电针单穴与腧穴配伍对睡眠剥夺模型大鼠学习记忆能力调节效应的对照研究

发布时间：2020-09-19 12:39

　　 目的:1、通过水迷宫实验,检测电针前后睡眠剥夺模型大鼠空间学习和记忆能力改变情况。2、对比电针单穴与配伍腧穴在治疗睡眠剥夺后大鼠学习、记忆能力下降方面的效应差异。3、研究电针干预对睡眠剥夺模型大鼠海马体中睡眠相关神经递质调节机制,研究电针单穴与配伍腧穴治疗失眠的疗效,为失眠神经生物学机制和临床针刺治疗失眠提供理论依据。方法:健康雄性SD大鼠共60只,随机分成6组,每组10只,分别是正常组、模型组、百会组、神门组、三阴交组与百会-神门-三阴交配伍组(简称“三才组”)。(1)实验开始前适应性喂养一周,腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)建立睡眠剥夺模型(2)造模成功后的第2天,使用Morris水迷宫对各组大鼠的认知功能进行连续4天的评估,进行定位巡航实验及空间探索实验。(3)同时进行电针干预,治疗结束后1h取材,采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测大鼠海马体中与学习记忆相关的蛋白激酶A-Cβ亚基(PKA-Cβ)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(P-CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)及原肌球蛋白受体激酶(TrkB)表达情况。结果:(1)水迷宫定位航行实验显示,神门穴组、百会组、三阴交组和配伍组潜伏期显著缩短(p0.05),配伍组潜伏期低于其他三治疗组(p0.05)。空间探索实验结果显示,模型组大鼠穿越平台原位置的次数明显减少(p0.05),百会组、三阴交组和配穴组穿越次数明显增多(p0.05),而配伍组的次数明显多于其他三治疗组,提示针刺单穴神门、百会和配伍均显著改善了失眠大鼠空间工作记忆能力,其中配伍组改善效果最佳。(2)与正常组大鼠相比,模型组大鼠海马组织内BDNF、TrkB、P-CREB和PKA-Cβ蛋白表达量明显降低(p0.01,p0.05,p0.05,p0.01),针刺神门穴后海马组织内BDNF、TrkB和PKA-Cβ表达量显著升高(p值均0.05),针刺百会穴后TrkB和PKA-Cβ表达量明显上调(p0.05,p0.05),针刺三阴交穴后BDNF和TrkB的表达量明显上调(p0.05,p0.05),针刺配伍腧穴后BDNF、TrkB、P-CREB和PKA-Cβ表达量明显上调(p0.01,p0.05,,p0.05,p0.01),且BDNF的表达明显高于百会组(p0.05),PKA-Cβ蛋白表达量明显高于三阴交组(p0.05),说明腧穴配伍对失眠大鼠海马内改善学习记忆相关蛋白的表达的上调作用优于单穴。结论:1.Morris水迷宫可以作为评价睡眠剥夺模型大鼠学习记忆能力的有效性指标。2.无论从行为学方面还是学习记忆相关蛋白表达,电针都可以有效调节大鼠睡眠剥夺所导致的学习记忆功能障碍。3.电针可激活海马神经元内学习记忆功能相关的PKA-Cβ→P-CREB→BDNF/TrkB信号调节通路,不同程度的影响其蛋白质的表达,而且腧穴配伍的影响效应优于单穴,推测其将导致多种神经生理活动的变化并促进海马神经细胞的分化、再生及存活,从而改善失眠大鼠的学习记忆功能。
【学位单位】：长春中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R245.97
【部分图文】：

2 实验方法2.1 实验流程图1 实验流程2.2 实验动物分组根据实验流程（见图1），采用 Microsoft Excel 软件将60只实验大鼠进行随机分

图 2：正常组与睡眠剥夺模型组大鼠睡眠-觉醒时间观察对比（验指标rris水迷宫法对各组大鼠的认知功能进行连续4天的测试评估探索实验等项目。结果发现在定位航行实验中，经过4天的连

长春中医药大学 2019 届硕士学位论文21空间参考学习与记忆的改善效应优于单穴，其次为神门穴与百会穴（表4，图3）。空间探索实验结果显示，模型组大鼠穿越隐匿性平台原位置的次数明显减少（p＜0.05），提示失眠使大鼠的工作记忆能力即记忆储存与提取再现能力明显降低。与模型组相比，百会组、三阴交组和配穴组穿越隐匿性平台的次数明显增多（p＜0.05），而配伍组的次数明显多于神门组、百会组和三阴交组，与三阴交穴组的差异有统计学意义（p＜0.05），提示针刺单穴神门、百会和三穴配伍均显著改善了失眠大鼠空间工作记忆能力，其中配伍组改善效果最佳， 其次为神门穴、百会穴

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本文编号：2822513