反流性食管炎中医证型特点分析及通降颗粒治疗作用机制研究

发布时间：2017-06-15 12:00

  本文关键词：反流性食管炎中医证型特点分析及通降颗粒治疗作用机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：临床研究反流性食管炎的中医证型特点分析目的：探讨反流性食管炎中医证型的分布,为中医药对本病的治疗提供依据。方法：收集2010年10月至2015年12月,记录在中国中医科学院西苑医院脾胃科病房病例海泰系统2.0和3.0的符合纳排标准的反流性食管炎患者,将所得结果记录Microsoft Excel中,并使用SPSS17.0软件进行数据的录入、管理和统计。结果：1性别、年龄分布本次研究共纳入137份病例,其中男性69例(50.36%),女性68例(49.64%),男女比例接近1：1。最小年龄为25岁,最大为85岁,平均年龄为58.64±13.80岁。反流性食管炎的发病以老年(47.45%)最为多见,其次为中年(37.23%),青年(15.33%),没有出现少年。2病程分布本研究所纳入的137例患者中,病程最短为2月,最长为30年,平均病程为54.45±92.39月。其中,3月以下的有20人(14.60%),3月-1年的有42人(30.66%),1-5年和5-10年的分别有38人(27.74%)、20人(14.60%),10年以上的仅有17人(12.40%)。3中医证型分布本次研究纳入的137例患者,肝胃不和证(32.85%)最多,其次为肝胃郁热证(15.33%),脾虚湿热证(13.14%),寒热错杂证(10.95%),脾胃虚寒证(9.49%),痰气互结证(8.03%),瘀血阻络证(6.57%)与胃阴亏虚证(3.65%)较为少见。证型出现频率从高到低的顺序依次为：肝胃不和证肝胃郁热证脾虚湿热证寒热错杂证脾胃虚寒证痰气互结证瘀血阻络证胃阴亏虚证。4肝胃不和证患者的流行病学资料分布特点45例RE肝胃不和证患者中,男性17例,女性28例,男女比例为1：1.65。其中青年8人,男女均有4人；中年20人,男性5人、女性15人；老年17人,男性8人,女性9人。病程以3月-1年(35.56%)的最多,其它：1-5年(22.22%),3月以下(17.78%),5-10年(11.11%)及10年以上(13.33%)。结论：1本研究的反流性食管炎的中医证型中,肝胃不和证分布最多。2本研究中,肝胃不和证在RE患者中以中老年人居多,病程相对较长。实验研究通降颗粒对反流性食管炎肝胃不和证模型大鼠的治疗作用机制研究目的：观察通降颗粒对反流性食管炎肝胃不和证模型大鼠的治疗作用,探讨其抑酸和胃的疗效机制。方法：将105只6-8周龄SD大鼠,随机选出10只作为假手术组,其余动物采用食管十二指肠吻合术造模,并于术后第15天开始叠加夹尾刺激,持续7天,取3只大鼠食管作HE染色进行模型评价。将术后存活的70只大鼠随机分为模型组,通降颗粒高、中、低剂量组,奥美拉唑组,莫沙必利组,中药+奥美拉唑组,每组10只。按每10 ml·kg-1剂量给药,每只大鼠灌胃(通降颗粒或奥美拉唑或莫沙必利或蒸馏水)21天。在此过程中,分别于第7天、14天、21天观察并记录大鼠体重、进食量、饮水量、抓力等一般情况。给药观察后大鼠处死,进行胃液分析：测定胃液量、胃液酸度和胃蛋白酶活性,同时腹主动脉取血做ElISA检测,在冰上取食管组织(贲门上1cm),通过医学病理图像分析仪对食管进行摄像、分析,最后将食管分别放入福尔马林固定液或者液氮中固定。通过HE染色观察大鼠食管组织的病理学改变,并用透射电镜观察食管组织细胞间隙和桥粒数的变化,分别通过免疫组化、Western Blot方法检测食管组织IKKβ、NF-κB/p65、Cox-2的表达, PCR方法检测食管组织中NF-κB/p65 mRNA、Cox-2 mRNA的表达。结果：1大鼠一般情况给药2周后,与模型组相比,通降颗粒低剂量组的体重明显增加(p0.05),中药+奥美拉唑组的进食量明显增加(p0.05),各给药组饮水量均明显增加(p0.05),奥美拉唑组的抓力明显增加(p0.05)；给药3周后,与模型组相比,各用药组的体重、进食量、饮水量、抓力均明显增加(p0.05)。2胃液分析结果(1)胃液pH值与假手术组相比,模型组明显降低(p0.05)；与模型组相比,中药+奥美拉唑组、奥美拉唑组均明显升高(p0.05)；与奥美拉唑相比,高、低剂量组及莫沙必利组均明显降低(p0.05)。(2)总酸度与假手术组相比,模型组明显升高(p0.05)；与模型组相比,各用药组明显降低(p0.05)；与奥美拉唑组相比,高、低剂量组及莫沙必利组均明显升高(p0.05)。(3)总酸分泌量与假手术组相比,模型组明显升高(p0.05)；与模型组相比,除莫沙必利组的其它用药组均明显降低(p0.05)；与奥美拉唑组相比,高、低剂量组及莫沙必利组均明显升高(p0.05)。(4)胃蛋白酶与假手术组相比,模型组明显升高(p0.05)；与模型组相比,中、低剂量组明显升高(p0.05)；与奥美拉唑组相比,低剂量组明显升高(p0.05)。3食管形态病变与假手术组相比,模型组食管糜烂率明显增加(p0.05)；与模型组相比,各用药组糜烂率均明显降低(p0.05)；与奥美拉唑组相比,中药+奥美拉唑组糜烂率明显下降(p0.05)。4食管组织学形态病变(1)HE染色假手术组食管粘膜表面光滑：模型组有大量炎症细胞浸润,溃疡形成;高剂量组可见少量炎性细胞侵入基底层；中剂量组食管基底层不连续；低剂量组基底层出现断裂；莫沙必利组散在中性粒细胞、嗜酸性粒细胞；奥美拉唑组食管基底层增厚；中药+奥美拉唑组血管充血、水肿。(2)透射电镜与假手术组相比,模型组桥粒数明显减少、细胞间隙明显增宽(p0.01)；与模型组相比,各用药组桥粒数明显增多,细胞间隙明显减小(p0.01)；与奥美拉唑组相比,中药+奥美拉唑组细胞间隙明显减小、桥粒数明显增多(p0.05),高、低剂量组及莫沙必利组细胞间隙明显增加、桥粒数明显减少(p0.05)。5食管组织NFKβ、NF-κB/p65、Cox-2的表达(1)免疫组化结果假手术组大鼠食管粘膜上皮基底层细胞均为阴性；模型组中表达最强；各用药组阳性细胞明显较少,且多为弱阳性,其中奥美拉唑组、中药+奥美拉唑组较为明显,莫沙必利组与模型组比较,表达相对降低。(2) Real Time PCR结果与假手术组相比,模型组NF-κB/p65 mRNA的表达升高；与模型组相比,各用药组的NF-κB/p65 mRNA表达降低。与假手术组比较,模型组Cox-2 mRNA显著升高(p0.01)；与模型组比较,奥美拉唑组和中药+奥美拉唑组Cox-2 mRNA明显降低(p0.05)。(3) Western Blot结果1) IKKβ蛋白与假手术组相比,模型组的表达明显上调(p0.01)；与模型组比较,治疗各组的水平均明显下调(p0.01)；与奥美拉唑组比较,莫沙必利组的水平明显上调(p0.05),中药+奥美拉唑组的水平明显下调(p0.05)。2) NF-κB/p65蛋白高、中、低剂量组经治疗后,NF-κB/p65表达水平较模型组相比均有所下调。3)Cox-2蛋白与假手术组相比,模型组表达显著增高(p0.01)；与模型组比较,高剂量组表达水平有下降趋势,余治疗各组的水平均明显下调(p0.01)；与奥美拉唑组比较,中药+奥美拉唑组的水平显著降低(p0.05)。6炎症因子水平促炎因子(IL-1β、IL-6、IL-8):与假手术组相比,模型组明显增加(p0.05)；与模型组比较,各用药组均减少；与奥美拉唑组相比,低剂量组明显升高(p0.05);抗炎因子(IL-4、IL-10)-与假手术组相比,模型组明显减少(p0.01)；与模型组比较,各用药组均明显增加(p0.05)。结论：1通降颗粒可以促进反流性食管炎肝胃不和证大鼠体重的增长,提高其进食量、饮水量和抓力。2通降颗粒可以升高胃液pH值,减少总酸分泌量,降低总酸度,调节胃蛋白酶活性。3通降颗粒可以通过降低食管组织中IKKβ水平,下调NF-κB/p65基因及蛋白的表达,一方面降低Cox-2的表达水平,另一方面调节炎症因子的分泌,减轻炎性细胞对食管粘膜的损伤程度,保护食管粘膜上皮屏障,进一步发挥相应的治疗作用。
【关键词】：反流性食管炎 肝胃不和证 NF-κB/p65 通降颗粒 中医证型
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R259
【目录】：

• 摘要5-9
• ABSTRACT9-16
• 英文缩略语16-17
• 第一部分 文献综述17-47
• 综述一 反流性食管炎的现代医学研究进展17-38
• 参考文献27-38
• 综述二 反流性食管炎的中医药研究进展38-47
• 参考文献44-47
• 第二部分 临床研究 反流性食管炎的中医证型特点分析47-61
• 前言47
• 材料47
• 方法47-52
• 结果52-57
• 小结57
• 讨论57-59
• 结语59
• 存在问题与不足59-60
• 参考文献60-61
• 第三部分 实验研究 通降颗粒对反流性食管炎肝胃不和证模型大鼠的治疗作用机制研究61-104
• 前言61
• 材料61-64
• 方法64-73
• 结果73-92
• 小结92-93
• 讨论93-98
• 结语98-99
• 存在问题与不足99-100
• 参考文献100-104
• 附录104-105
• 致谢105-106
• 在学期间主要研究成果106-108
• 个人简历108

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