海马NMDAR亚单位在电针胃俞募配穴调节胃运动中的分子机制研究

发布时间：2020-10-30 03:54

　　 目的本研究以胃俞募配穴调节功能性消化不良(Functional dyspepsia,FD)大鼠胃运动的中枢作用靶点和分子机制为切入点,通过观察电针对FD模型大鼠胃运动、原癌基因c-fos的表达的影响、海马区谷氨酸含量及N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚单位表达的变化,探讨海马参与电针胃俞募配穴调节FD模型大鼠胃运动协同效应的中枢作用靶点和分子机制。方法健康成年清洁级Sprague-Dawley(SD)大鼠被随机分成正常组、模型组、中脘组、胃俞组、中脘加胃俞组、非经非穴组共6组,每组14只。除正常组大鼠外,其余各组FD大鼠模型均采用适度夹尾激怒法和不规则喂养法两种经典方法联合应用建立。胃俞组、中脘组、中脘+胃俞组、非经非穴组分别选取相应穴位进行电针干预,正常组与模型组不施加任何干预措施,模型组仅抓取固定。采用应力传感器记录各组大鼠胃部的胃运动波形,免疫组织化学染色法检测各组大鼠海马区原癌基因c-fos的表达;比色法检测大鼠海马神经递质Glu含量表达;Western blot法(WB)及免疫组织化学染色法检测各组大鼠海马NMDA受体亚基NR1、NR2A、NR2B的表达。结果1.FD模型评价实验前,各组大鼠精神状态良好,皮毛洁白光泽,灵敏好动,造模时激怒全笼大鼠后,即刻引发各个大鼠间的相互撕打,撕打时,大鼠的前肢会抬高并离开地面,不停地发出“呼呼”的怒叫,二十分钟笼内大鼠始终保持着愤怒状态。连续造模14天后,观察到大鼠出现体瘦,便溏,可嗅到笼内有秽臭,神疲倦怠,撕打减弱,大鼠皮毛变的暗淡枯黄、不顺,容易发怒且伴随有紧张、焦虑抑郁等表现。检测正常组与模型组大鼠胃运动,发现模型组大鼠胃运动的收缩幅度较正常组显著下降,差异有统计学意义。2.电针胃俞募穴对大鼠胃运动的影响与正常组相比较,模型组大鼠胃运动幅值降低(P0.05);与模型组比较,中脘组、胃俞组、中脘+胃俞组胃运动幅值增高(均P0.05),非经非穴组无显著性差异;与中脘组、胃俞组比较,中脘+胃俞组胃运动幅值增高(P0.05)。正常组、模型组和电针组间胃运动收缩频率比较无显著性差异。3.电针胃俞募穴对大鼠海马区c-fos表达影响与模型组相比较,除非经非穴组外,电针后各组海马区Fos阳性细胞的表达均明显增加(P0.05);且胃俞募配穴组与中脘组、胃俞组比较,海马区Fos阳性细胞表达上调显著(P0.05)。两单穴组之间比较,差异无显著性差异。4.电针胃俞募穴对大鼠海马区神经递质Glu表达影响与正常组相比较,模型组大鼠海马区的神经递质Glu表达上升(P0.05);与模型组比较,中脘组、胃俞组、中脘+胃俞组大鼠Glu表达下降(均P0.05),非经非穴组无明显差异;与两个单穴组相比,俞募配穴组Glu表达更低(P0.05)。5.电针胃俞募穴对大鼠海马区NR1、NR2A、NR2B表达影响与正常组相比较,模型组海马区NR1、NR2B表达量增高(P0.05),NR2A表达量下降(P0.05);与模型组相比较,电针中脘组、胃俞组、中脘+胃俞组大鼠海马NR1、NR2B表达量下降(P0.05),NR2A表达量增高(P0.05),非经非穴组无显著性差异;与两个单穴组相比较,俞募配穴组大鼠海马NR1、NR2B表达较低(P0.05),NR2A表达较高(P0.05)。结论1.胃俞、募穴的针刺信息在边缘系统海马汇聚。2.胃俞、募穴的信息上传至海马后,通过影响海马Glu含量调控NMDA受体达到调节胃运动的作用。
【学位单位】：安徽中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R245
【部分图文】：

亚单位在电针胃俞募配穴调节胃运动中的分子机制研究 17图1 电针干预后各组大鼠胃运动收缩波形影响（ x±s，n=7）Fig.1 Effect of EA on contraction waveform of gastric antral motility in rats（ x±s，n=7）

3)P＜0.05。图2 电针干预后各组大鼠胃运动幅值比较（ x±s，n=7）Fig.2 Effect of EA on the amplitude of gastric antral motility in rats（ x±s，n=7）图3 电针干预后各组对大鼠胃运动频率比较（ x±s，n=7）Fig.3 Effect of EA on the frequency of gastric antral motility in rats（ x±s，n=7）3.3 电针胃俞募穴对大鼠海马区 c-fos 表达影响为确定电针胃俞募穴的信息是否会上传至大鼠海马，使用免疫组织化学方法

图2 电针干预后各组大鼠胃运动幅值比较（ x±s，n=7）Fig.2 Effect of EA on the amplitude of gastric antral motility in rats（ x±s，n=7）图3 电针干预后各组对大鼠胃运动频率比较（ x±s，n=7）Fig.3 Effect of EA on the frequency of gastric antral motility in rats（ x±s，n=7）3.3 电针胃俞募穴对大鼠海马区 c-fos 表达影响为确定电针胃俞募穴的信息是否会上传至大鼠海马，使用免疫组织化学方法
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本文编号：2861950