佛甲草抗肺癌活性成分的发现及活性研究
发布时间：2020-08-24 07:22
【摘要】：目的:佛甲草(Sedum lineare Thunb)是为景天科(Crassulaceae)佛甲草属多年生草本植物,是一种常用的民族民间用药。本文旨在对佛甲草全草进行系统的化学成分分离与鉴定,并对其进行抗肺癌活性的研究。方法:1、用液-液萃取、硅胶柱色谱、C18反相柱色谱、SephadexTMLH-20凝胶柱色谱、快速制备色谱及半制备HPLC等方法对佛甲草总提物进行系统的分离、纯化,用UV、ESI-MS、NMR等数据对所分离的单体化合物进行结构鉴定。2、用CCK-8法检测佛甲草总提物及各萃取部位对非小细胞肺癌A549细胞的增殖抑制作用,计算半数抑制浓度IC50值,筛选出抗肺癌活性较好的萃取部位进行单体化合物的分离。3、用CCK-8法检测各单体化合物对非小细胞肺癌A549细胞的增殖抑制活性,计算半数抑制浓度IC50值,比较各单体化合物与阳性对照药人参皂苷Rg3对A549细胞增殖的抑制作用。4、通过划痕实验检测各单体化合物对A549细胞的转移影响。比较各单体化合物与空白对照组对A549细胞转移的影响。结果:1、从佛甲草80%乙醇提取物中分离纯化得到8个单体化合物,并根据其理化常数及波普解析对其结构进行鉴定。鉴定出其分别是化合物1芹菜素(Apigenin)、化合物2 3-0-甲基槲皮素(3-O-Methylquercetin)、化合物3木犀草素-4'-O-β-D-(6"-E-咖啡酰)-吡喃葡萄糖苷(Luteolin 4'-O-β-D-(6"-E-caffeoyl)-glucopyranoside)、化合物4槲皮素(Quercetin)、化合物5 木犀草素(Luteolin)、化合物6木犀草素-4'-葡萄糖苷(Luteolin-4'-glucoside)、化合物7绣线菊苷(Spiraea)、化合物8腺苷(Adenosine),其中化合物1、2、3、6、7、8是从该植物中首次分离得到的。2、佛甲草总提物对A549细胞具有较强的抑制作用,乙酸乙酯部位、正丁醇部位能够很强的抑制A549细胞增殖的活性,半数抑制率分别是78.23μg/mL、89.45μg/mL,与对照组相比,具有非常显著地差异。而石油醚部位、二氯甲烷部位、水部位表现出来一定的抑制活性,但半数抑制浓度已经超过500μg/mL,抑制活性相对较弱。3、化合物6对A549细胞有一定的抑制作用,且与给药剂量成相关性,随着药物浓度的增加,其抑制率逐渐增大,半数抑制浓度为70.47 μmol/L。化合物4在浓度高于31.25 μmol/L时,抑制率基本不变。化合物5、化合物7、化合物8当浓度达到250 μmol/L时,其抑制率没达到50%,且随着药物浓度的增加,这四种化合物的抑制率变化不大,与阳性对照Rg3相比,抑制作用相对较弱。4、划痕实验表明,六种单体化合物对A549细胞的转移具有一定的抑制作用。其中化合物6的划痕面积改变率最低为3.16%,说明化合物6对A549细胞的转移具有较强的抑制作用。与空白对照组相比,化合物4、化合物7的划痕面积改变率相对较小,化合物8的划痕面积改变率较大,表明化合物4、化合物7能较强的抑制A549细胞的迁移,化合物8的作用则相对较弱。化合物4、化合物7能够较强的抑制A549细胞的转移,而化合物5、化合物8的抑制作用较弱。结论:从佛甲草提取物中分离纯化得到8个单体化合物,鉴定出其分别是化合物1芹菜素(Apigenin)、化合物2 3-O-甲基槲皮素(3-O-Methylquercetin)、化合物3木犀草素-4'-O-β-D-(6"-E-咖啡酰)-吡喃葡萄糖苷(Luteolin 4'-O-β-D-(6"-E-caffeoyl)-glucopyranoside)、化合物4槲皮素(Quercetin)、化合物5木犀草素(Luteolin)、化合物6木犀草素-4'-葡萄糖苷(Luteolin-4'-glucoside)、化合物7绣线菊苷(Spiraea)、化合物8腺苷(Adenosine),其中化合物1、2、3、6、7、8是从该植物中首次分离得到的。佛甲草各萃取部位中,乙酸乙酯部位和正丁醇部位对A549细胞的抑制作用较强,推测佛甲草抗肺癌活性成分可能集中在这两个萃取部位。化合物6对A549细胞有一定的抑制活性,其抑制率与给药浓度呈正相关,而化物4、化合物5、化合物7、化合物8的抗肺癌活性则相对较弱。本文初步研究了佛甲草各部位及其化学成分对A549细胞增殖及转移作用的影响,为进一步研究佛甲草治疗肺癌及其他肿瘤提供一定实验依据。
【学位授予单位】：中央民族大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R29
【图文】：
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本文编号：2802170
【学位授予单位】：中央民族大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R29
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