悬针疗法刺激肾俞穴对慢性肾衰模型大鼠干预作用的探究

发布时间：2020-10-24 12:24

　　 慢性肾功能衰竭(chronic renal failure,CRF)起病缓慢,病程长,进展难以逆转,并发症多样,治疗困难,医疗费用昂贵,已经成为严重危害人民健康和生命的常见病。因此,增加有关慢性肾衰竭的研究,丰富治疗手段,对于延缓疾病进程和提高患者生活品质具有重要意义。悬针疗法是将中医气功与针刺相结合而创新形成的一种独特疗法,具有无痛、无创、不受禁刺或慎刺限制等优点。本研究采用悬针疗法刺激大鼠“肾俞”穴,观察悬针疗法对于大鼠肾脏功能、贫血损害及肾间质纤维化相关因子的影响,探究悬针疗法对慢性肾衰的防治作用。目的本实验以腺嘌呤灌胃法建立的慢性肾衰模型大鼠作为研究对象,尿毒清颗粒作为阳性对照组,“肾俞”穴为治疗穴位,在造模开始的同时对大鼠使用悬针疗法进行治疗。观察悬针疗法对大鼠红细胞计数(RBC)、红细胞压积(HCT)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)、血磷(P3+)、血磷(Ca2+)、血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad7和大鼠肾脏病理组织形态学的影响,以探究悬针疗法对慢性肾衰模型大鼠的防治作用,探讨悬针疗法延缓模型大鼠慢性肾衰竭进展的可能机制。方法使用随机数字表法将40只清洁级SD大鼠分为正常组、模型组、药物组和悬针组,每组10只大鼠。将腺嘌呤与蒸馏水混合制成0.25%的腺嘌呤混悬液,按照200mg/kg/d的剂量每日对正常组之外的大鼠进行灌胃,连续28天;药物组每日上午腺嘌呤混悬液灌胃,下午将尿毒清颗粒溶于蒸馏水制成2.25%溶液,按照2.2g/kg/d的剂量进行灌胃,其余组灌胃同等剂量蒸馏水;悬针组每日上午腺嘌呤混悬液灌胃,下午进行悬针治疗30分钟。每周称量各组大鼠体重,实验结束后,使用全自动生化分析仪分别检测大鼠全血RBC、HCT、Hb、PLT,血清P3+、Ca2+、Scr、BUN,免疫组织化学法检测大鼠肾组织的TGF-β1和Smad7表达,取肾称取湿重,肾脏组织进行石蜡切片后做常规HE染色和Masson染色,观察病理形态学变化。结果1体重及肾重情况:自第2周开始,模型组、药物组及悬针组大鼠与正常组大鼠体重出现显著差异(P0.05),悬针组大鼠的体重除第3周外均明显高于模型组大鼠(P0.05);与正常组相比,模型组大鼠的肾脏体重比显著提高(P0.05),悬针组相对模型组显著降低(P0.05),悬针组与药物组相较无显著差异(P0.05)。2全血RBC、HCT、Hb情况:与正常组相比,模型组大鼠的RBC、Hb、HCT均显著降低(P0.05)。与模型组相比,悬针组的RBC、Hb、HCT均显著提高(P0.05),悬针组与药物组相较均无显著差异(P0.05)。3血清P3+、Ca2+情况:与正常组相比,模型组大鼠血清P3+含量显著提高(P0.05),Ca2+含量显著降低(P0.05)。悬针组大鼠的P3+含量显著降低(P0.05),Ca2+含量显著升高(P0.05),悬针组与药物组相较均无显著差异(P0.05)。4TGF-β1表达情况:与正常组相比,模型组大鼠肾组织中TGF-β1的AOD明显升高(P0.01)。与模型组相比,悬针组大鼠的TGF-β1表达明显降低(P0.01),悬针组与药物组相较均无显著差异(P0.05)。5血清Scr、Bun情况:与正常组相比,模型组大鼠血清Scr、Bun含量显著提高(P0.05),悬针组大鼠的Scr、Bun显著降低(P0.05),悬针组与药物组相较均无显著差异(P0.05)。6 HE染色切片情况:正常组大鼠肾脏结构完整,肾小球未见萎缩,肾小管、集合管未见扩张或萎缩,无纤维组织增生和炎细胞浸润。模型组大鼠肾小管黄绿色结晶沉积及肉芽肿形成、肾小管扩张、肾小管变性/坏死、间质炎细胞浸润及间质纤维化。药物组大鼠肾脏肉芽肿形成病变程度无明显减轻,其余病变均略有减轻趋势。悬针组大鼠肾小管扩张、肾小管变性/坏死等病变均有减轻趋势。7Masson染色切片情况:正常组大鼠肾脏除血管周围有胶原纤维呈深蓝色染色,组织内无明显蓝色着色。模型组大鼠除血管周围有胶原纤维呈深蓝色染色外,可见广泛的间质增宽,呈淡蓝色着色,此为间质纤维化特殊染色表现,其中散在局灶性增生的深蓝色胶原纤维着色。药物组组织内局灶性胶原纤维的增生程度略有减轻,肾间质纤维化程度有减轻趋势。悬针组局灶性胶原纤维的增生程度略有减轻,肾间质纤维化程度有减轻趋势。结论1悬针疗法对腺嘌呤灌胃模型大鼠肾脏具有一定的保护作用。其一,悬针疗法能够提高模型大鼠体重增长的速度和幅度;其二,悬针疗法能够降低模型大鼠的肾重体重比,降低肾脏肥大指数;其三,通过病理切片可以看出悬针疗法能够改善模型大鼠肾脏病理形态,减轻肾小管结晶沉积、肾小管扩张、肾小管变性/坏死及间质纤维化病变。2悬针疗法能够有效提高RBC、HCT、Hb的含量,提示悬针能够改善肾性贫血状态,改善肾脏血供。3悬针疗法能够有效降低P3+的含量并提高Ca2+的含量,调整高磷低钙的病理状态,改善钙磷代谢,降低肾性骨病、心血管疾病等并发症的发生风险。4悬针疗法可以有效减少TGF-β1在肾脏的表达,减少细胞外基质的沉积,延缓肾间质纤维化。5悬针疗法能够有效降低Scr和BUN的含量,提高肾脏功能。6悬针疗法对于慢性肾衰竭具有一定程度的防治作用,机制可能为通过调节肾小管和间质局部血液的供给,改善肾脏微循环,改善钙磷代谢,促使肾脏中TGF-β1的表达较减少,减轻肾间质纤维化,使血氧供给的增加与间质纤维化的减轻形成良性循环,最终增强肾脏功能,改善患者生活质量。
【学位单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R245;R-332
【部分图文】：

外的大鼠体重开始与正常组大鼠出现差异（Ｐ＜〇．〇５），悬针组大鼠的体重除第３周外均??明显高于模型组大鼠（Ｐ＜０．０５）。此外，体重增幅方面，悬针组大鼠增长最为明显（尸＜０．０５）。??（见表１，表２，图１，图２）??表１各组大鼠体重变化的比较（Ｚ±ｓ）??组别?数量?初始?第一周?第二周?第三周?第四周??正常组?１０?１７７．２０±７．?１３?２５３．３０±１２．０８?３０３．７０±１９．０６?３２７．２０±２２．３４?３６６．?１０±２７．９６??模型组?１０?１７５．?３０±６．?７５?２２１．００±１Ｌ９８＊?２４６．?８０±?１６．?９３＊?２６１．?７０±２２．?０７＊?２７１．９０±２６．?５４＊??药物组?１０?１７６．７０?土?８．０４?２３０．４０±１１．５１＊?２５８．?００?士?１２．?０７＊?２７１．?００±１６．?１０＊?２８４．?５０±?１２．?７０＊??悬针组?１０?１８１．７０±８．５９?２３５．?１０±１２．７８°?２６５．７０±２１．０６°?２７６．?１０±２１．８４?３００．５０±３２．３０ｓ??注：与正常组相比，＞＜０．０５；与模型组相比，＞＜０．?０５。??４Ｗ?＾??４００?－?嶋繪??ｔＳ第一爾??＊?ｓ?絞第二爾??ｒｌｒｉｌｉ?＝??．—邏ＩＩ?ｍ??正常组?模型經?纖组?悬针组??图１各组大鼠体重变化趋势??注：与正常组相比

与正常组相比，模型组大鼠的肾脏指数显著提高（户＜〇．〇５）。与模型组相比，悬针??组的肾脏指数显著降低（Ｐ＜〇．〇５）。悬针组与药物组相较无显著差异（Ｔ＾Ｏ．Ｏ〗）。说明悬??针疗法能够抑制肾脏肥大，具有降低肾脏肥胖指数的作用。（见表２，图３）??！：Ｊｌｌ??正常组?镆型组?药物ｍ?悬针组??图３各组大鼠肾脏体重比的比较??４５??

图５各组大鼠Ｓｍａｄ７积分光密度值的比较??注：与正常组相比，＞＜０．０５；与模型组相比，＞＜０．０５??７各组大鼠血清Ｓｃｒ、Ｂｕｎ检测结果??与正常组相比，模型组大鼠血清Ｓｃｒ、Ｂｕｎ含量显著提高（Ｓｃｒ、Ｂｕｎ显著降低（Ｐ＜０．０５）。悬针组与药物组相较均无显著差１４０?＊??Ｉ?＿?＝＝??Ｉ：?Ｉ?１?（??：■?１?Ｍ?Ｍ??正常组模型组药物组悬针组??
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本文编号：2854461