消癌解毒方治疗肝癌20例临床观察及调控人肝癌SMMC-7721细胞miRNA表达的研究
本文关键词：消癌解毒方治疗肝癌20例临床观察及调控人肝癌SMMC-7721细胞miRNA表达的研究
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【摘要】：研究目的临床研究采用回顾性研究方法,对未行手术治疗或出现复发转移的肝癌带瘤生存患者的中医临床症状、肿癌标志物及瘤灶情况进行比较、分析,评价疗效,证实癌毒理论及消癌解毒方在肝癌治疗中的有效性,为肝癌的中医治疗提供临床依据。实验研究主要观察消癌解毒方含药血清对人SMMC-7721肝癌细胞中hsa-miR-21-5p、hsa-miR-148a-3p表达的影响,探讨消癌解毒方抗肿瘤作用机理,为消癌解毒方临床运用提供理论依据。最终目标是提高中医治疗肝癌的诊疗水平。研究方法临床观察采用回顾性研究方法,收集符合病历纳入标准的肝癌患者资料。比较患者应用中药治疗后1个月或3个月的肿瘤标记物以及瘤灶变化情况,比较中药治疗后3个月患者的中医症状变化及体重变化,评价消癌解毒方疗效。实验研究,将人肝癌细胞株分成模型组,消癌解毒方高、中、低剂量组,顺铂组,分别加入相应培养液,药物作用24h后,用实时定量PCR方法测定细胞中hsa-miR-21-5p、 hsa-miR-148a-3p的含量,观察消癌解毒方含药血清对这两种miRNA含量的影响。应用SPSS 20.0进行统计学分析。研究结果临床观察,完成随访的20例患者均在1个月后进行了中医症状疗效评价,11例患者评价为显效,8例患者评价为有效,1例患者评价为无效,1例患者死亡。治疗3个月后,12例患者进行了复查,PR患者1例,SD患者8例,PD患者2例,1例患者死亡。治疗6个月后,11名患者进行了复查,PR患者1例,SD患者6例,PD患者2例,1例患者死亡。比较患者肿瘤指标水平发现,1个月复查与3个月复查的患者肿瘤标志物水平较治疗前未见明显上升或下降,治疗3个月后,PR, SD患者肿瘤标志物AFP均值较前有所降低,CEA、铁蛋白均值无明显变化,三者治疗前后变化均无统计学差异(P0.05)。治疗3个月后,患者胁脘胀闷、咯痰量多、情绪抑郁、舌紫瘀斑、纳差的症状均得到改善,存在统计学意义(P0.05)。治疗前后患者体重无明显变化。实验研究中,hsa-miR-21-5p在中药高剂量组及顺铂组中的表达较模型组明显降低(中药高剂量组P0.05,顺铂组P0.01)。hsa-miR-148a-3p在中药高剂量组及顺铂组中的表达较模型组显著上调(高剂量组P0.05,顺铂组P0.05)。研究结论1.以癌毒理论为指导应用消癌解毒方,可改善肝癌中晚期患者的临床症状,稳定病情。2.hsa-miR-21-5p在肝癌细胞中表达升高,消癌解毒方含药血清可通过下调hsa-miR-21-5p抑制肝癌细胞生长,达到抗肿瘤作用。3.hsa-miR-148a-3p在肝癌细胞中表达降低,消癌解毒方含药血清可通过上调hsa-miR-148a-3p抑制肝癌细胞生长,达到抗肿瘤作用。
【关键词】：肝癌 消癌解毒方 临床观察 miRNA SMMC-7721
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R273
【目录】：
- 中文摘要8-10
- ABSTRACT10-12
- 前言12-14
- 第一部分 理论研究 “癌毒”理论的内涵及“消癌解毒方”抗癌机制研究进展14-22
- 1. “癌毒”的概念14
- 2. “癌毒”的致病机理14-17
- 2.1 “癌毒”的产生15
- 2.2 “癌毒”的致病特性及病理属性15-16
- 2.3 癌毒与恶性肿瘤的关系16-17
- 3. 临床以癌毒理论辨治恶性肿瘤17-18
- 4. “消癌解毒方”的组成及相关研究18-19
- 4.1 消癌解毒方临床研究18
- 4.2 消癌解毒方实验研究18-19
- 5. 小结19
- 参考文献19-22
- 第二部分 临床研究 基于癌毒理论消癌解毒方治疗肝癌20例病例观察22-39
- 研究背景22
- 临床资料及诊疗标准22-24
- 1. 病例来源22
- 2. 诊疗标准22-24
- 2.1 肝癌的西医诊断标准23
- 2.2 中医证侯诊断标准23
- 2.3 病例纳入标准23
- 2.4 病例排除标准(排除符合以下情况之一者)23
- 2.5 病例脱落及终止标准23-24
- 研究方法和内容24-26
- 1. 研究方法24
- 2. 研究内容24-26
- 2.1 调查方法24
- 2.2 疗效评价标准24-26
- 研究结果26-38
- 1. 一般资料26-27
- 1.1 性别及年龄分布26
- 1.2 病理诊断26
- 1.3 瘤灶部位26-27
- 1.4 病程27
- 1.5 既往有无肝炎病史27
- 2. 治疗情况27-28
- 2.1 既往治疗情况28
- 2.2 观察期间治疗28
- 3. 疗效评价28-31
- 3.1 1个月复查28-29
- 3.2 3个月复查29-31
- 3.3 体重变化31
- 4. 个案举例31-32
- 5. 讨论32-38
- 5.1 中医治疗肿瘤之理33
- 5.2 中医治疗肿瘤之法33-34
- 5.3 中医治疗肿瘤之方34-35
- 5.4 中医治疗肿瘤之药35-36
- 5.5 恶性肿瘤与患者心态的关系36-37
- 5.6 恶性肿瘤患者的饮食37-38
- 参考文献38-39
- 第三部分 实验研究 消癌解毒方对人肝癌细胞株中hsa-miR-21-5p、hsa-miR-148a-3p表达的影响39-48
- 前言39
- 1. 实验材料39-40
- 1.1 细胞株39
- 1.2 实验动物39-40
- 1.3 实验药品及其制备方法40
- 1.4 主要实验试剂及仪器40
- 2. 实验准备40-41
- 2.1 细胞培养与传代40
- 2.2 含药血清制备40-41
- 2.3 分组与给药41
- 3. 实验方法41-45
- 3.1. RNA抽提和质41-43
- 3.2. cDNA合成方法43-44
- 3.2.1 制备RT混合反应液43-44
- 3.2.2 在PCR扩X椧墙蠷T反应：44
- 3.3. 实时定量PCR方法44-45
- 4. 实验结果45-47
- 4.1 总RNA抽提结果45-46
- 4.2 hsa-miR-21-5p及hsa-miR-21-5p在不同剂量组中的表达46-47
- 5. 讨论47-48
- 参考文献48-49
- 总结49-50
- 1. 结论49
- 2. 研究创新点49
- 3. 研究的不足之处49
- 4. 研究展望49-50
- 附录50-53
- 攻读硕士学位期间取得的学术成果53-54
- 致谢54
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