电针改善COH小鼠胚胎着床中IGF-1的表达及最佳治疗时间的研究

发布时间：2019-07-21 19:54

【摘要】：目的本实验用控制性超促排卵小鼠为研究对象,运用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriotion-polymerase chain reaction,R T-PCR)技术,以及蛋白质印迹法(western blot),观察电针对控制性超促排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)小鼠子宫内膜IGF-1表达的影响,并通过统计对比观察针刺介入的最佳治疗时间。方法将雌性小鼠称重标记后随机分为自然周期组、COH组、降调节组、Gn启动组、HCG组和胚胎移植日组。自然组不做任何打药处理。COH组和电针组小鼠建立长期超促排卵小鼠模型:首先开始降调节,每天上午9时定时腹腔注射曲普瑞林(Gn Rh-a)0.02μg/g,连续9天,并于第9天下午6点注射孕马血清促性腺激素(Pregnant Mare Serum Gonadotropin,PMSG)10IU;46-48小时后注射绒促性激素(human chorionic gonadotropin,HCG)10IU。电针组中的降调节组在开始降调节当天介入电针治疗;Gn启动组在注射PMSG后的当天介入电针治疗;HCG组在注射HCG后的当天介入电针治疗;胚胎移植日组在胚胎移植后的当天介入电针治疗。取“关元”、“中极”、“三阴交”穴,在每天相同的时间点予电针治疗,每次15分钟。1次/日,直至取材停止针刺。在HCG注射后的当天与雄鼠混笼,然后取胚、培养、移植。移植后第三天处死取材。观察妊娠率和胚胎着床位点数,RT-PCR检测子宫内膜IGF-1 m RNA,Western blot检测IGF-1蛋白表达。结果1.经控制性超促排卵后,COH组妊娠率显著低于自然周期组,具有统计学意义(P0.01);在Gn启动组、HCG组和胚胎移植日组行电针治疗后,妊娠率较COH组显著提高,且差异具有统计学意义(P0.01),但HCG组和胚胎移植日组效果最理想,与Gn启动组相比,具有统计学意义(P0.01);在降调节组行电针治疗后,妊娠率反而降低,与COH组相比,具有显著性差异(P0.01)。2.经控制性超促排卵后,COH组小鼠子宫的平均着床位点数显著低于自然周期组,差异具有统计学意义(P0.01);经过电针治疗后,HCG组是电针组中平均着床位点数最高的一组,与COH组相比显著增加,差异具有显著性(P0.01);但降调节组、Gn启动组和胚胎移植日组均未能明显改善平均着床位点数。3.各组小鼠的子宫内膜均有IGF-1m RNA的表达;经过超促排卵造模后,COH组子宫内膜IGF-1 m RNA表达显著性减少,与自然周期组相比,具有统计学意义(P0.05);电针治疗后,HCG组和胚胎移植日组表达增加,与COH组相比,差异具有统计学意义,但HCG注射日组增加更显著(P0.05)。4.各小组子宫内膜均有IGF-1蛋白的表达。经过造模之后,子宫内膜IGF-1蛋白的相对表达量显著降低,COH组明显低于自然组,且具有统计学意义(P0.05);经过电针治疗后,电针组的表达量均高于COH 6组,具有统计学意义(P0.05);HCG组小鼠子宫内膜IGF-1蛋白的表达量为6组中最高,与自然周期组相比具有统计学意义(P0.05)。结论1.电针能影响胚胎移植的着床率,当在注射HCG后介入电针治疗,着床率最高。2.IGF-1参与胚胎着床的过程。3.电针能影响胚胎着床过程中,子宫内膜IGF-1的表达,当在注射HCG后介入电针治疗,子宫内膜IGF-1的相对表达量最高。
【图文】：

各组小鼠子宫内膜IGF-1mRNA的相对表达量

各组小鼠子宫内膜IGF-1蛋白的相对表达量
【学位授予单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R245

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