火针对兔膝骨关节炎血清中MMP-3、MMP-13及关节软骨中β-catenin表达的影响

发布时间：2020-10-14 10:33

　　 目的观察火针针刺犊鼻、内膝眼两穴对兔膝骨性关节炎模型血清中MMP-3、MMP-13及关节软骨中β-catenin表达的影响,以此初步探讨火针治疗KOA的疗效和作用机理,以及Wnt/β-catenin信号通路与其下游相关因子MMP-3、MMP-13之间的关系。方法40只日本大耳白兔随机分为空白组、模型组、毫针对照组和火针治疗组,每组10只。除空白组外,其余3组均运用Videman法建立兔KOA模型。造模成功后,毫针对照组每日予常规毫针针刺犊鼻、内膝眼、梁丘、血海治疗,火针治疗组隔1日予火针刺激犊鼻、内膝眼治疗,空白组和模型组不干预。治疗2周后,用酶联免疫法检测血清中MMP-3、MMP-13的浓度,处死实验兔,观察右膝关节软骨情况,切取膝关节软骨做标本,用于HE染色和免疫组化检测软骨中β-catenin的浓度。实验数据使用IBM SPSS Statistics 22.0和Graph Pad Prism 6.0进行统计分析。结果1.观察膝关节情况:(1)空白组兔膝关节正常,无肿胀、粘连,软骨光滑明亮完整。(2)模型组兔膝关节肿胀明显、多处粘连,软骨粗糙无光泽,部分软骨变薄,严重者有明显缺损和裂隙。(3)毫针对照组和火针治疗组,两组之间肉眼观察无明显差异,但情况均优于模型组,膝关节肿胀及粘连者较少,软骨呈浅白色,表面完整程度明显较模型组好,关节边缘较整齐。2.关节软骨HE染色结果及光镜下Mankin’s评分:(1)空白组软骨细胞排列均匀,形态呈正常的圆形,细胞核染色均匀,基质无失染。(2)模型组软骨细胞数目明显减少、排列紊乱、分布不均,可见细胞成簇出现,软骨细胞固缩坏死严重,空泡多。(3)毫针对照组和火针治疗组软骨细胞分布较模型组均匀、排列尚整齐,偶可见细胞成簇出现,软骨细胞基本正常,偶有软骨细胞固缩坏死或空泡,整体情况较模型组好。(4)Mankin’s评分显示模型组评分较空白组显著升高(P0.01),毫针对照组、火针治疗组评分较空白组高(P0.01),但显著低于模型组(P0.01),毫针对照组和火针治疗组相较差异无统计学意义(P0.05)。3.血清中MMP-3、MMP-13的浓度:模型组浓度较空白组显著升高(P0.01),毫针对照组、火针治疗组浓度较空白组高(P0.01),但显著低于模型组(P0.01),火针治疗组相较于毫针对照组差异无统计学意义(P0.05)。4.关节软骨中β-catenin的表达情况:模型组阳性表达率较空白组显著升高(P0.01),毫针对照组、火针治疗组阳性表达率较空白组高(P0.05),但显著低于模型组(P0.01),火针治疗组相较于毫针对照组差异无统计学意义(P0.05)。结论1.火针针刺治疗膝骨性关节炎效果明确,相较于毫针治疗火针治疗取穴少、治疗次数少,在患者的依存性和连续治疗性上相对更有优势,这也为火针治疗KOA的临床运用提供了依据。2.火针治疗可以降低血清中MMP-3、MMP-13的浓度且降低软骨中β-catenin的表达,其机制可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,减少其下游MMP-3、MMP-13的表达,从而解缓膝关节退行性病变的进程。
【学位单位】：内蒙古医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R245.316
【部分图文】：

细胞形态正常，呈圆形，胞质均匀，细胞核清晰染色均匀，基质染色无失②模型组：兔膝关节软骨细胞数目明显减少、排列紊乱、分布不均，可出现，软骨细胞固缩坏死严重，空泡多。③毫针对照组和火针治疗组：兔膝关节软骨细胞分布较模型组均匀、排列可见细胞成簇出现，软骨细胞基本正常，偶有软骨细胞固缩坏死，偶见空况较模型组好很多。（见图 1）2.2 根据 Mankin’s 评分表评分结果根据 Mankin’s 评分表对各组实验兔膝关节软骨进行评分，结果显示：评分相比较，模型组评分显著升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；毫针针治疗组评分升高，差异有统计学意义（P＜0.01）。②与模型组评分相比照组评分显著降低，差异有统计学意义（P＜0.01）；火针治疗组的评分显异有统计学意义（P＜0.01）。③与毫针对照组评分相比较，差异无统计学0.05）。（见表 1，图 2）

表 1 各组实验兔膝关节软骨 Mankin's 评分结果（ x±S）组别 样本数（n） Mankin's 评分空白组 8 0.75±0.25模型组 8 8.25±0.45*毫针对照组 8 3.13±0.35*#火针治疗组 8 3.38±0.38*#注：“*”表示与空白组相较 P＜0.01；“#”表示与模型组相较 P＜0.01

MP-3、MMP-13 的浓度相比较，模型组浓度显著升高，差异有统计学意义（P＜0.01）针对照组和火针治疗组浓度升高，差异有统计学意义（P＜0.01）。②与模型组兔血中 MMP-3、MMP-13 的浓度相比较，毫针对照组浓度显著降低，差异有统计学意义（0.01）。火针治疗组的浓度显著降低，差异有统计学意义（P＜0.01）。③毫针对照与火针治疗组兔血清中 MMP-3、MMP-13 的浓度相比较，差异无统计学意义（P＞0.05）见表 2，图 3、4）表 2 各组实验兔血清中 MMP-3、MMP-13 浓度（ x±S）分组 n MMP-3(ng/ml) MMP-13(ng/ml)空白组 8 7.03±0.53 22.06±1.49模型组 8 10.38±0.62*35.98±0.63*毫针对照组 8 8.27±0.47*#27.02±0.97*#火针治疗组 8 8.00±0.25*#26.94±1.43*#：“*”表示与空白组相较 P＜0.01；“#”表示与模型组相较 P＜0.01
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本文编号：2840555