养阴清热、润肺止咳验方治疗放射性肺炎的实验研究

发布时间：2017-10-04 17:08

  本文关键词：养阴清热、润肺止咳验方治疗放射性肺炎的实验研究

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【摘要】：目的 建立大鼠放射性肺损伤模型,观察自拟验方对大鼠一般情况、受损肺组织的病理改变、TLR4信号通路分子蛋白和相关细胞因子表达的影响,探讨其作用机制。为其临床使用和新药筛选提供实验依据。方法将黄芪、南沙参、北沙参、百合、石斛、紫菀、枇杷叶、杏仁、百部、当归组成的临床自拟验方,按不同的质量比例,组成三个不同的剂量加减方,包括中药1、中药2(临床最常用剂量)、中药3。84只SD雄性大鼠平均随机分成照射+蒸馏水组、照射+3个中药组、照射+地塞米松组、正常对照组、正常中药组(健康鼠+中药2),共7组；适应性喂养7天,禁食、不禁水24h后进入实验。照射完成后次日以1ml/100g开始灌服中药、地塞米松或蒸馏水,灌药期间观察大鼠的精神状态、食欲、毛色、体重等一般情况的改变。连续喂药14天后处死大鼠,取出肺组织肉眼观察后行HE染色镜下观察病理变化并评分。各组肺组织无菌条件下切碎后磨碎,Western blot和生物图像灰度分析检测TLR4信号通路的蛋白分子MyD88、TRAF-6、TRIF、TLR4表达量；Elisa法测组织匀浆上清液TNF-α、IL-17、TGF-β的表达量,通过SPSS17.0统计软件进行数据分析。结果1.大鼠的一般情况各照射组大鼠于照射后的第5天左右开始出现精神萎靡、食欲下降、毛色无光泽、发黄、干枯、竖起甚至脱毛等现象,发生率90%。比较中药1、蒸馏水组的大鼠,经中药2、中药3及地塞米松治疗后大鼠的一般状态更好。2.大鼠体重变化比较中药1、蒸馏水照射组的大鼠,经中药2、中药3及地塞米松治疗后大鼠的体重比中药1、蒸馏水组大鼠的体重明显增加(p0.05),而中药2、中药3、地塞米松照射组之间大鼠体重增长差异无统计学意义(p0.05)。3.病理改变各照射组大鼠均出现急性炎症表现,病变主要以渗出为主。主要病理表现为：肺间隔增厚,肺泡壁增宽,肺泡壁毛细血管充血,肺间质充血、水肿,肺泡间隔及部分肺泡腔内见散在中性粒细胞浸润。直观可见,其中中药2、中药3、地塞米松照射组大鼠炎症反应较中药1、蒸馏水照射组轻。4.肺损伤病理评分与正常组对比,照射组病理评分结果明显高于正常组,差异具有明显统计学意义(p0.01)。中药2、中药3、地塞米松照射组大鼠评分情况明显小于中药1、蒸馏水照射组(p0.05),但在中药2、中药3、地塞米松照射组三组之间并无差异(p0.05)。5.TLR4信号通路活性经Western blot及其生物图像灰度值分析,结果与正常组对比,照射组MyD88、TRAF-6、TRIF、TLR4表达量明显升高。中药2、中药3、地塞米松照射组大鼠MyD88、TRAF-6、TRIF、TLR4表达情况明显低于中药1、蒸馏水照射组。6.部分细胞因子表达经Elisa检测,结果与正常组对比,照射组TNF-α、IL-17、 TGF-β的表达量明显升高,差异具有统计学意义(p0.05)。中药2、中药3、地塞米松照射组TNF-α、IL-17、TGF-β表达情况较中药1、蒸馏水照射组明显减少,差异具有统计学意义(p0.05),但在中药2、中药3、地塞米松照射组三组之间并无差异(p0.05)。结论 自拟验方可改善大鼠的生存质量,明显减轻放射性肺炎大鼠肺部炎症反应,减轻肺间质充血、渗出、出血、水肿及肺泡结构破坏。其机制可能通过抑制TLR4信号通路及减少肺局部细胞因子的表达阻止或延缓放射性肺炎的发生发展,其短期效果几乎与激素相当。实验结果表明,中药2浓度为治疗最佳剂量浓度。
【关键词】：放射性肺炎 大鼠 病理 信号通路 细胞因子
【学位授予单位】：浙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R273
【目录】：

• 英文缩略语表5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-13
• 一、材料与方法13-23
• (一) 实验材料13-16
• 1. 实验动物13
• 2. 实验药物13
• 3. 试剂与器材仪器13-16
• (二) 实验方法16-23
• 1. 实验动物分组16
• 2. 实验药物制备16
• 3. 实验动物造模16
• 4. 实验动物处理16-17
• 5. 观察指标17
• 6. HE染色肺组织病理学步骤17-18
• 7. Western blot检测MyD88表达的实验步骤18-21
• 8. Elisa法测TNF-α含量的实验步骤21-23
• 二、结果23-28
• (一) 大鼠的一般情况23
• (二) 大鼠体重变化23-24
• (三) 肺病理改变24
• (四) 肺损伤评分24-25
• (五) 信号传导通路分子蛋白MyD88、TRAF-6、TRIF、TLR4的变化25-26
• (六) 部分细胞因子检测结果26-28
• 三、分析与讨论28-34
• (一) 放射性肺炎大鼠模型的评价28
• (二) 放射性肺炎防治研究现状与发展趋势28-30
• (三) 自拟养阴清热、润肺止咳验方防治放射性肺炎的疗效评价30-31
• 1. 自拟验方对大鼠生存质量的影响30-31
• 2. 自拟验方对放射性肺炎病理的影响31
• (四) 养阴清热、润肺止咳验方防治放射性肺炎的机制31-34
• 1. 自拟验方防治放射性肺炎的细胞生物学机制31-33
• 2. 自拟验方防治放射性肺炎的分子信号机制33-34
• 结论34-35
• 参考文献35-38
• 附图38-42
• 致谢42-43
• 文献综述43-51
• 参考文献48-51

【参考文献】

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本文编号：971822