膝骨关节炎与正常人血浆microRNA表达差异研究

发布时间：2017-09-14 12:11

  本文关键词：膝骨关节炎与正常人血浆microRNA表达差异研究

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【摘要】：1研究目的：基于中医治未病的理论体系,通过对膝骨关节炎与正常人血浆microRNA异常表达的研究,筛选出膝骨关节炎与正常人血浆表达差异的microRNA,将其用于膝骨关节炎的早期诊断,或者膝骨关节炎的预后判断,给中医治未病理论提供新的观点方法。2研究方法：纳入中国中医科学院望京医院关节一科门诊13例原发膝骨关节炎的志愿者血浆和13例没有任何遗传家族病史及健康人的血浆,将获取的血浆样本送于华大基因(BGI)深圳华大基因科技服务有限公司处理后进行RNA提取工作,通过目前最先进的RT-PCR方法,采用新一代HiSeq高通量测序技术对样品中的microRNA做数字化精确性分析,分析检测筛选各标本中microRNA;筛选出的表达差异的microRNA,绘制出实验样品间的microRNA的分散图。为取得我们所需要的可信分子序列,本次实验需要对初始数据材料做去除接头、去污染序列及去低质量序列的相关处理。再对该可信任的分子序列进行RNA序列长度分布统计和样本间公共序列的统计。根据筛选条件fold change值1且差异性明显P值0.01,具有统计意义,对两组血浆进行比较筛选出潜在的骨关节炎致病基因。3研究结果：在各组的microRNA表达差异研究对比发现,在原发膝骨关节炎患者血浆中存在很多microRNA中高表达。而这些存在差异表达的microRNA,正是本次实验需要筛选出来,根据统计学,筛选条件fold change值1且差异性明显P值0.01,具有统计意义,经过实验的筛选测序,发现其中仅hsa-miR-378c、hsa-miR-1268a、hsa-miR-483-5p、 hsafmiR-375和hsa-miR-1275为符合条件的microRNA,在膝骨关节炎血浆中高表达。4结论：在所有检测样品标本已知microRNA中,在fold change值1且P值0.01的条件下,共计筛选出5中microRNA,这5种microRNA分别是hsa-miR-378c、hsa-miR-1268a、 hsa-mi R-483-5p、hsa-miR-375和hsa-miR-1275在原发骨关节炎患者血浆中表达量明显升高,本次实验研究提示我们这5种microRNA为膝骨关节炎发病的潜在致病基因。此实验结果可以为膝骨关节炎的早期诊断及预后提供新的技术,为中医治未病提供全新的依据。
【关键词】：治未病 microRNA 骨关节炎 血浆 表达
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R274.9
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 第一部分 文献综述9-30
• 综述一 中医“治未病”思想9-21
• 1 中医对膝痹病的认识10-11
• 2 中医对膝痹病的分型11-12
• 3 中医对膝痹病的治疗12-16
• 4 中医体质对膝骨关节炎的运用16-19
• 参考文献19-21
• 综述二 膝骨关节炎的西医诊疗现状21-30
• 1 膝骨关节炎的标记物研究22-23
• 2 microRNA在膝骨关节炎发病中具有重要的作用23-24
• 3 microRNA的测序技术24-25
• 4 循环microRNA有可能成为膝骨关节炎标记物的新希望25-27
• 参考文献27-30
• 第二部分 临床研究30-45
• 前言30-31
• 临床资料31-35
• 1 实验目的31
• 2 实验方法31
• 3 病例选择31-32
• 4 样品RNA准备32-33
• 5 样本间microRNA序列表达差异分析33-34
• 6 实验分析34-35
• 研究结果35-37
• 1 microRNA长度分布统计35
• 2 目标microRNA筛选35-37
• 讨论37-40
• 1 关于膝骨关节炎与中医治未病37
• 2 microRNA在膝骨关节炎中作用37-40
• 结语40-41
• 1 研究结论40
• 2 问题与展望40-41
• 参考文献41-45
• 附录45-53
• 致谢53-54
• 个人简历54

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