云南春燥环境对小鼠表征及气道相关蛋白影响的实验研究

发布时间：2020-10-02 10:38

　　 目的:通过观察云南春燥环境下实验小鼠表征、肺脏器指数、气管及肺组织形态,以及气道黏蛋白MUC5ac、纤毛蛋白DPCD含量的变化,分析、探究上述各项指标与中医“燥胜则干”理论的相关性。从宏观和微观、结构及功能多维度探讨云南春燥环境对小鼠产生的影响,在一定程度上反证云南春燥动物模型的准确性、可靠性,为进一步开展云南春燥实验研究提供新的模型及评价指标。方法:将30只昆明种雄性小鼠随机分为正常组、模型组及桑杏汤组,每组10只,于云南中医药大学动物房进行饲养与造模。正常组小鼠设置常温常湿气候环境,普通饲料喂养;模型组和桑杏汤组小鼠设置春燥气候环境进行干预,以特制辛辣香燥饲料喂养;桑杏汤组小鼠于施加因素第一天起开始,每天上午九点进行桑杏汤灌胃,正常组小鼠和模型组小鼠不灌胃。每天观察记录小鼠体重、饮食、饮水及活动状况,饲养至第14日,小鼠出现被毛枯槁、分叉,爪甲干瘦,尿色发黄等干燥症状,且打斗撕咬痕迹明显,于第15日进行实验取材。观察各组小鼠气管、肺组织形态,以及检测各组小鼠气道黏蛋白MUC5ac、纤毛蛋白DPCD含量的变化。结果:1.实验小鼠表征变化正常组小鼠饲养期间精神状态良好,少见打斗、撕咬痕迹,爪甲色泽红润鲜明,皮毛顺滑,无枯槁分叉,尿液质清透明;模型组小鼠相比正常组,自干预因素施加日起,逐渐出现精神烦躁,可见清晰打斗、撕咬痕迹,尾部血痕日益明显,爪甲紫红无光泽偏瘦,皮毛干枯,有分叉现象,尿液颜色黄等;桑杏汤组小鼠与模型组相比,精神状态尚可,尾部出现少量抓痕,爪甲色红缺乏光泽,皮毛色泽润泽,偶有分叉,尿液普遍微黄。正常组小鼠饮食饮水正常,起伏平稳。与正常组相比,模型组小鼠饮食量减少(P0.05),饮水量明显增多(P0.01);桑杏汤组小鼠饮食及饮水量虽有变化,但差异均不具统计学意义(P0.05)。与模型组相比,桑杏汤组小鼠饮食量增加(P0.05),饮水量减少(P0.05)。2.实验小鼠肺脏器指数及气管、肺组织形态变化与正常组相比,模型组小鼠肺脏器指数明显降低(P0.01),桑杏汤组小鼠肺脏器指数比正常组有所降低,但不具统计学意义(P0.05);与模型组相比,桑杏汤组小鼠肺脏器指数升高(P0.05)。正常组小鼠气管,镜下见管腔形态规则,黏膜层表面完整,纤毛排列有序整齐;肺组织镜下见结构清晰,肺泡壁完整,无增生,未见水肿、充血现象。模型组小鼠气管,镜下见黏膜层局部出现损伤,纤毛出现明显脱落、缺失,黏膜下层偶见炎性细胞,血管壁可见轻微扩张、充血;肺组织镜下见支气管壁增厚,支气管黏膜层纤毛排列不齐,毛细血管略微扩张,肺泡壁间质出现明显充血淤血。桑杏汤组小鼠气管,镜下见管腔形态较规则,黏膜层较为完整,纤毛排列整齐,偶见缺失;肺组织镜下见气道结构清晰,支气管形态规则,毛细血管壁轻微增厚,肺泡壁间质存在轻度充血现象。3.实验小鼠气道黏蛋白MUC5ac含量变化相比于正常组,模型组实验小鼠MUC5ac含量减少明显(P0.01);桑杏汤组小鼠MUC5ac含量虽有所变化,但差异不具有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,桑杏汤组实验小鼠MUC5ac含量升高(P0.05)。4.实验小鼠气道纤毛蛋白DPCD含量变化与正常组相比,模型组小鼠蛋白含量明显减少,桑杏汤组小鼠DPCD与正常组比较含量较少,与模型组相比明显增多。小鼠气道纤毛蛋白DPCD含量由高到低分别为正常组桑杏汤组模型组。结论:1.云南春燥环境下,小鼠出现一系列干燥症状,如小鼠饮食量下降,饮水量明显增多。同时小鼠气管、肺组织结构受到一定程度损伤,说明云南春燥环境对小鼠生理功能及组织结构方面均有一定影响。2.在治燥经方桑杏汤的干预下,小鼠各项表征、气管及肺组织结构得到不同程度改善,根据“以方测证”原则,初步反证本实验动物模型具备云南春燥证的基本特征。3.在云南春燥环境干预下,小鼠气道黏蛋白MUC5ac、纤毛蛋白DPCD含量明显降低,经桑杏汤干预后,含量均有所升高。说明云南春燥环境对小鼠气道“纤毛-黏液毯”防御屏障有一定影响,MUC5ac和DPCD可考虑作为云南春燥动物模型评价指标进行进一步探究。
【学位单位】：云南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R228;R-332
【部分图文】：

图 1正常组 图 2 模型组 图 3桑杏汤组4.2 各组实验小鼠饮食、饮水变化（1）饮食量：各组小鼠每日每 10g 体重饮食量，正常组自饲养之日起至第十四天无较大波动，模型组小鼠每日饮食量逐渐减少，于第五天及第十二天到达最低值，桑杏汤组小鼠日常饮食偶有波动，整体起伏保持平衡。（详见图 4）与正常组相比，模型组每 10g 体重小鼠饮食量有明显减少（P<0.05）,桑杏汤组小鼠每 10g 体重饮食量虽有所变化，但差异不具统计学意义（P>0.05）；与模型组相比，桑杏汤组每 10g 小鼠体重饮食量相对增加且差异具有统计学意义（P<0.05）。（详见表 2，图 6）2.53量（g）

图 1正常组 图 2 模型组 图 3桑杏汤组4.2 各组实验小鼠饮食、饮水变化（1）饮食量：各组小鼠每日每 10g 体重饮食量，正常组自饲养之日起至第十四天无较大波动，模型组小鼠每日饮食量逐渐减少，于第五天及第十二天到达最低值，桑杏汤组小鼠日常饮食偶有波动，整体起伏保持平衡。（详见图 4）与正常组相比，模型组每 10g 体重小鼠饮食量有明显减少（P<0.05）,桑杏汤组小鼠每 10g 体重饮食量虽有所变化，但差异不具统计学意义（P>0.05）；与模型组相比，桑杏汤组每 10g 小鼠体重饮食量相对增加且差异具有统计学意义（P<0.05）。（详见表 2，图 6）2.53量（g）

图 1正常组 图 2 模型组 图 3桑杏汤组4.2 各组实验小鼠饮食、饮水变化（1）饮食量：各组小鼠每日每 10g 体重饮食量，正常组自饲养之日起至第十四天无较大波动，模型组小鼠每日饮食量逐渐减少，于第五天及第十二天到达最低值，桑杏汤组小鼠日常饮食偶有波动，整体起伏保持平衡。（详见图 4）与正常组相比，模型组每 10g 体重小鼠饮食量有明显减少（P<0.05）,桑杏汤组小鼠每 10g 体重饮食量虽有所变化，但差异不具统计学意义（P>0.05）；与模型组相比，桑杏汤组每 10g 小鼠体重饮食量相对增加且差异具有统计学意义（P<0.05）。（详见表 2，图 6）2.53量（g）

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本文编号：2832303