瑶医富丁方对大鼠慢性非细菌性前列腺炎疗效及其机制的研究

发布时间：2020-11-20 19:38

　　 目的:观察瑶医富丁方对大鼠慢性非细菌性前列腺炎(CNP)一般情况、全血粘度、前列腺湿重与组织病理学改变及炎性细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8水平的变化和总p38MAPK、p-p38MAPK、MMP-9蛋白表达的影响,评价瑶医富丁方治疗实验性CNP的疗效并探讨其作用机理,为临床应用瑶医富丁方治疗CNP提供实验依据。方法:将60只成年雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、阳性组(盐酸坦洛新缓释片)、瑶医富丁方高、中、低剂量组,共6组,每组10只。正常组不做处理,其余各组大鼠均予腹腔注射10%水合氯醛0.3ml/100g麻醉后于无菌条件下行去势手术并术后第二天起于颈、背部多点皮下注射苯甲酸雌二醇0.25mg/Kg·30d,建立实验性CNP大鼠模型。验证造模成功后,给药干预。瑶医富丁方高、中、低剂量组灌胃给药合生药浓度分别为3.9667g/ml、1.9833g/ml、0.9917g/ml,阳性组给予盐酸坦洛新缓释片悬浮液浓度为0.0023mg/ml灌胃,各组大鼠均按1ml/100g体重进行灌胃,正常组与模型组给予等容量的生理盐水灌胃,1次/d,连续灌胃30d后取材检测。观测指标:(1)各组大鼠实验过程中宏观情况,如,精神状态、体重变化等;(2)各组大鼠全血粘度;(3)各组大鼠前列腺外观、前列腺湿重变化;(4)各组大鼠前列腺组织病理形态学变化;(5)Elisa法检测各组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-8水平;(6)Western blot法检测各组大鼠前列腺组织中总p38MAPK、p-p38MAPK、MMP-9蛋白表达。结果:(1)正常组大鼠整体状态良好,饮食正常、毛发光亮,其余各组大鼠从造模开始,饮食活动减少,毛发变粗糙,至造模结束体重与正常组大鼠相比,差异均具有统计学意义(p0.05)。给药干预后,各组大鼠整体情况好转,至实验结束时,各组大鼠体重均高于模型组,差异均具有统计学意义(p0.05);富丁方高剂量组体重与正常组相比,差异无统计学意义(p?0.05);阳性组、富丁方中、低剂量组大鼠体重均较正常组及富丁方高剂量组低(p0.05)。(2)正常组前列腺外观颜色红润、质软,与周围组织无粘连,模型组大鼠前列腺均有不同程度的萎缩变小,颜色暗红或灰白,质地较硬,与周围组织筋膜相粘连,阳性组及瑶医富丁方各组前列腺较模型组均有所改善,前列腺暗红色减轻或变淡红色,质地变软,与周围组织的粘连减轻,萎缩情况改善。前列腺湿重与正常组相比,模型组、阳性组、富丁方中、低剂量组均较低,差异具有统计学意义(p0.05),瑶医富丁方高剂量组与正常组相比,差异则无统计学意义(p?0.05);瑶医富丁方高、中剂量组前列腺湿重高于模型组(p0.05),阳性组、富丁方低剂量组前列腺湿重有所恢复,但较于模型组,差异无统计学意义(p?0.05);瑶医富丁方高剂量组前列腺湿重均高于阳性组及富丁方低剂量组(p0.05)。光镜下与模型组相比,瑶医富丁方能不同程度减轻各组大鼠前列腺组织病理形态学改变,减少间质纤维增生和炎细胞浸润,增加腺管管腔内分泌物,促进破坏前列腺组织细胞的修复。前列腺组织病理炎症等级评分,与正常组及富丁方高剂量组相比,模型组、阳性组、富丁方中、低剂量组炎症等级评分较高,差异具有统计学意义(p0.05),富丁方高剂量组与正常组相比(p?0.05);与模型组相比,阳性组、富丁方中剂量组炎症等级评分呈降低趋势,但差异无统计学意义(p_?0.05)。最后实验数据表明,富丁汤高剂量组改善CNP大鼠前列腺组织病变效果最好。(3)模型组大鼠各切变率全血粘度明显高于正常组,差异具有统计学意义(p0.05);与模型组相比,瑶医富丁方高、中剂量组能明显降低CNP大鼠各切变率全血粘稠度,差异具有统计学意义(p0.05),且瑶医富丁高剂量组效果更好;瑶医富丁方高剂量组低切变率全血粘稠度均较阳性组及瑶医富丁方低剂量组低(p0.05)。(4)与正常组相比,模型组、富丁方中、低剂量组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-8水平均较高(p0.05),阳性组、富丁方高剂量组TNF-α、IL-6水平均较高(p0.05);与模型组相比,阳性组、富丁方高剂量组TNF-α、IL-6、IL-8水平均较低(p0.05),富丁方中剂量组TNF-α、IL-8水平均较低(p0.05),富丁方低剂量组TNF-α、IL-6、IL-8水平呈降低趋势,但差异无统计学意义(p?0.05);与阳性组相比,富丁方高剂量组TNF-α水平降低(p0.05),富丁方低剂量组TNF-α、IL-8水平较高(p0.05);富丁方高剂组TNF-α、IL-6、IL-8水平较富丁方低剂量组低(p0.05),富丁方中剂量组TNF-α水平较富丁方低剂量组低(p0.05),富丁方高剂组TNF-α水平较富丁方中剂量组低(p0.05)。(5)与正常组相比,模型组大鼠前列腺组织中总p38MAPK、p-p38MAPK、MMP-9蛋白表达明显增加(p0.05),阳性组p-p38MAPK蛋白表达降低(p0.05)、MMP-9蛋白表达较高(p0.05),富丁方高剂量组总p38MAPK蛋白表达降低(p0.05),富丁方高、中剂量组p-p38MAPK蛋白表达较高(p0.05),富丁方低剂量组总p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达较高(p0.05);与模型组相比,阳性组、富丁方各剂量组总p38MAPK、p-p38MAPK、MMP-9蛋白表达均降低(p0.05);与阳性组相比,富丁方各剂量组p-p38MAPK蛋白表达均较高(p0.05),MMP-9蛋白表达均降低(p0.05),富丁方高剂量组总p38MAPK蛋白表达降低(p0.05);富丁方高剂量组总p38MAPK蛋白表达较富丁方低剂量组下降(p0.05)。结论:(1)瑶医富丁方能改善CNP大鼠的整体情况,减轻其病变程度,一定程度恢复前列腺湿重和分泌功能,减少前列腺组织炎性细胞浸润,促进受损前列腺组织的修复,表明瑶医富丁方对CNP大鼠具有较好的疗效。(2)瑶医富丁方对CNP的疗效机理可能为:(1)通过降低全血粘度改善前列腺局部微循环障碍,增强前列腺组织渗透性,提高血药浓度;(2)对机体具有免疫调节作用,通过免疫调节降低炎性细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8的水平;(3)通过P38MAPK信号通路抑制前列腺组织中总p38MAPK、p-p38MAPK、MMP-9的表达,进而改善炎症症状。
【学位单位】：广西中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R29
【部分图文】：

各组大鼠体重随时间变化趋势

各组前列腺解剖实物图

图 4. 瑶医富丁方对各组大鼠血清 TNF α 的影响。注：与正常组相比，#P<0.05，##P<0.01；与模型组与阳性对照组相比，△P<0.05，△△P<0.01；与富丁方高剂量与富丁方中剂量组相比，☆P<0.05，☆☆P<0.01。
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本文编号：2891897