电针足三里和长强穴对端粒酶基因敲除小鼠皮质区JNK-CREB信号通路的影响

发布时间：2020-03-21 06:38

【摘要】：目的:探讨电针足三里穴、长强穴对端粒酶基因敲除小鼠(Terc~(-/-)小鼠)、野生型小鼠大脑皮质区JNK—CREB相关信号通路的影响及其神经保护作用机制。方法:采用随机数字表法将野生型小鼠分为空白组、足三里组和长强组;将Terc~(-/-)小鼠即纯合子型分为空白组、足三里组和长强组,每组6只,共36只。所有组别的小鼠均于每日固定时间干预一次,连续干预7d。野生型空白组、纯合子型空白组仅模拟抓握动作;野生型足三里组、纯合子型足三里组电针刺激双侧足三里穴,进针深度约1.5mm;野生型长强组、纯合子型长强组电针刺激长强穴,进针深度约6mm。运用电针刺激的组别均采用韩氏电针仪连接双极连体针,电针参数为:2Hz、2mA、连续波,干预时长30min。干预后对各组小鼠进行Morris水迷宫行为学检测。采取免疫组化法及免疫印迹法分析大脑皮质JNK、CREB、p-CREB蛋白的表达情况。实验数据统计方法组间比较采用方差分析。结果:(1)行为学检测结果:干预治疗后,野生型中,长强组与空白组相比,穿越平台次数增加,具有显著性差异(P0.05);纯合子型中,长强组与空白组相比,穿越平台次数显著增加,具有显著性差异(P0.01);纯合子型中,长强组与足三里相比,穿越平台次数显著增加,具有显著性差异(P0.05)。纯合子型中,长强组及足三里组与空白组相比,于中心区域时间比重均显著增加,具有显著性差异(P0.05)。(2)免疫组化法检测结果:纯合子型中,长强组JNK蛋白的阳性目标平均光密度值表达均低于空白组和足三里组,具有显著性差异(P0.01);长强组CREB蛋白的阳性目标平均光密度值表达高于空白组,具有显著性差异(P0.001);足三里组CREB蛋白的阳性目标平均光密度值表达高于空白组,具有显著性差异(P0.05);足三里组p-CREB蛋白的阳性目标平均光密度值表达高于空白组,具有显著性差异(P0.01);长强组p-CREB蛋白的阳性目标平均光密度值表达高于空白组,具有显著性差异(P0.001)。(3)免疫印迹法检测结果:纯合子型中,足三里组JNK蛋白的表达低于空白组,具有显著性差异(P0.05);长强组JNK蛋白的表达低于空白组,具有显著性差异(P0.01);足三里组CREB、p-CREB蛋白的表达均高于空白组,具有显著性差异(P0.01);长强组CREB、p-CREB蛋白的表达均高于空白组,具有显著性差异(P0.01);长强组CREB蛋白的表达高于足三里组,具有显著性差异(P0.05)。野生型中,长强组JNK、p-CREB蛋白的表达均低于空白组,具有显著性差异(P0.01);足三里组p-CREB蛋白的表达高于空白组,具有显著性差异(P0.05)。结论:(1)电针足三里、长强穴能改善端粒酶基因敲除小鼠的学习记忆能力。(2)电针足三里穴、长强穴对端粒酶基因敲除小鼠大脑皮质区JNK蛋白的表达具有抑制作用,但对野生型小鼠抑制作用不显著。(3)电针足三里穴、长强穴对端粒酶基因敲除小鼠大脑皮质区CREB、p-CREB蛋白的表达具有激活作用,但对野生型小鼠激活作用不显著。
【学位授予单位】：福建中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R245

【相似文献】