目的:在前期实验证实电针足少阳经穴对正常SD大鼠脂代谢有影响的基础上[1],通过观察电针足少阳经穴后正常大鼠血清瘦素(serum leptin)、血糖(blood glucose)、血脂(blood lipid)、胰岛素(insulin)的变化及下丘脑瘦素受体(ob-R)、磷酸化细胞信号传导与转录活化因子3(P-stat3)的变化,从外周及中枢神经系统(CNS)两个部分,探索电针足少阳经穴改善正常大鼠脂代谢,降低其体脂的原因,深入分析“少阳主骨”理论中骨与脂的关系,为电针足少阳经穴改善个体骨脂代谢,甚至预防及治疗肥胖症提供更多的科学的实验依据。方法:1、动物分组:SPF级SD大鼠60只,雌雄各半,随机分为雌性电针足少阳经穴组、雄性电针足少阳经穴组(简称雌性电针组、雄性电针组)、雌性对照组、雄性对照组、雌性空白组、雄性空白组共6组,每组10只。2、干预方法:电针组绑扎后予电针足少阳经穴治疗,取环跳穴、悬钟穴、阳陵泉穴;对照组绑扎同电针组,但不予电针治疗;空白组不予任何刺激。3、检测方法:3.1一般情况观察:每日同一时间测量大鼠体重、饮食量、饮水量,并观察其毛色状态、精神状态、大便情况。3.2体内脂肪观察:分离大鼠腹腔内脂肪、称重,计算腹腔内脂肪重量/体重的比值;将大鼠去毛、去头、去内脏,按照公式计算其皮下脂肪及比重。3.3血清学指标检测:分别于实验的第5天、12天、19天、26天,剪大鼠尾部,取血约1ml,分离血清,用于检测血清瘦素;实验结束后,麻醉大鼠,从腹主动脉取血约8ml,分离血清,用于检测甘油三酯(TG)、胆固醇(cholesterol)、血糖、胰岛素。3.4下丘脑ob-R及P-stat3检测:打开大鼠头部,取出完整脑组织置于冰面上,在冰面上迅速分离下丘脑,立即置于-80℃冰箱内保存,用免疫组化冰冻切片的方法观察并比较大鼠下丘脑ob-R和P-stat3蛋白含量的变化。结果:1、一般情况比较:实验过程中电针组大鼠毛色光泽、柔顺,行为无异常,情绪稳定,绑扎及电针治疗时较温顺,大便成形;对照组大鼠毛色稍黯淡、杂乱,行为无异常,但绑扎时抗拒明显、情绪暴躁,大便时溏;空白组大鼠大便偶溏,余无异常。2、体重、饮食量、饮水量比较:体重:同性别组间比较,大鼠体重未见明显差异(P0.05);饮食量:与雌性空白组比较,雌性对照组大鼠饮食量降低(P0.05),余同性别组间比较,大鼠饮食量未见明显差异(P0.05);饮水量:与雄性空白组比较,雄性电针组大鼠饮水量增加(P0.05),余同性别组间比较,大鼠饮水量未见明显差异(P0.05)。3、腹腔内脂肪、皮下脂肪、比重比较:腹腔内脂肪:与对照组及空白组比较,电针组大鼠腹腔内脂肪明显降低(P0.01);对照组与空白组比较,大鼠腹腔内脂肪未见明显差异(P0.05)。皮下脂肪及比重:雌性:与空白组比较,电针组大鼠皮下脂肪明显降低(P0.01),比重明显升高(P0.01);与对照组比较,电针组大鼠皮下脂肪及比重均未见明显差异(P0.05);对照组与空白组比较,对照组大鼠皮下脂肪明显降低(P0.01),比重明显升高(P0.01)。雄性:与对照组及空白组比较,电针组大鼠皮下脂肪明显降低(P0.01),比重明显升高(P0.01);对照组与空白组比较,大鼠皮下脂肪及比重均未见明显差异(P0.05)。4、血清瘦素浓度比较:4.1组间比较:实验4周后,与空白组比较,对照组大鼠血清瘦素浓度未见明显差异(P0.05);电针组大鼠血清瘦素浓度降低(P0.05);与对照组比较,电针组大鼠血清瘦素浓度降低(P0.05)。4.2组内比较:电针组:第1周、2周、3周、4周大鼠血清瘦素浓度未见明显差异(P0.05)。对照组:与第1周比较,第2周、3周大鼠血清瘦素浓度未见明显差异(P0.05),第4周大鼠血清瘦素浓度升高(P0.05)。空白组:第1周、2周、3周、4周大鼠血清瘦素浓度未见明显差异(P0.05)。5、血糖、甘油三酯、胆固醇比较:5.1血糖:与空白组比较,对照组大鼠血糖升高(P0.05),电针组大鼠血糖未见明显差异(P0.05);与对照组比较,电针组大鼠血糖降低(P0.05)。5.2甘油三酯:与空白组比较,对照组大鼠甘油三酯未见明显差异(P0.05),电针组大鼠甘油三酯降低(P0.05);与对照组比较,电针组大鼠甘油三酯降低(P0.05)。5.3胆固醇:与空白组比较,对照组大鼠胆固醇未见明显差异(P0.05),电针组大鼠胆固醇升高(P0.05);与对照组比较,电针组大鼠胆固醇升高(P0.05)。6、下丘脑ob-R比较:与空白组比较,对照组大鼠下丘脑ob-R蛋白含量未见明显差异(P0.05),电针组大鼠ob-R蛋白含量升高(P0.05);与对照组比较,电针组大鼠下丘脑ob-R蛋白含量升高(P0.05)。7、下丘脑P-stat3比较:与空白组比较,对照组大鼠下丘脑P-stat3蛋白含量升高(P0.05),电针组大鼠下丘脑P-stat3蛋白含量升高(P0.05);与对照组比较,电针组大鼠下丘脑P-stat3蛋白含量升高(P0.05)。结论:1、基于“少阳主骨”理论、“骨脂”关系,电针足少阳经穴能够影响正常大鼠的脂代谢,降低正常大鼠的体脂,包括皮下脂肪或腹腔内脂肪,同时提高正常大鼠的体比重,但尚不能证实对大鼠的体重、饮食量及饮水量有影响。2、26天电针足少阳经穴治疗,能够降低正常大鼠血清瘦素浓度,并维持其水平稳定,同时提高正常大鼠下丘脑ob-R及P-stat3蛋白含量,电针后大鼠脂代谢改善的原因可能与JAK2-STAT3信号通路激活有关。3、电针足少阳经穴能够降低正常大鼠甘油三酯,可能会升高正常大鼠胆固醇。4、绑扎可能会导致正常大鼠情绪波动,引起血糖升高,电针足少阳经穴能够降低血糖,使其恢复至正常水平,同时舒缓大鼠情绪,改善大鼠大便及毛色异常。
【学位单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R245
【部分图文】：
附录：实验图片图 1 电针穴位定位 图 2 冰面上分离大鼠下丘脑Positioning of electroacupuncture points Isolate the hypothalamus of the rat on ice
附录：实验图片图 1 电针穴位定位 图 2 冰面上分离大鼠下丘脑Positioning of electroacupuncture points Isolate the hypothalamus of the rat on ice
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2870870
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