胆汁间接胆红素浓度方面,三者作用效果无明显差异。⑸十二味疏肝利胆颗粒、一贯煎颗粒和龙胆泻肝颗粒均具有改善豚鼠胆囊组织病理变化的作用,且三者作用效果无明显差异。⑹以疏肝理气、养肝柔肝和清肝利湿为治法的十二味疏肝利胆颗粒、一贯煎颗粒和龙胆泻肝颗粒通过减轻豚鼠胆囊受损害程度,改善胆囊组织病理变化,保护胆囊功能;升高豚鼠血清高密度脂蛋白胆固出、胆汁总胆汁酸浓度,降低豚鼠血清甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和总胆固醇浓度,逆转成石性胆汁,从而抑制豚鼠胆囊结石的形成,降低豚鼠胆囊结石的形成率,在抑制结石形成效果方面三者无明显差异。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：安徽中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R259
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本文编号：
2339842
